發(fā)布時間：2018-07-01 21:17

  本文選題：肺泡巨噬細胞 + 脂多糖類　； 參考：《第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》2017年03期

【摘要】：目的探索miRNA-142-3p(miR-142-3p)對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的大鼠肺泡巨噬細胞炎癥反應(yīng)的負向調(diào)控作用及其可能機制。方法用100ng/mL LPS誘導(dǎo)肺泡巨噬細胞NR8383,實時定量PCR(qPCR)和蛋白質(zhì)印跡法分別檢測誘導(dǎo)后0、6、24、48h時細胞中miR-142-3p和高遷移率族蛋白(HMGB1)的表達。細胞體外轉(zhuǎn)染miR-142-3p擬似物(miR-142-3p mimic),qPCR檢測轉(zhuǎn)染后細胞中miR-142-3p及炎癥因子[腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-6、IL-1β和巨噬細胞炎癥蛋白2β(MIP-2β)]的表達,蛋白質(zhì)印跡法檢測細胞中HMGB1的表達,酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測細胞培養(yǎng)液中HMGB1的含量。結(jié)果LPS誘導(dǎo)NR8383細胞后,細胞中miR-142-3p在48h時表達最高,HMGB1在24h時最高,與0h時相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。過表達miR-142-3p后,NR8383細胞中miR-142-3p的表達升高(P0.05),HMGB1mRNA和蛋白及TNF-α、IL-6、IL-1β和MIP-2βmRNA的表達均降低(P0.05)。結(jié)論 miR-142-3p能介導(dǎo)LPS誘導(dǎo)的NR8383細胞的炎癥反應(yīng)過程,該效應(yīng)可能是通過負向調(diào)控HMGB1的表達來實現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective to investigate the negative regulation of miRNA-142-3p (miR-142-3p) on the inflammatory response of rat alveolar macrophages induced by lipopolysaccharide (LPS) and its possible mechanism. Methods the expression of miR-142-3p and high mobility group protein (HMGB1) in alveolar macrophages (NR8383) induced by 100 ng / mL LPS was detected by real-time quantitative PCR (qPCR) and Western blotting, respectively. The expression of miR-142-3p and inflammatory cytokines [tumor necrosis factor 偽 (TNF- 偽), interleukin (IL) -6- + IL-1 尾 and macrophage inflammatory protein 2 尾 (MIP-2 尾)] in transfected cells were detected by qPCR, and the expression of HMGB1 was detected by Western blot. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to detect the content of HMGB1 in cell culture medium. Results after LPS induced NR8383 cells, the expression of miR-142-3p in NR8383 cells was the highest at 48h, which was significantly higher than that at 0h (P0.05). After overexpression of miR-142-3p, the expression of miR-142-3p in NR8383 cells was increased (P0.05), and the expression of HMGB1 mRNA and protein, TNF- 偽 IL-6, IL-1 尾 and MIP-2 尾 mRNA were decreased (P0.05). Conclusion miR-142-3p can mediate the inflammatory response induced by LPS in NR8383 cells, which may be mediated by negative regulation of HMGB1 expression.
【作者單位】： 第二軍醫(yī)大學(xué)長征醫(yī)院急救科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81171844)~~
【分類號】：R563

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本文編號：2089183