【摘要】：目的： 探討腺病毒感染對CSE(cigarette smoke extract,香煙煙霧提取物)腹腔注射肺氣腫小鼠肺功能、肺病理、肺部炎癥、蛋白酶、凋亡及增殖的影響。 方法： 36只SPF級BALB/c小鼠隨機(jī)分為PBS組、CSE組和CSE+Adenovirus組,每組12只,制備CSE。各組分別在第1、11、22天注射PBS或CSE,第15天氣管內(nèi)滴注PBS或腺病毒,第28天處理各組小鼠。病毒處理后第7天(造模第22天)每組隨機(jī)選取2只小鼠制備肺組織冰凍切片觀察RFP熒光；小動物肺功能檢測系統(tǒng)檢測肺功能；HE染色觀察肺部病理形態(tài)學(xué)改變,測定平均內(nèi)襯間隔(MLI)、肺泡破壞指數(shù)(DI)和平均肺泡隔厚度(MAST),行氣道和血管炎癥半定量評分；免疫組化法檢測肺組織MMP-2和MMP-9表達(dá)；TUNEL法檢測肺組織凋亡并計(jì)算凋亡指數(shù)(AI)；免疫組化法檢測增殖標(biāo)志物Ki67表達(dá),反映肺組織增殖情況,并計(jì)算增殖指數(shù)(PI)。 結(jié)果： (1) CSE+Adenovirus組肺組織可見紅色熒光,PBS組和CSE組均未觀察到紅色熒光。 (2)肺功能：與PBS組比較,CSE組與CSE+Adenovirus組小鼠肺阻力(RAW)增高,動態(tài)肺順應(yīng)性(Cdyn)降低,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。與CSE組比較,C SE+Adenovirus組RAW及Cdyn無明顯差異(p0.05)。各組間小鼠呼吸頻率、潮氣量、每分鐘通氣量、呼氣時(shí)間、吸呼比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 (3)肺病理：與PBS組比較,CSE組及CSE+Adenovirus組肺泡破壞更重,MLI和DI增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),MAST降低,差異亦具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。與CSE組比較,CSE+Adenovirus組肺泡破壞程度無明顯區(qū)別,MLI、DI及MAST均無明顯區(qū)別,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 (4)氣道及血管炎癥：CSE+Adenovirus組氣道管壁周圍可見大量炎癥細(xì)胞浸潤,氣道炎癥半定量評分示,與PBS組比較,CSE組評分均值稍高于PBS組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),CSE+Adenovirus組評分顯著增高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；與CSE組比較,CSE+Adenovirus組氣道炎癥評分也顯著增高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。CSE+Adenovirus組血管管壁周圍可見炎癥細(xì)胞浸潤,血管炎癥半定量分析顯示,與PBS組比較,CSE組血管炎癥評分無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05), CSE+Adenovirus組血管炎癥評分顯著增高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；與CSE組比較,CSE+Adenovirus組血管炎癥評分顯著增高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 (5)MMP-2及MMP-9表達(dá)：與PBS組比較,CSE組和CSE+Adenovirus組MMP-2和MMP-9表達(dá)均增高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；與CSE組比較,CSE+Adenovirus組該兩組蛋白表達(dá)亦增高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 (6)凋亡：與PBS組比較,CSE組與CSE+Adenovirus組DI增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；與CSE組比較,CSE+Adenovirus組DI顯著增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 (7)增殖：與PBS組比較,CSE組與CSE+Adenovirus組肺組織Ki67表達(dá)增多,PI增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。與CSE組比較,CSE+Adenovirus組PI無顯著差別(p0.05)。 結(jié)論： CSE腹腔注射能建立肺氣腫小鼠模型。腺病毒感染可促進(jìn)CSE腹腔注射肺氣腫小鼠肺部炎癥反應(yīng),上調(diào)蛋白酶的表達(dá),增加凋亡水平。
【圖文】：

鏡（xlOO)下觀察，CSE+Adenovims組肺組織可見紅色焚光，分布較為均勾，而PBS組和CSE組均未觀察到紅色焚光（圖3-1 )�！觥觥鰣D3-1焚光顯微鏡下小鼠肺部紅色焚光蛋白的表達(dá)（X100)注：A. PBS 組；B. CSE 組；C. GSE+Adenovi rus 組。3.3小鼠肺功能的檢測與PBS組比較，CSE組與CSE+Adenovirus組小鼠肺阻力（RAW)增高，動態(tài)肺順應(yīng)性（Cdyn)降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05，，表3-1;圖3-2，圖3-3)。但與CSE組比較，CSE+Adenoviras組小鼠RAW及Cdyn無明顯差異(p>0.05,表 3-1;圖 3-2，圖 3-3)。各組間小鼠呼吸頻率（f)

差異亦具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05,表3-2，圖3-7)。與CSE組比較，CSE+Adenovirus組MLI、DI以及MAST均無明顯區(qū)別，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（/7>0.05,表 3-2，圖 3-5，圖 3-6,圖 3-7)。
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R563.3

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本文編號：2544904