發(fā)布時間：2019-07-10 18:49

【摘要】：目的探討新型過氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)對大鼠肺成纖維細胞(FB)增殖和JNK通路的影響。方法體外培養(yǎng)FB,隨機分為:對照組、TGF-β1組、空轉染組、Prx-1轉染組。對照組:以0.4%血清濃度MEM作為基礎培養(yǎng)液;TGF-β1組:0.4%血清培養(yǎng)條件下,給予TGF-β1(5μg/L)孵育細胞;空轉染組:利用脂質體Lipo2000將空載體轉染到FB 36 h,給予同步化處理12 h后,在0.4%血清培養(yǎng)條件下,給予TGF-β1(5μg/L)孵育細胞;Prx-1轉染組:Prx-1真核表達質粒轉染到FB 36 h,給予同步化處理12 h后,在0.4%血清培養(yǎng)條件下,給予TGF-β1(5μg/L)孵育細胞。質粒轉染采用脂質體轉染法;免疫熒光檢測質粒轉染和8-OhdG(DNA氧化產物)的水平;MTT法檢測FB增殖;Western blot檢測JNK和Prx-1的表達情況。結果質粒成功轉染入FB,轉染Prx-1真核表達質粒使Prx-1在FB內蛋白表達水平增高。與對照組比較,TGF-β1組的FB增殖、8-OhdG及磷酸化的JNK表達均明顯增加。與TGF-β1組比較,空轉染組中的上述觀察指標無明顯變化,但在Prx-1轉染組,這些指標均明顯下降。結論 TGF-β1能夠誘導FB生成反應性氧物質(ROS),并由此促進JNK的激活和FB增殖,而Prx-1可通過抑制ROS來抑制TGF-β1誘導的FB增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of Peroxiredoxin-1 (Prx-1) on (FB) proliferation and JNK pathway in rat lung fibroblasts. Methods FB, cultured in vitro were randomly divided into control group, TGF- 尾 1 group, empty staining group and Prx-1 transfer group. In the control group, 0.4% serum concentration MEM was used as the basic culture medium, TGF- 尾 1 group was incubated with TGF- 尾 1 (5 渭 g / L) under the condition of 0.4% serum culture, and the cells were incubated with TGF- 尾 1 (5 渭 g / L) under the condition of 0.4% serum culture, and the cells were incubated with TGF- 尾 1 (5 渭 g / L) by liposomes Lipo2000 for 36 h, and the cells were incubated with FB 尾 1 (5 渭 g / L) under the condition of 0.4% serum culture, and the cells were incubated with FB 尾 1 (5 渭 g / L) under the condition of 0.4% serum culture. Prx-1 transfer group: Prx-1 eukaryotic expression plasmid was transfected into FB for 36 h. After 12 h of synchronous treatment, the cells were incubated with TGF- 尾 1 (5 渭 g / L) under 0.4% serum culture condition. The level of plasmid transfection and 8-OhdG (DNA oxidation product) was detected by immunofluorescence, and the expression of JNK and Prx-1 was detected by MTT assay. The expression of JNK and Prx-1 was detected by; Western blot assay. Results the eukaryotic expression plasmid of Prx-1 was successfully transformed into FB, and the protein expression level of Prx-1 in FB was increased. Compared with the control group, the proliferation, 8-OhdG and phosphorylation JNK expression of FB in TGF- 尾 1 group were significantly increased. Compared with TGF- 尾 1 group, there was no significant change in the above indexes in empty staining group, but in Prx-1 transfer group, these indexes decreased significantly. Conclusion TGF- 尾 1 can induce FB to produce reactive oxygen substance (ROS), and promote the activation of JNK and the proliferation of FB, while Prx-1 can inhibit the proliferation of FB induced by TGF- 尾 1 by inhibiting ROS.
【作者單位】： 河北聯合大學基礎醫(yī)學院病理學系;唐山工人醫(yī)院呼吸內科;河北聯合大學實驗中心;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(編號:81072254) 河北省科技支撐項目(編號:10276114D) 河北省高等學�？茖W技術研究青年基金資助項目(編號:Q2012090)
【分類號】：R135.2

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 朱珉;祁洪剛;曹榮華;;α1,3-半乳糖基轉移酶基因沉默對NK細胞介導的異種細胞毒作用的影響[J];華中科技大學學報(醫(yī)學版);2009年01期

2 段燕英;楊瑾;牛丕業(yè);宮智勇;劉曉勇;鄔堂春;;Hsp70對苯并(a)芘所致DNA損傷修復的影響[J];工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病;2009年05期

