【摘要】：前言 以肺纖維化為結(jié)局的間質(zhì)性肺疾病(ILD)病因不明、發(fā)病機(jī)制復(fù)雜且無(wú)特效治療,為國(guó)際呼吸學(xué)界的研究熱點(diǎn)之一。無(wú)論病因如何,ILD從肺泡炎的始動(dòng)到肺纖維化的形成,成纖維細(xì)胞的功能活化是導(dǎo)致纖維化形成的“共同途徑”。因此,深入圍繞著成纖維細(xì)胞的代謝和功能及其調(diào)控可能成為從根本上干預(yù)肺纖維化進(jìn)展的重要環(huán)節(jié)。胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF-1)是重要的生長(zhǎng)因子,由于在結(jié)構(gòu)上與胰島素相似,因此對(duì)細(xì)胞能量代謝,特別是糖代謝可能發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用。因此,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)IGF-1以及與胰島素共同調(diào)控人肺成纖維細(xì)胞糖代謝及功能的研究,為通過(guò)調(diào)控成纖維細(xì)胞糖代謝進(jìn)而阻止器官纖維化的發(fā)生發(fā)展提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)材料與方法 一、實(shí)驗(yàn)材料 1.正常人胚肺成纖維細(xì)胞(LF)株由中國(guó)醫(yī)大病原生物教研室提供2.5′-FITC熒光標(biāo)記標(biāo)記探針(大連寶生物公司提供)、IGF-1(SIG-MA公司)、兔抗人彈性蛋白/膠原蛋白抗體(由武漢博士德公司)、羊抗人HK-2/GLUT-4抗體(ADI公司)、RT-PCR一步法試劑盒(Promega公司)、Trizol(Amersco提供)。 二.實(shí)驗(yàn)方法 1.分組干預(yù) 選擇長(zhǎng)成良好單層的二倍體人胚肺成纖維細(xì)胞,分別給與空白對(duì)照、100ng/ml IGF-1、200ng/ml IGF-1、100ng/ml IGF-1+100ng/ml Insulin、100ng/ml IGF-1+200ng/ml Insulin、100ng/ml Insulin、200ng/ml Insulin共7組每組5瓶細(xì)胞。 2.標(biāo)本采集與測(cè)定 刺激24h,收集細(xì)胞培養(yǎng)液真空法凍干,Western blotting檢測(cè)彈性蛋白
【圖文】：

在GIF一1的作用下表達(dá)明顯增加，同樣存在一定的劑量依賴(lài)關(guān)系;對(duì)彈性蛋白及膠原蛋白刺激作用不明顯;同時(shí)如lna麟所示胰島素GIF一1對(duì)肺成纖維細(xì)胞合成分泌彈性蛋白及膠原蛋白的刺激作用。.GIF一1和胰島素影響廿表達(dá)膠原和彈性蛋白的Wesetm雜交光密度值(又，s)1組2組3組4組5組6組7組108.0土1.39155.0土3.6土1.83193.6全4.51134.4上2.07141.4士1.82117.5土1.46123，

本文編號(hào)：2659308