【摘要】： 目的：觀察白細(xì)胞介素32(Interleukin-32, IL-32)在博來霉素(bleomycin, BLM)誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化過程中各期的表達(dá)和糖皮質(zhì)激素治療后其表達(dá)的變化,探討IL-32在肺纖維化發(fā)病機(jī)制中的作用及意義。 方法：將72只體重為20-22g的雄性小鼠隨機(jī)分為對照組、實(shí)驗(yàn)組和治療組,每組24只。對照組給予0.9%氯化鈉注射液0.04ml,實(shí)驗(yàn)組和治療組給予0.04ml的BLM(5mg/kg)一次性氣管內(nèi)灌注用以復(fù)制肺纖維化模型,治療組在BLM灌注后每天給予地塞米松(dexamethasone, DM)5mg/kg腹腔注射。然后各組分別于第3、7、14和28天各處死6只小鼠,取肺組織,做病理切片、免疫組織化學(xué)染色,應(yīng)用Western Blot法測定IL-32表達(dá)。 結(jié)果：對照組的小鼠肺組織病理學(xué)檢查改變輕微,炎性細(xì)胞浸潤少,肺泡炎性滲出少見,肺泡間隔無增厚,無成纖維細(xì)胞的增殖,沒有明顯的肺纖維化性改變。實(shí)驗(yàn)組肺組織病理切片按時(shí)間順序呈現(xiàn)由肺泡炎至纖維化動(dòng)態(tài)改變,早期肺泡炎性滲出較重,肺泡間隔有大量的炎性細(xì)胞浸潤。中晚期可見炎性滲出逐漸減輕,肺泡萎陷、消失,大小不等,肺泡間隔逐漸增厚,成纖維細(xì)胞大量增殖；實(shí)驗(yàn)組的肺泡炎和肺纖維化評分均高于對照組和治療組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；治療組病理學(xué)檢查也按時(shí)間順序呈現(xiàn)由肺泡炎到肺纖維化的動(dòng)態(tài)改變,但肺泡炎和肺纖維化的程度較實(shí)驗(yàn)組輕。免疫組織化學(xué)檢測顯示IL-32在對照組僅有少量的表達(dá),主要在肺泡壁上表達(dá),實(shí)驗(yàn)組顯示IL-32的表達(dá)在第7、14天明顯增高,第28天明顯降低,主要在肺泡壁上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和肺泡腔的滲出液中表達(dá),治療組的表達(dá)相對較輕,但仍高于對照組。應(yīng)用Western Blot法測定IL-32蛋白的表達(dá)顯示,對照組僅有少量的表達(dá),各個(gè)時(shí)間點(diǎn)沒有明顯的差異(P0.05),實(shí)驗(yàn)組中IL-32蛋白表達(dá)從第3天開始高于對照組和治療組,第14天達(dá)到高峰,第28天降低,但仍較對照組和治療組高(P0.01)。組內(nèi)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)除了第3天與第28天相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異外(P0.05),其余均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；治療組也呈現(xiàn)類似的趨勢,但比實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)明顯減輕,有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 結(jié)論：IL-32在肺纖維化形成過程中存在高表達(dá),可能在肺纖維化形成的早中期發(fā)揮重要作用；地塞米松對肺纖維化的早期具有一定的治療作用。
【圖文】：

天更加明顯，部分肺泡萎陷消失。IL一犯主要在肺泡上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、細(xì)支氣管上皮細(xì)胞中表達(dá)，陽性細(xì)胞呈棕褐色顆粒狀，成纖維細(xì)胞l一掃表達(dá)lL一32較弱;治療組(圖2.F一I)也呈現(xiàn)類似的變化順序，與實(shí)驗(yàn)組相比，染色明顯減輕，且肺泡炎和纖維化的程度較實(shí)驗(yàn)組輕。

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文實(shí)驗(yàn)組、治療組和對照組的 westernblofting法檢測IL一32蛋白的表達(dá)(圖3、4和表6)治療組對照組實(shí)驗(yàn)組IL一32旦一aetin圖3肺纖維化過程中各組小鼠肺組織中IL一32蛋白印跡 Fig.3TheexPressionsofIL一 2ProteinineaehgrouPbyWesternBlotting注:p一actin為內(nèi)參組別表 6IL一2蛋白表達(dá)情況比較(x士s，n=6):Tab· 6TheeomParisonofIL一32ProteinexPressions第3天第7天第14天第28天治療組6 0.232士 o.o22ab0.363士0.021”b 0.571士0.021”b 0.303士0.0科”b實(shí)驗(yàn)組60667士 o.ol7ab0.591士0.022“b 0.977士0.013“bO，678士0.012”b對照組6 0.162士 0.0210.163士0.020 0.169士0.030 0.160士0.023注:實(shí)驗(yàn)組與同一天對照組和治療組比較，“P<0.01;除實(shí)驗(yàn)組第3天與第28天IL一32表達(dá)相比外0.05，同組不同天IL一32表達(dá)之間兩兩相比，，bP<0.ol。
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R563

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本文編號(hào)：2659883