【摘要】：前言 以肺纖維化為結局的間質性肺疾病(ILD)病因不明、發(fā)病機制復雜且無特效治療,為國際呼吸學界的研究熱點之一。無論病因如何,ILD從肺泡炎的始動到肺纖維化的形成,成纖維細胞的功能活化是導致纖維化形成的“共同途徑”。因此,深入圍繞著成纖維細胞的代謝和功能及其調控可能成為從根本上干預肺纖維化進展的重要環(huán)節(jié)。胰島素樣生長因子(IGF-1)是重要的生長因子,由于在結構上與胰島素相似,因此對細胞能量代謝,特別是糖代謝可能發(fā)揮重要調節(jié)作用。因此,本實驗通過對IGF-1以及與胰島素共同調控人肺成纖維細胞糖代謝及功能的研究,為通過調控成纖維細胞糖代謝進而阻止器官纖維化的發(fā)生發(fā)展提供實驗依據(jù)。 實驗材料與方法 一、實驗材料 1.正常人胚肺成纖維細胞(LF)株由中國醫(yī)大病原生物教研室提供2.5′-FITC熒光標記標記探針(大連寶生物公司提供)、IGF-1(SIG-MA公司)、兔抗人彈性蛋白/膠原蛋白抗體(由武漢博士德公司)、羊抗人HK-2/GLUT-4抗體(ADI公司)、RT-PCR一步法試劑盒(Promega公司)、Trizol(Amersco提供)。 二.實驗方法 1.分組干預 選擇長成良好單層的二倍體人胚肺成纖維細胞,分別給與空白對照、100ng/ml IGF-1、200ng/ml IGF-1、100ng/ml IGF-1+100ng/ml Insulin、100ng/ml IGF-1+200ng/ml Insulin、100ng/ml Insulin、200ng/ml Insulin共7組每組5瓶細胞。 2.標本采集與測定 刺激24h,收集細胞培養(yǎng)液真空法凍干,Western blotting檢測彈性蛋白
【圖文】：

在GIF一1的作用下表達明顯增加，同樣存在一定的劑量依賴關系;對彈性蛋白及膠原蛋白刺激作用不明顯;同時如lna麟所示胰島素GIF一1對肺成纖維細胞合成分泌彈性蛋白及膠原蛋白的刺激作用。.GIF一1和胰島素影響廿表達膠原和彈性蛋白的Wesetm雜交光密度值(又，s)1組2組3組4組5組6組7組108.0土1.39155.0土3.6土1.83193.6全4.51134.4上2.07141.4士1.82117.5土1.46123，

本文編號：2659308