【摘要】：目的探討二氧化硅(Si O2)刺激的人肺泡上皮細胞系A549細胞水通道蛋白4(AQP-4)的表達及意義。方法將A549細胞分為0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 h染塵組和抑制劑組,各染塵組分別以質量濃度為50 mg/L的Si O2混懸液刺激相應時間,抑制劑組先以濃度為100μmol/L的AQP-4抑制劑TGN-020孵育2.0 h,再以質量濃度為50mg/L的Si O2混懸液刺激1.0 h,另設不予任何處理的對照組;采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(RT-PCR)法檢測AQP-4 mRNA表達。同時,將A549細胞分為3.0、6.0、12.0、24.0 h染塵組和抑制劑組,各染塵組分別以質量濃度為50 mg/L的Si O2混懸液刺激相應時間,抑制劑組先以濃度為100μmol/L的TGN-020孵育2.0 h,再以質量濃度為50 mg/L的Si O2混懸液刺激6.0 h,另設不予任何處理的對照組;分別采用免疫印跡法和免疫細胞化學法檢測AQP-4蛋白表達。結果 RT-PCR分析結果顯示:與對照組比較,Si O2刺激后A549細胞AQP-4 mRNA相對表達水平呈現(xiàn)先升高后逐漸下降趨勢,于刺激1.0 h后達到高峰值(P0.05),于刺激8.0 h后趨于正常水平(P0.05)。免疫印跡法和免疫細胞化學法分析結果均顯示:與對照組比較,Si O2刺激后A549細胞AQP-4蛋白呈現(xiàn)先升高后逐漸下降趨勢,于刺激6.0 h后達到高峰值(P0.05),但于刺激24.0 h后仍未下降至正常水平(P0.01)。抑制劑組AQP-4的mRNA相對表達水平和蛋白表達水平均低于Si O2刺激相同時間的染塵組(P0.01)。結論 Si O2刺激使A549細胞AQP-4的表達增高,其特異性抑制劑可抑制Si O2刺激引起的AQP-4表達增高,推測AQP-4可能參與了矽肺的發(fā)生發(fā)展過程。
[Abstract]:Objective to investigate the expression and significance of aquaporin 4 (AQP-4) in human alveolar epithelial cell line A549 stimulated by silica (Si O 2). Methods A549 cells were divided into two groups: the group of 0. 5, 1. 0 and 2. 0 and the control group. Each group was stimulated with 50 mg/L Si O 2 suspension for the corresponding time. The inhibitor group was incubated with AQP-4 inhibitor TGN-020 (100 渭 mol/L) for 2.0 h, and then stimulated with Si O 2 suspension of 50mg/L for 1.0 h. The AQP-4 mRNA expression was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR). At the same time, A549 cells were divided into 3. 0 0? 0? 0 and 24. 0 h exposure group and inhibitor group. Each group was stimulated with 50 mg/L Si O 2 suspension for the corresponding time. The inhibitor group was incubated with 100 渭 mol/L TGN-020 for 2.0 h, then stimulated with 50 mg/L Si O 2 suspension for 6.0 h. The control group was set up without any treatment, and the expression of AQP-4 protein was detected by Western blotting and immunocytochemistry, respectively. Results the results of RT-PCR analysis showed that the relative expression of AQP-4 mRNA in A549 cells increased at first and then decreased gradually compared with the control group, and reached a peak value at 1.0 h (P0.05) and a normal level at 8.0 h (P0.05). The results of immunoblotting and immunocytochemistry showed that compared with the control group, the AQP-4 protein of A549 cells increased firstly and then decreased gradually. The peak value was reached at 6.0 h after stimulation (P0.05), but it did not decrease to normal level at 24.0 h (P0.01). The relative mRNA expression and protein expression of AQP-4 in the inhibitor group were lower than those in the dust-exposed group at the same time after stimulation by Si O _ 2 (P0.01). Conclusion Si O 2 stimulation can increase the expression of AQP-4 in A549 cells, and its specific inhibitor can inhibit the increase of AQP-4 expression induced by Si O 2 stimulation. It is suggested that AQP-4 may be involved in the pathogenesis and development of silicosis.
【作者單位】： 河北聯(lián)合大學附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科;河北聯(lián)合大學臨床醫(yī)學院;河北聯(lián)合大學醫(yī)學實驗研究中心;
【基金】：河北省科技廳科技支撐項目(10276116D)
【分類號】：R135.2

【參考文獻】

相關期刊論文 前3條

1 謝艷萍;溫曉紅;姜志強;輔桓欽;戴利成;韓慧;;水通道蛋白4在肺腺癌細胞中的表達及其對肺腺癌細胞增殖與遷移的影響[J];華中科技大學學報(醫(yī)學版);2011年06期

