【摘要】：急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是由各種致病因素(包括肺內(nèi)和肺外)所導(dǎo)致的急性彌漫性肺損傷以及進(jìn)而發(fā)展的急性呼吸衰竭,主要病理特征是肺內(nèi)或全身炎癥失控致肺微血管通透性增高,肺泡滲出富含蛋白質(zhì)的液體,進(jìn)而肺水腫及透明膜形成,常伴肺泡出血。已有研究發(fā)現(xiàn),ARDS患者血清氨基末端腦鈉肽前體(N-terminal pro-brain natriuretic peptid,NT-proBNP)明顯升高,由于NT-proBNP與腦利鈉肽(Brain Natriuretic Peptide,BNP)是等摩爾分泌的,NT-proBNP水平的升高在一定程度上可以反映BNP的升高。近年來越來越多的研究發(fā)現(xiàn),腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system,RAS)在ARDS的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的作用,而BNP是RAS的天然拮抗劑。我們首先研究ARDS患者血清NT-proBNP水平改變及其意義,并通過建立脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)介導(dǎo)的大鼠ARDS模型,探討重組人腦利鈉肽(recombinant human brain natriuretic peptide,rhBNP)對(duì)ARDS大鼠的干預(yù)作用及其機(jī)制。目的探討ARDS患者血清NT-proBNP水平改變及其意義,并進(jìn)一步研究rhBNP對(duì)LPS介導(dǎo)的ARDS大鼠的干預(yù)作用及其機(jī)制。方法第一部分:選取36名入住廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院ICU的ARDS患者。以患者入住綜合ICU作為研究起點(diǎn),入院28天內(nèi)患者痊愈好轉(zhuǎn)出院、轉(zhuǎn)出ICU或死亡作為研究終點(diǎn),剔除放棄治療或自動(dòng)出院的病例。根據(jù)轉(zhuǎn)歸將ARDS患者分為存活組和死亡組。各組患者入住ICU后行脈搏指示性連續(xù)心輸出量(pulse-indicated continuous cardiac output,PICCO)監(jiān)測(cè)血流動(dòng)力學(xué),記錄各組患者入住ICU時(shí),入住ICU24h,入住ICU24h時(shí)的血管外肺水指數(shù)(extravascular lung water index,EVLWI),肺血管通透性指數(shù)(pulmonary vascular permeability index,PVPI)值。檢測(cè)各組患者入住ICU時(shí),入住ICU24h,入住ICU24h時(shí)的血清NT-pro BNP、C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)。同時(shí)檢測(cè)各組患者入住ICU時(shí)的血?dú)夥治觥１容^存活組和死亡組患者NT-pro BNP,CRP,EVLWI及PVPI,并懫用雙變量Pearson相關(guān)分析法分析NT-pro BNP與氧合指數(shù)(oxygenation index,OI)、CRP和EVLWI的相關(guān)性。第二部分:利用腹腔注射LPS復(fù)制ARDS大鼠模型,觀察不同劑量的rh BNP對(duì)ARDS大鼠6h及12h生存率以及肺組織濕/干重比的影響。分別利用蘇木素-伊紅染色(hematoxylin-eosin staining,HE)及電鏡觀察不同劑量的rh BNP對(duì)ARDS大鼠肺組織病理改變以及超微結(jié)構(gòu)改變的影響。采用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(terminal-deoxynucleoitidyl transferase mediated d UTP nick end labeling,TUNEL)檢測(cè)不同劑量的rh BNP對(duì)ARDS大鼠肺細(xì)胞凋亡的影響。分別采用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time quantitative-PCR,RT-PCR)及酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)不同劑量的rh BNP對(duì)ARDS大鼠肺組織炎癥因子白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)以及腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因及蛋白表達(dá)的影響。采用ELISA檢測(cè)不同劑量的rh BNP對(duì)ARDS大鼠肺組織血管緊張素II(Angiotensin II,Ang II)及血管緊張素1-7(Angiotensin1-7,Ang1-7)蛋白水平的影響。采用免疫組織化學(xué)法(immunohistochemistry,IHC)觀察rh BNP對(duì)ARDS大鼠肺組織血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)及血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(angiotensin-converting enzyme2,ACE2)蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果第一部分:各時(shí)間點(diǎn)死亡組NT-pro BNP水平均顯著高于存活組(P0.01),但兩組間CRP水平?jīng)]有顯著性差異(P0.05)。PICCO監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示,ARDS患者入ICU時(shí)EVLWI及PVPI均高于正常;死亡組在入ICU時(shí)、入ICU48h時(shí)EVLWI均顯著高于存活組(P0.01,P0.01);死亡組在入ICU48h時(shí)PVPI明顯高于存活組(P0.05)。ARDS患者在入住ICU時(shí)血清NT-pro BNP水平與OI(r=-0.228,P0.05)及血清CRP水平(r=0.085,P0.05)均沒有直線相關(guān)性,但與EVLWI成正相關(guān)(r=0.774,P0.01)。第二部分:低劑量及高劑量rh BNP均能顯著減輕ARDS大鼠肺水腫(P0.01,P0.01),降低ARDS大鼠12h病死率(P0.05)。HE染色及電鏡結(jié)果顯示,低劑量及高劑量rh BNP均顯著改善肺組織的病理?yè)p傷。同時(shí),低劑量及高劑量rh BNP均顯著降低ARDS大鼠肺細(xì)胞的凋亡率(P0.01,P0.01)。低劑量及高劑量rh BNP不僅可以抑制LPS誘導(dǎo)的ARDS大鼠肺組織炎癥因子IL-1β(P0.01,P0.01)及TNF-α(P0.01,P0.01)基因的表達(dá),還降低了肺組織勻漿IL-1β(P0.01,P0.05)及TNF-α(P0.01,P0.01)蛋白的水平。雖然低劑量及高劑量rh BNP對(duì)肺組織IL-6基因表達(dá)的影響均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,P0.05),低劑量rh BNP對(duì)肺組織勻漿IL-6蛋白水平的影響也沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但高劑量rh BNP可以明顯降低肺組織勻漿IL-6蛋白的水平(P0.05)。盡管低劑量rh BNP對(duì)LPS誘導(dǎo)的ARDS大鼠肺組織勻漿Ang II及Ang1-7蛋白水平的影響沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但高劑量rh BNP可以明顯抑制ARDS大鼠肺組織勻漿Ang II蛋白的水平(P0.05),并顯著上調(diào)Ang1-7蛋白的水平(P0.05)。此外,低劑量及高劑量rh BNP均可以顯著抑制LPS誘導(dǎo)的ARDS大鼠肺組織ACE蛋白的表達(dá)(P0.01,P0.01),同時(shí)明顯上調(diào)ACE2蛋白的表達(dá)(P0.05,P0.05)。結(jié)論(1)ARDS患者血清NT-pro BNP水平與肺水腫程度具有正相關(guān)性,早期動(dòng)態(tài)聯(lián)合監(jiān)測(cè)血清NT-pro BNP、EVLWI及PVPI對(duì)評(píng)估ARDS患者的預(yù)后具有一定的價(jià)值。(2)LPS介導(dǎo)的ARDS大鼠存在肺組織RAS的局部穩(wěn)態(tài)失衡,rh BNP能通過調(diào)節(jié)ARDS大鼠肺組織RAS的局部穩(wěn)態(tài)失衡以改善肺組織的炎癥損傷以及肺細(xì)胞凋亡,從而減輕ARDS大鼠的肺水腫。
【圖文】：

