【摘要】：目的 建立慢性銅綠假單胞菌（P. aeruginosa, PA）生物膜肺部感染的大鼠模型，觀察其肺部的細(xì)菌學(xué)、病理學(xué)特點(diǎn)及TNF-a反應(yīng)，探討PA生物膜的致病作用。 方法 (1)體外試驗(yàn)，試管雙倍稀釋法，測定LFX（左旋氧氟沙星）及CAZ(頭孢他啶)對海藻酸鹽微粒包裹的PAO579及浮游PAO579的MIC、MBC。(2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，將60只純種健康雄性SPF級Wistar大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組（藻酸鹽珠組，30只）與對照組（浮游菌組，30只），兩組分別從切開的氣管內(nèi)注入0.1ml 1×109CFU/ml海藻酸鹽微粒包裹的PAO579及浮游PAO579菌液，建立生物膜PA及浮游PA肺部感染動物模型。術(shù)后第3、7、14天評估兩組大鼠肺部的細(xì)菌學(xué)、病理學(xué)特點(diǎn)及TNF-a反應(yīng)。 結(jié)果 (1)體外抗菌試驗(yàn) LFX、CAZ對海藻酸鹽微粒包裹的PAO579的MIC、MBC均高于浮游PAO579。(2)肺細(xì)菌學(xué) 第3、7、14天，藻酸鹽珠組的CFU顯著高于浮游菌組（P=0.002 P=0.004 P=0.002）。第14天，藻酸鹽珠組全部能培養(yǎng)出PA，而浮游菌組細(xì)菌全部被機(jī)體清除，活菌數(shù)為0（P0.001）。(3)肺部大體病理 藻酸鹽珠組病變顯著重于浮游菌組,藻酸鹽珠組以Ⅳ級病變?yōu)橹鳎∮尉M以Ⅰ~Ⅱ級病變?yōu)橹�。�?、7天藻酸鹽珠組Ⅳ級病變及肺膿腫發(fā)生顯著高于浮游菌組（P0.001 P=0.013）。(4)肺組織病理 藻酸鹽珠組的炎癥反應(yīng)程度較浮游菌組嚴(yán)重。第3天，兩組鏡下均為急性炎癥反應(yīng)，以PMN浸潤為主，第14天，藻酸鹽珠組表現(xiàn)為慢性炎癥，鏡下單核巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞增生，泡沫細(xì)胞反應(yīng)，多核巨細(xì)胞出現(xiàn)，或（伴）紅細(xì)胞出現(xiàn)，纖維組織增生，而浮游菌組均恢復(fù)為正常肺組織。(5)第3、7、14天，藻酸鹽珠組TNF-a水平均高于浮游菌組（P=0.002 P=0.002 P=0.022）。相關(guān)分析表明，肺TNF-a水平與肺大體病理有明顯相關(guān)性。 結(jié)論 (1)體外實(shí)驗(yàn)顯示，PA海藻酸鹽微菌珠懸液對抗生素的敏感性較PA浮游菌差，說明PA生物膜（藻酸鹽）起屏障作用，能限制或延緩抗生素分子向BF內(nèi)滲透，保護(hù)細(xì)菌抵御抗菌藥物的殺傷作用。(2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示，，藻酸鹽珠組的肺損傷及炎癥反應(yīng)程度顯著重于浮游菌組，提示PA生物膜（藻 WP=5 酸鹽）有介導(dǎo)肺免疫損傷作用。(3)由于PA生物膜（藻酸鹽）的\[蔽保護(hù)，PA得以在肺內(nèi)定植、繁殖，存活時間長，提示PA生物膜（藻酸鹽）有保護(hù)細(xì)菌逃逸宿主免疫防御作用，是慢性PA肺部感染的重要原因。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號】：R563.1

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本文編號：2664048