2 邱新香;鄭倩玲;夏麗華;巫帶花;肖素娟;湯春宜;虢遠寧;曾向嫩;陳英姿;盧秀鳳;;知信行模式對塵肺病患者健康教育干預應用研究[J];中國職業(yè)醫(yī)學;2014年03期

3 黃明;周永梅;宋向榮;黃昆潔;葛怡琛;賴關朝;梁偉輝;曾小菁;曾子芳;;骨髓間充質干細胞對染矽塵大鼠肺損傷修復作用研究[J];中國職業(yè)醫(yī)學;2014年04期

【共引文獻】

相關期刊論文 前3條

1 彭潔;樊映川;張虹;;壓力對培養(yǎng)人眼小梁細胞水通道蛋白1mRNA表達及蛋白質合成的影響[J];華中科技大學學報(醫(yī)學版);2013年04期

2 黃明;周永梅;宋向榮;黃昆潔;葛怡琛;賴關朝;梁偉輝;曾小菁;曾子芳;;骨髓間充質干細胞對染矽塵大鼠肺損傷修復作用研究[J];中國職業(yè)醫(yī)學;2014年04期

3 毛麗君;史志澄;李樹強;;水泥塵肺病例特點分析[J];中國職業(yè)醫(yī)學;2014年06期

相關碩士學位論文 前1條

1 桂治府;水通道蛋白4對結腸癌細胞遷移能力的影響[D];南京醫(yī)科大學;2012年

【二級參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 陳杰,白春學,張敏,任振義,胡潔;水通道蛋白在人肺腺癌細胞株中的表達和意義[J];中國肺癌雜志;2004年03期

2 劉文彬;劉貴穎;;大鼠支氣管肺泡灌洗方法的研究進展[J];臨床肺科雜志;2012年04期

3 劉軍,石琳琳,楊紅,麻彤輝;細胞運動中的水通道蛋白——細胞遷移及相關生理和病理機制的新視點[J];生物化學與生物物理進展;2005年07期

4 鄧雪凝;徐娜;唐學玲;;三水區(qū)農(nóng)民工職業(yè)衛(wèi)生認知現(xiàn)狀調查[J];中國職業(yè)醫(yī)學;2009年01期

5 陳田林;羅嵐;陳紹輝;;塵肺病患者心理干預體系探討[J];中國職業(yè)醫(yī)學;2011年03期

6 江志榮;林祥吉;饒春燕;朱岸平;;深圳市外來務工人員職業(yè)衛(wèi)生防護知識、態(tài)度及行為調查[J];中國健康教育;2009年05期

7 項陽,馬兵,李濤,于和鳴,李學軍;乙酰唑胺抑制腫瘤轉移及荷瘤小鼠肺相關蛋白質的表達(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2002年08期

8 邱新香;郝元濤;梁智平;肖素娟;吳秀芳;陳慈珊;林愛華;;塵肺患者生活質量的相關因素研究[J];中國衛(wèi)生統(tǒng)計;2011年03期

9 關兵,董震;水通道蛋白與腫瘤[J];中國腫瘤臨床;2005年13期

10 趙景民,翟為溶,張月娥,朱虹光,莊麗,湯釗猷;肝細胞癌整合蛋白α5β1、纖維連接蛋白及其降解片段的表達[J];中華病理學雜志;1997年02期

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 呂俊鋒;張玉成;杜珍武;張桂珍;;核心蛋白聚糖真核表達載體的構建及其在A549中的表達[J];中國老年學雜志;2011年05期

2 徐洪濤;楊慧;常立文;李文斌;趙玲霞;袁文浩;劉偉;蔡保歡;王席娟;;高體積分數(shù)氧致A549細胞肺表面活性物質蛋白-A表達的變化[J];實用兒科臨床雜志;2012年14期

3 王蘭;田菲;陳亮;張俊平;何流;王亞盼;;扶正解毒方含藥血清對人肺癌細胞(A549)增殖和凋亡的影響[J];四川中醫(yī);2012年12期

4 顧紅兵;;Micro RNA-646在脂多糖處理后的A549細胞中的表達及功能分析[J];大家健康(學術版);2013年22期

5 張繼賢;趙鶯;張曉仙;張啟昆;萬毅新;;阿霉素化療與熱化療對人肺腺癌細胞株A549細胞抑制作用的比較研究[J];浙江臨床醫(yī)學;2006年07期

6 盧強;黃立軍;韓勇;閆小龍;張新偉;李小飛;;高壓電場對A549肺癌細胞株轉移潛能影響研究[J];中華腫瘤防治雜志;2014年01期

7 王俊宏,潘世揚,黃s顂，

本文編號：2240013