【摘要】：慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Lung Disease, COPD)是呼吸系統(tǒng)的常見病和多發(fā)病,以氣流受限不完全可逆為特征,同時伴有全身多系統(tǒng)損害的慢性炎癥反應(yīng)性疾病,與氣道和肺組織對有害氣體或顆粒產(chǎn)生過強的炎癥反應(yīng)有關(guān)。長期持續(xù)的慢性氣道炎癥的反復刺激引起的氣道結(jié)構(gòu)改變即氣道重塑可導致氣道狹窄、氣流受限以及阻塞性通氣功能障礙。中性粒細胞是參與COPD慢性氣道炎癥最為主要的炎性細胞之一,可通過釋放彈性蛋白酶(NE)等多種活性物質(zhì)直接或間接損傷氣道組織,在COPD氣道重塑中起到十分重要的作用。近期多項研究發(fā)現(xiàn)COPD患者氣道上皮中存在上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的現(xiàn)象,而且EMT可能是氣道肌成纖維細胞的主要來源之一。Thomas等報道中性粒細胞誘導的EMT與腫瘤密切相關(guān)。因此,我們推測中性粒細胞也能通過誘導上皮細胞發(fā)生EMT而參與COPD氣道重塑的發(fā)生過程。 本研究收集COPD患者以及非COPD患者肺組織手術(shù)標本,應(yīng)用免疫組織化學和HE染色等技術(shù)分析中性粒細胞與氣道EMT的相關(guān)性；通過A549與中性粒細胞共培養(yǎng)等體外實驗探討中性粒細胞在EMT的作用機制以及所涉及的信號通路。 研究發(fā)現(xiàn)：1、COPD患者氣道上皮細胞存在EMT現(xiàn)象：免疫組織化學提示氣道上皮細胞的E-cadherin表達減少,同時vimentin表述增多；2、COPD患者氣道中性粒細胞的浸潤程度與E-cadherin表達呈負相關(guān),與vimentin表達呈正相關(guān)；3、體外共培養(yǎng)中性粒細胞與A549細胞發(fā)現(xiàn),中性粒細胞可誘導A549發(fā)生EMT,該現(xiàn)象并可被人Ⅳ型彈性蛋白酶抑制劑部分抑制。4、NE可以直接誘導A549細胞發(fā)生EMT并促進β-catenin由胞漿向胞核轉(zhuǎn)移,應(yīng)用Wnt/β-catenin通路小分子抑制劑XAV939預處理A549細胞能夠抑制NE誘導EMT的作用。這些研究表明,中性粒細胞可能通過分泌NE誘導COPD患者氣道EMT的發(fā)生,且這種作用是由Wnt/β-catenin途徑介導的。
【圖文】：

見紫色顆粒即為中性粒細胞，計數(shù)后發(fā)現(xiàn)中性粒細胞比例>90% (圖IB)。Diff-Quik染色步驟：(1)將細胞制成單細胞懸液后涂片，待玻片干后放入固定液A液中固定15s;(2)從固定液中取出玻片直接放入紅色染液B液中5-lOs，同時上下提拉玻片；(3)將玻片從B液中取出直接放入嗜堿性染液C液中5-10秒，同時上下提拉玻片；(4)放入清水中洗去染液，干燥。

圖2 COPD患者支氣管上皮細胞E-cadherin及Vimentin表達情況Figure2. Immunohistochemistry of human airway. Bronchial sections from non-COPD19
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R563.9

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

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本文編號：2541178