發(fā)布時間：2019-10-17 12:39

【摘要】：目的: 研究NCI-H292細胞在多聚左旋精氨酸（Poly-L-arginine）聯(lián)合脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）作用于下白介素-6（interleukin-6,IL-6）、IL-8、IL-13、嗜酸性粒細胞趨化因子（Eotaxin）的表達水平，以及肝素和L-單甲基-精氨酸（L-NG-monomethyl-arginine,L-NMMA）對其細胞因子表達的影響。 方法: 1.細胞培養(yǎng)及哮喘微環(huán)境模型的建立 將NCI-H292細胞培養(yǎng)在含10%胎牛血清的常規(guī)培養(yǎng)基中，每周傳代兩次；選擇生長狀態(tài)良好的細胞以3×105/500μl密度接種于24孔培養(yǎng)板中，用LPS預(yù)先將氣道上皮細胞激活，模擬哮喘氣道上皮細胞模型。 2.細胞因子水平的測定 按照實驗設(shè)計分為空白對照組(培養(yǎng)液)、LPS組(5μg/ml)、多聚左旋精氨酸組(Max=40μg/ml)、LPS+poly-L-arginine組、LPS+poly-L-arginine+肝素(100u/L)組、LPS+poly-L-arginine+L-NMMA(Max=0.8mM)組，并依照分組要求加入不同濃度的多聚左旋精氨酸、LPS、肝素、L-NMMA；共培養(yǎng)20小時，，收集細胞上清液。按照試劑盒說明采用ELISA法檢測各組IL-6、IL-8、IL-13、Eotaxin的表達水平，并比較各組間的差異。 3.統(tǒng)計學(xué)處理 實驗數(shù)據(jù)采用SPSS16.0統(tǒng)計分析軟件分析，數(shù)據(jù)以x±s表示。多組間比較采用單因素方差分析（one-wayANOVA）；兩兩比較時方差齊時采用LSD檢驗，方差不齊時采用Dunnett’s T3檢驗。P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果: 1.在多聚左旋精氨酸作用下，IL-6、IL-8、Eotaxin的表達水平明顯增高，且在多聚左旋精氨酸為5μg/ml時，IL-6、IL8的表達水平最高；在多聚左旋精氨酸為20μg/ml時，Eotaxin的表達水平最高；但各濃度之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義；而單獨LPS組、多聚左旋精氨酸組與對照組比較，IL-6、IL-8、Eotaxin的水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 2.在多聚左旋精氨酸作用下，IL-13的表達未見明顯改變；各組IL-13的水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 3.將多聚左旋精氨酸、LPS及肝素共同作用NCI-H292細胞時，IL-6、IL-8、Eotaxin的表達水平明顯低于LPS+poly-L-arginine組(P0.05)。 4.將多聚左旋精氨酸、LPS及L-NMMA共同作用NCI-H292細胞時，L-NMMA對各組IL-6、IL-8的表達無影響(P0.05)。 結(jié)論: 1.多聚左旋精氨酸能夠促進LPS誘導(dǎo)的NCI-H292細胞IL-6、IL-8、Eotaxin的表達水平，但對IL-13的表達水平?jīng)]有影響。 2.肝素能夠抑制多聚左旋精氨酸聯(lián)合LPS誘導(dǎo)的NCI-H292細胞IL-6、IL-8的表達水平，而L-NMMA對IL-6、IL-8的表達水平?jīng)]有影響。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R562.25

【參考文獻】

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1 李鋒;于穎;張立紅;;肝素鈣綜合治療嬰幼兒哮喘的療效及機制[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2008年14期

2 尚為民,施云,莫誠航,陸蕓蕓;血栓素A2、前列環(huán)素對支氣管哮喘及慢性支氣管炎的作用影響[J];廣西醫(yī)學(xué);2002年10期

3 張娟;朱建波;趙銘山;;嗜酸性粒細胞在支氣管哮喘發(fā)病中作用的研究進展[J];中外醫(yī)療;2011年08期

4 張媛;;嗜酸粒細胞趨化因子、白細胞介素8和白蛋白在支氣管哮喘中的臨床意義[J];臨床薈萃;2011年13期

5 秦曉群;向陽;劉持;譚宇蓉;屈飛;彭麗花;朱曉琳;秦嶺;;支氣管上皮細胞在氣道高反應(yīng)中的作用(英文)[J];生理學(xué)報;2007年04期

6 姚瑤;王琳琳;;白細胞介素-8研究進展[J];實用兒科臨床雜志;2009年10期

7 武曉蘭;唐偉;王聰慧;汪浩;譚紅霞;范曉云;;咳嗽變異性哮喘患者Eotaxin的表達及其與肺功能的關(guān)系[J];實用醫(yī)學(xué)雜志;2013年02期

8 朱述陽;呂麗麗;夏春偉;李若然;姚紅衛(wèi);劉平莉;;Eotaxin和CCR3在哮喘豚鼠肺和骨髓組織的表達及調(diào)控[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2007年06期

9 范曉云;汪浩;武曉蘭;汪偉民;;左旋精氨酸對氣道上皮細胞白細胞介素6和8的調(diào)節(jié)作用[J];中國新藥與臨床雜志;2011年09期

10 汪浩;武曉蘭;譚紅霞;范曉云;;IL-8和Eotaxin在哮喘大鼠中的表達及地塞米松的作用[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2012年03期

本文編號：2550565