圖 1-1 PICCO 連接示意圖Figure 1-1 PICCO connection diagram.4 氧合指數(shù)（oxygenation index,OI）的檢測(cè)于入住 ICU 時(shí)留取各組患者動(dòng)脈血 3ml ，使用血?dú)夥治鰞x檢測(cè)，記錄，F(xiàn)iO2，計(jì)算 OI（OI=PO2/FiO2）。分析血清 NT-proBNP 和 OI 的相關(guān) 統(tǒng)計(jì)方法采用 SPASS19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，所有計(jì)量資料用（x s）表示。兩組間采用兩樣本均數(shù) t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較采用 2檢驗(yàn)；各參數(shù)間的相關(guān)性雙變量 Pearson 相關(guān)分析。以 P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果

表1-1 各組患者一般情況的比較Table 1-1 General conditions among groups of patients別 例數(shù) 男性患者例數(shù)[n(%)] 年齡（歲）活組 26 17（65.4） 55.0±21.1亡組 10 6（60.0）▲58.1±19.0▲存活組相比，▲P>0.05.2 各組患者血清 NT-proBNP 及 CRP 的比較檢測(cè)結(jié)果顯示，死亡組各時(shí)間點(diǎn)血清 NT-proBNP 水平均顯著高（P<0.01），但兩組間血清 CRP 水平?jīng)]有顯著性差異（P>0.05） 1-2，圖 1-3，表 1-2，，表 1-3）
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R563.8

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 沈琪琦;張之齡;朱健;盛凈;;丹參酮對(duì)脂多糖性急性肺損傷大鼠肺組織ACE2表達(dá)的影響[J];臨床急診雜志;2011年03期

2 張劍鋒;李超乾;陳洪流;溫漢春;曹杰;;重組人腦利鈉肽治療急性呼吸窘迫綜合征的初步臨床觀察[J];中國(guó)急救醫(yī)學(xué);2009年10期

本文編號(hào)：2622794