【摘要】： 背景：哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是細(xì)胞內(nèi)多種重要信號(hào)傳導(dǎo)通路的樞紐,具有調(diào)節(jié)細(xì)胞的生存、增殖和凋亡等重要生理功能。目前越來越多的研究顯示mTOR信號(hào)通路在炎癥反應(yīng)的起始和發(fā)展中也扮演了重要角色,但其在急性肺損傷(acute lung injury, ALI)中的作用尚不明確。 目的：建立氣管內(nèi)注射脂多糖(LPS)誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷模型。明確ALI時(shí)mTOR活性的變化,應(yīng)用雷帕霉素抑制mTOR活性,觀察雷帕霉素對(duì)急性肺損傷的可能干預(yù)作用。 方法：應(yīng)用單次氣管內(nèi)注入脂多糖(20mg／kg體重)的方法誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷模型,并通過連續(xù)腹腔內(nèi)注射雷帕霉素(Rapa,4mg/kg體重)5天來實(shí)現(xiàn)對(duì)小鼠ALI的干預(yù)。在氣管內(nèi)注射LPS 8小時(shí)后收集肺組織和灌洗液標(biāo)本,通過觀測(cè)小鼠的一般情況,肺部病理表現(xiàn),肺泡灌洗液炎癥細(xì)胞和炎癥因子的表達(dá),肺水腫的程度和ALI小鼠的生存預(yù)后等多項(xiàng)指標(biāo),來評(píng)價(jià)雷帕霉素對(duì)ALI的干預(yù)作用。 結(jié)果：肺組織中mTOR的下游蛋白pS6在LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷模型中表達(dá)明顯增強(qiáng),而雷帕霉素的干預(yù)能夠顯著抑制pS6的過度活化。同時(shí),雷帕霉素能夠顯著減少肺泡灌洗液中TNF-α(LPS vs LPS+Rapa:1672.74±193.73 vs 539.17±140.47pg/ml, P＜0.01)和IL-6 (LPS+Rapa vs LPS:1672.74±193.73pg/ml, P＜0.01)的表達(dá)水平；以及降低肺組織中IL-1β水平的上調(diào)(LPS vs LPS+Rapa:6394.20±904.59 vs 3196.08±487.46, pg/mg protein, P0.01),增加了ALI時(shí)MMP-9的水平(LPS vs LPS+Rapa:17.98±3.17 vs 37.86±19.00, pg/mg protein, P0.05)。但是,雷帕霉素不能改善ALI的嚴(yán)重程度。無論是中性粒細(xì)胞的浸潤、還是肺水腫程度或病理的改變,雷帕霉素組和賦形劑組均無顯著性差異。而且,雷帕霉素對(duì)ALI小鼠的生存預(yù)后也沒有明顯的干預(yù)作用。 結(jié)論：雷帕霉素能夠抑制ALI時(shí)mTOR的過度活化,但對(duì)LPS誘導(dǎo)的ALI發(fā)生發(fā)展整個(gè)過程的干預(yù)作用甚微。本研究提示,單純應(yīng)用雷帕霉素抑制mTOR可能并不是ALI的潛在治療方法。
【圖文】：

LPS氣管內(nèi)注射24小時(shí)后小鼠肺組織改變基本同注射后8小時(shí) ;4Omg/kgLPS氣管內(nèi)注射24小時(shí)后小鼠整個(gè)肺組織彌散性出血水腫，呈暗紅色，病變程度較20mg/kgLPS組明顯加重，見圖1。啤B0.5C刃口圖1，小鼠左肺組織大體觀注:A圖為正常小鼠左肺組織;B圖為LPS(ZOmg/kg)氣管內(nèi)注射8小時(shí)后小鼠左肺組織;C圖為LPS(20mg/kg)氣管內(nèi)注射24小時(shí)后小鼠左肺組織;D圖為LPS(4Omg/kg)氣管內(nèi)注射24小時(shí)后小鼠左肺組織。2.肺組織光鏡表現(xiàn)對(duì)照PBS組肺泡腔清晰，結(jié)構(gòu)完整，肺泡間隔均勻一致，壁光滑，肺泡腔內(nèi)

}F常對(duì)照組小鼠肺組織外觀色澤粉紅，無明顯異常表現(xiàn);賦形劑組在氣管內(nèi)注射 20mg/kgLPss小時(shí)后肺組織稍有腫脹，體積較正常對(duì)照組增大，并可見點(diǎn)片狀出血改變;雷帕霉素組小鼠肺組織改變基本同賦形劑組，，見圖4。
【學(xué)位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R563.8

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2608798