3 申東曉,史須,王應,傅娟玲,周宗燦;硫氧還蛋白對氫醌細胞毒性的抑制[J];中國藥理學與毒理學雜志;2003年01期

4 顧燕,公茂慶,胡小邦,孫艷,馬磊,李秀蘭,朱昌亮;蚊抗藥性相關糜蛋白酶基因穩(wěn)定轉染細胞系的建立與表達鑒定[J];中國寄生蟲病防治雜志;2005年02期

5 張慧峰,李秋營,張欣樵;脂質體介導基因轉移技術在塵肺研究中的初探[J];中國公共衛(wèi)生;1997年01期

6 莫國玉 ,陳光明,楊富強,何曉嬙,黃英,楊若才;治療型HBV DNA疫苗肌注電轉染法免疫恒河猴的效果及安全性觀察[J];解放軍醫(yī)學雜志;2003年06期

7 江高峰,莊志雄,劉起展,何云,杜柳濤;hMTH1缺陷細胞株建立及生物學特性研究[J];衛(wèi)生毒理學雜志;2003年02期

8 張江虹;郝福榮;孔肇路;沈芝芬;金一尊;;轉染結構性雄烷受體對絲裂霉素C和5-氮丙啶-3-羥甲基-1-甲基吲哚-4,7-二酮的細胞毒性的影響[J];藥學學報;2007年04期

9 趙永良，金璀珍，吳德昌;癌基因和抑癌基因在輻射致癌中的作用[J];中華放射醫(yī)學與防護雜志;1995年03期

10 田瓊,張紹章,張發(fā)科;rhBMP-2 cDNA轉染的NIH-3T3細胞對小鼠急性放射損傷的基因治療作用與機理[J];第四軍醫(yī)大學學報;1998年04期

相關會議論文 前6條

1 陳小武;孫圣剛;程道賓;田有勇;王嵐;喬嫻;何靜;;14-3-3蛋白過表達減輕MPP~+對PC12細胞的毒性損傷[A];第九次全國神經病學學術大會論文匯編[C];2006年

2 范國華;陳生弟;戚辰;;熱休克蛋白減輕MPP~+對SK-N-SH細胞的毒性[A];第九次全國神經病學學術大會論文匯編[C];2006年

3 武元峰;欒洋;戚新明;任進;;新的遺傳毒性生物標志物的探索[A];中國環(huán)境誘變劑學會第14屆學術交流會議論文集[C];2009年

4 姚婷;陳景元;張建彬;季愛玲;杜可軍;陳耀明;車紅磊;張文斌;駱文靜;蔡同建;;自噬參與錳誘導的PC12細胞毒性的初步研究[A];中國毒理學會第五次全國學術大會論文集[C];2009年

5 段慧菡;楊巧媛;李勛;蔣義國;;苯并[a]芘暴露的小鼠原代支氣管上皮細胞中miR-494對細胞周期的影響[A];廣東省環(huán)境誘變劑學會、廣東省預防醫(yī)學會衛(wèi)生毒理專業(yè)委員會2010年學術會議資料匯編[C];2010年

6 王先良;王春輝;江艷;王小利;楊怡姝;滿江紅;王菲菲;張金良;;基于EGFP報告基因的去甲基化表觀遺傳毒性評價新方法[A];中國毒理學會環(huán)境與生態(tài)毒理學專業(yè)委員會第二屆學術研討會暨中國環(huán)境科學學會環(huán)境標準與基準專業(yè)委員會2011年學術研討會會議論文集[C];2011年

相關博士學位論文 前1條

1 孫艷;視蛋白基因參與蚊抗藥性機制的研究[D];南京醫(yī)科大學;2012年

相關碩士學位論文 前8條

1 陳婷婷;PprI基因活體轉染對小鼠γ輻射損傷的作用及其機理研究[D];蘇州大學;2010年

2 齊泓;環(huán)境應答基因JWA對谷氨酸轉運的影響[D];南京醫(yī)科大學;2004年

3 楊瀾;耐輻射奇球菌RecO、RecF原核與真核表達體系的構建及抗紫外輻射損傷效應的研究[D];第三軍醫(yī)大學;2009年

4 夏蓮;三羥異黃酮與RNA干擾survivin基因聯合應用于DU-145前列腺癌細胞的實驗研究[D];合肥工業(yè)大學;2007年

5 王靜;RNA干擾用于支氣管上皮細胞5-脂氧合酶對苯并（a）芘活化及DNA損傷研究[D];中南大學;2012年

6 鄒聯洪;TAB182在電離輻射誘導HeLa細胞DNA損傷修復中的作用[D];中南大學;2012年

7 王春輝;污染物去甲基化表觀遺傳毒性EGFP評價載體的構建及性能測試[D];安徽醫(yī)科大學;2010年

8 鄒萍;淡色庫蚊arrestin基因克隆及其在抗藥性中作用的初步研究[D];南京醫(yī)科大學;2012年

，

本文編號：2512809