本文關(guān)鍵詞：沙美特羅對(duì)哮喘小鼠炎癥反應(yīng)和樹(shù)突狀細(xì)胞分泌促炎因子功能的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的：以急性哮喘小鼠模型為研究對(duì)象，選取小鼠骨髓來(lái)源的樹(shù)突狀細(xì)胞（DCs）為研究目標(biāo)，通過(guò)給與哮喘小鼠霧化吸入長(zhǎng)效β2腎上腺素受體激動(dòng)劑沙美特羅（salemeterol）以及體外培養(yǎng)樹(shù)突狀細(xì)胞，研究長(zhǎng)效β2腎上腺素受體激動(dòng)劑沙美特羅對(duì)哮喘炎癥反應(yīng)以及DCs分泌促炎因子的影響。以此來(lái)探索長(zhǎng)效β2腎上腺素受體激動(dòng)劑對(duì)于支氣管哮喘治療的新機(jī)制。 研究方法：制備并鑒定急性哮喘小鼠的模型，取40只年齡6-8周、體重相近的雌性BALB/c小鼠，隨機(jī)化分為對(duì)照組，卵蛋白（OVA）模型組，卵蛋白+脂多糖（LPS）組和治療組，每組10只小鼠，在第0,14天致敏分別對(duì)各組小鼠支氣管肺泡灌洗液（BALF）中炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)并分類，酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）法檢測(cè)BALF中促炎因子白細(xì)胞介素1β（IL-1β），白細(xì)胞介素6（IL-6），腫瘤壞死因子α（TNF-α）的水平；對(duì)肺組織行阿新藍(lán)-過(guò)碘酸雪夫（AB-PAS）染色和蘇木素-伊紅染色（HE）染色,了解氣道炎癥的程度；取血清采用ELISA法檢測(cè)OVA-specific IgE的水平，了解沙美特羅除了能舒張氣管平滑肌外，對(duì)急性哮喘氣道炎癥改善的作用并探討其機(jī)制。采用粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）體外擴(kuò)增C57BL/6小鼠DCs的方法，于DCs培養(yǎng)第6天給予不同濃度的沙美特羅干預(yù)，并加入外源性LPS，于培養(yǎng)不同時(shí)間點(diǎn)收集DCs。流式細(xì)胞儀檢測(cè)DCs的凋亡及表面共刺激分子CD80、CD86、CD40、CD11c~+及MHC-Ⅱ類分子的表達(dá)；ELISA法檢測(cè)上清中細(xì)胞因子促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α；real-time PCR檢測(cè)促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α基因表達(dá)情況。 結(jié)果：（1）沙美特羅對(duì)哮喘小鼠BALF的影響：模型組和脂多糖組BALF中可見(jiàn)大量炎癥細(xì)胞聚集，其中以嗜酸性粒細(xì)胞為主，且后者更為嚴(yán)重，對(duì)照組BALF中未見(jiàn)明顯的炎癥細(xì)胞聚集，而治療組能明顯減輕哮喘小鼠BALF中炎癥浸潤(rùn)的程度。（2）沙美特羅對(duì)哮喘氣道炎癥的作用：HE染色和AB-PAS染色均提示模型組和脂多糖組部分支氣管上皮粘膜有明顯的杯狀細(xì)胞增生，管腔內(nèi)有大量粘液栓塞且氣道周圍大量炎癥細(xì)胞聚集。對(duì)照組病理表現(xiàn)為支氣管、血管周圍均無(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，無(wú)杯狀細(xì)胞增生。治療組小支氣管、血管黏膜下炎癥細(xì)胞數(shù)量明顯減少，輕度杯狀細(xì)胞增生。（3）沙美特羅對(duì)哮喘炎癥因子水平的影響：取小鼠外周血，血清中檢測(cè)OVA特異性的IgE，并在BALF中檢測(cè)IL-1β，IL-6，TNF-α水平，其中模型組和脂多糖組明顯高于對(duì)照組和治療組，治療組與脂多糖組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療組與模型組之間沒(méi)有明顯差異；（4）沙美特羅對(duì)DCs分泌促炎因子的影響：體外培養(yǎng)DCs，通過(guò)流式檢測(cè)不同藥物濃度引起細(xì)胞凋亡的程度，發(fā)現(xiàn)沙美特羅濃度為10-4mol/L能夠引起DCs的明顯凋亡，從基因及蛋白水平檢測(cè)促炎因子IL-1β，IL-6，TNF-α表達(dá)水平在DCs中的變化；結(jié)果是在蛋白水平中，濃度為10-5mol/L的沙美特羅抑制DCs分泌促炎因子最明顯，DCs在沙美特羅刺激3小時(shí)后IL-1β，IL-6，TNF-α基因表達(dá)受到明顯抑制。 結(jié)論：⑴沙美特羅能改善哮喘小鼠炎癥病情，并能明顯減輕肺泡灌洗液及氣道周圍炎癥程度。⑵沙美特羅通過(guò)抑制促炎癥因子水平，調(diào)控哮喘炎癥反應(yīng)。⑶沙美特羅影響哮喘的機(jī)制可能是通過(guò)起著關(guān)鍵免疫作用DCs而起作用的。
【關(guān)鍵詞】：支氣管哮喘 樹(shù)突狀細(xì)胞 沙美特羅 促炎因子
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R562.25
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 縮略詞表9-10
• 前言10-14
• 材料與方法14-29
• 一、對(duì)象和試劑14-18
• 二、實(shí)驗(yàn)方法18-29
• （一）急性哮喘小鼠模型的建立及鑒定18-19
• （二）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組19-20
• （三）取材及標(biāo)本處理20-21
• （四）各種染色步驟21-23
• （五）ELISA 實(shí)驗(yàn)步驟23-24
• （六）小鼠 DCs 的培養(yǎng)與鑒定24-28
• （七）統(tǒng)計(jì)學(xué)處理28-29
• 結(jié)果29-38
• 討論38-43
• 全文小結(jié)43-45
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 綜述49-59
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 發(fā)表論文及科研情況59-60
• 附發(fā)表英文論著一篇60-68
• 致謝68-69

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 周林福,殷凱生;Toll-like receptors: function and roles in asthma[J];Chinese Medical Journal;2004年11期

  本文關(guān)鍵詞：沙美特羅對(duì)哮喘小鼠炎癥反應(yīng)和樹(shù)突狀細(xì)胞分泌促炎因子功能的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：265685