【摘要】：目的對正常大鼠肺組織與矽肺大鼠肺組織之間基因表達差異進行比較,篩選與矽肺相關(guān)的差異表達基因片段。方法 30只SD大鼠隨機分為2個組,對照組6只,實驗組24只。實驗組大鼠采用非氣管暴露法染塵制作矽肺大鼠模型,對照組灌注生理鹽水,利用HE切片確定建立模型成功;抑制消減雜交技術(shù)構(gòu)建cDNA雙向消減文庫;菌液RCR技術(shù)初步篩選cDNA消減文庫,將獲得的陽性克隆進行測序、同源性比對及生物信息學分析。結(jié)果擴增消減cDNA文庫獲得400多個白色陽性克隆,隨機挑取252個白色克隆用PCR進行擴增,95%的克隆中均有100~1 500bp的插入片段,經(jīng)測序,得到具有差異表達的基因175個。經(jīng)生物信息學分析表明,篩選出的已知差異表達基因與眾多生物學過程和分子功能相關(guān),包括物質(zhì)代謝、物質(zhì)轉(zhuǎn)運、細胞增殖、細胞凋亡、細胞黏附、信號轉(zhuǎn)導等,其中許多差異表達基因與矽肺的關(guān)系尚未被報道。結(jié)論利用抑制消減雜交技術(shù)可以建立高質(zhì)量的矽肺正、反向差異消減cDNA文庫,篩選與矽肺相關(guān)的已知和未知基因,為尋找矽肺診斷和預后的檢查指標和篩選治療靶點提供有用的信息。

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本文編號：2577646