【摘要】：目的探討新型過(guò)氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)對(duì)大鼠肺成纖維細(xì)胞(FB)增殖和JNK通路的影響。方法體外培養(yǎng)FB,隨機(jī)分為:對(duì)照組、TGF-β1組、空轉(zhuǎn)染組、Prx-1轉(zhuǎn)染組。對(duì)照組:以0.4%血清濃度MEM作為基礎(chǔ)培養(yǎng)液;TGF-β1組:0.4%血清培養(yǎng)條件下,給予TGF-β1(5μg/L)孵育細(xì)胞;空轉(zhuǎn)染組:利用脂質(zhì)體Lipo2000將空載體轉(zhuǎn)染到FB 36 h,給予同步化處理12 h后,在0.4%血清培養(yǎng)條件下,給予TGF-β1(5μg/L)孵育細(xì)胞;Prx-1轉(zhuǎn)染組:Prx-1真核表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到FB 36 h,給予同步化處理12 h后,在0.4%血清培養(yǎng)條件下,給予TGF-β1(5μg/L)孵育細(xì)胞。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法;免疫熒光檢測(cè)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染和8-OhdG(DNA氧化產(chǎn)物)的水平;MTT法檢測(cè)FB增殖;Western blot檢測(cè)JNK和Prx-1的表達(dá)情況。結(jié)果質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)染入FB,轉(zhuǎn)染Prx-1真核表達(dá)質(zhì)粒使Prx-1在FB內(nèi)蛋白表達(dá)水平增高。與對(duì)照組比較,TGF-β1組的FB增殖、8-OhdG及磷酸化的JNK表達(dá)均明顯增加。與TGF-β1組比較,空轉(zhuǎn)染組中的上述觀察指標(biāo)無(wú)明顯變化,但在Prx-1轉(zhuǎn)染組,這些指標(biāo)均明顯下降。結(jié)論 TGF-β1能夠誘導(dǎo)FB生成反應(yīng)性氧物質(zhì)(ROS),并由此促進(jìn)JNK的激活和FB增殖,而Prx-1可通過(guò)抑制ROS來(lái)抑制TGF-β1誘導(dǎo)的FB增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of Peroxiredoxin-1 (Prx-1) on (FB) proliferation and JNK pathway in rat lung fibroblasts. Methods FB, cultured in vitro were randomly divided into control group, TGF- 尾 1 group, empty staining group and Prx-1 transfer group. In the control group, 0.4% serum concentration MEM was used as the basic culture medium, TGF- 尾 1 group was incubated with TGF- 尾 1 (5 渭 g / L) under the condition of 0.4% serum culture, and the cells were incubated with TGF- 尾 1 (5 渭 g / L) under the condition of 0.4% serum culture, and the cells were incubated with TGF- 尾 1 (5 渭 g / L) by liposomes Lipo2000 for 36 h, and the cells were incubated with FB 尾 1 (5 渭 g / L) under the condition of 0.4% serum culture, and the cells were incubated with FB 尾 1 (5 渭 g / L) under the condition of 0.4% serum culture. Prx-1 transfer group: Prx-1 eukaryotic expression plasmid was transfected into FB for 36 h. After 12 h of synchronous treatment, the cells were incubated with TGF- 尾 1 (5 渭 g / L) under 0.4% serum culture condition. The level of plasmid transfection and 8-OhdG (DNA oxidation product) was detected by immunofluorescence, and the expression of JNK and Prx-1 was detected by MTT assay. The expression of JNK and Prx-1 was detected by; Western blot assay. Results the eukaryotic expression plasmid of Prx-1 was successfully transformed into FB, and the protein expression level of Prx-1 in FB was increased. Compared with the control group, the proliferation, 8-OhdG and phosphorylation JNK expression of FB in TGF- 尾 1 group were significantly increased. Compared with TGF- 尾 1 group, there was no significant change in the above indexes in empty staining group, but in Prx-1 transfer group, these indexes decreased significantly. Conclusion TGF- 尾 1 can induce FB to produce reactive oxygen substance (ROS), and promote the activation of JNK and the proliferation of FB, while Prx-1 can inhibit the proliferation of FB induced by TGF- 尾 1 by inhibiting ROS.
【作者單位】： 河北聯(lián)合大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系;唐山工人醫(yī)院呼吸內(nèi)科;河北聯(lián)合大學(xué)實(shí)驗(yàn)中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81072254) 河北省科技支撐項(xiàng)目(編號(hào):10276114D) 河北省高等學(xué)校科學(xué)技術(shù)研究青年基金資助項(xiàng)目(編號(hào):Q2012090)
【分類號(hào)】：R135.2

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本文編號(hào)：2512809