【摘要】：肺纖維化,即肺間質(zhì)組織由膠原蛋白、彈性蛋白及蛋白糖類構(gòu)成,當(dāng)纖維母細(xì)胞受到化學(xué)性或物理性傷害時,會分泌膠原蛋白進(jìn)行肺間質(zhì)組織的修補(bǔ),進(jìn)而造成肺纖維化。科學(xué)家在研究TNF-a在機(jī)體內(nèi)的作用機(jī)制時發(fā)現(xiàn)TNF-a在肺纖維化的發(fā)生發(fā)展過程中有著重要的作用,自然而然的TNF-a反義核酸被用于治療肺纖維化也成了一種新的思路。TNF-a反義核酸用于治療肺纖維化的潛力巨大,但是全身性的給藥TNF-α反義核酸會造成多種負(fù)面的結(jié)果,比如說感染、免疫缺失以及惡性腫瘤。所以我們嘗試通過局部給藥TNF-α反義核酸來達(dá)到增強(qiáng)其治療肺纖維化的療效同時減少副作用的目的。 為了研究TNF-a反義核酸在治療肺纖維化中的作用,我們構(gòu)建了博萊霉素誘導(dǎo)的C57小鼠肺纖維化模型,在小鼠模型4天、6天、9天、13天的時候,通過鼻腔滴注的方式進(jìn)行TNF-a反義核酸原位給藥,在第14天的時候處死小鼠。通過肺組織切片雙標(biāo)熒光染色的方式檢測肺實(shí)質(zhì)組織中的TH2細(xì)胞。通過肺部灌洗的方式檢測灌洗液中Treg細(xì)胞的變化比例；灌洗液上清檢測炎癥因子TNF-α,IL-13,INF-γ,IL-10,TGF-β的變化水平；通過免疫熒光組織切片的方式檢測TNF-a在肺組織的分布；利用組織切片染色,Western blot等檢測技術(shù)在組織水平對肺纖維化發(fā)生發(fā)展過程中的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行分析。通過以上手段,我們在體內(nèi)和體外條件下研究了TNF-a反義核酸在小鼠肺纖維化中的治療效果和機(jī)理。
[Abstract]:Pulmonary fibrosis, which consists of collagen, elastin and proteoglycoids, will secrete collagen to repair the interstitial tissue of lung, which will lead to pulmonary fibrosis when the fibroblasts are damaged by chemical or physical factors. In studying the mechanism of TNF-a in the body, scientists have found that TNF-a plays an important role in the development of pulmonary fibrosis. Naturally, the use of TNF-a antisense nucleotides in the treatment of pulmonary fibrosis has also become a new way of thinking. TNF-a antisense nucleotides have great potential for treatment of pulmonary fibrosis, but systemic administration of TNF- 偽 antisense nucleotides can lead to a variety of negative results, such as infection. Immune deficiency and malignant tumors. Therefore, we try to enhance the efficacy of TNF- 偽 antisense nucleic acid in the treatment of pulmonary fibrosis and reduce side effects. In order to study the role of TNF-a antisense nucleic acid in the treatment of pulmonary fibrosis, we constructed a bleomycin induced pulmonary fibrosis model in C57 mice. TNF-a antisense nucleic acid was given in situ by nasal drip, and the mice were killed on the 14th day. TH2 cells in lung parenchyma were detected by double-labeled fluorescence staining in lung tissue sections. The percentage of Treg cells in the lavage fluid was detected by the method of lung lavage, the level of the inflammatory factor TNF- 偽, IL-13, INF- 緯, IL-10 and TGF- 尾 was detected by the supernatant of the lavage fluid, and the distribution of TNF-a in the lung tissue was detected by immunofluorescence tissue section. The indexes of the development of pulmonary fibrosis were analyzed at the tissue level by using tissue section staining and Western blot. The therapeutic effect and mechanism of TNF-a antisense oligonucleotides on pulmonary fibrosis in mice were studied in vivo and in vitro.
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R563

【共引文獻(xiàn)】

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3 崔文t，

本文編號：2213990