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大鼠遠(yuǎn)端肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代培養(yǎng)及其生物學(xué)特性和功能的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-21 06:00

  本文選題:肌細(xì)胞 + 平滑肌; 參考:《中國(guó)全科醫(yī)學(xué)》2014年27期


【摘要】:目的采用組織塊貼壁法體外培養(yǎng)原代大鼠遠(yuǎn)端肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(PASMCs),探討慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠與正常大鼠遠(yuǎn)端PASMCs的生物學(xué)特性及功能的異同。方法 SPF級(jí)SD雄性大鼠12只,按隨機(jī)數(shù)字表法分為2組:對(duì)照組大鼠第1、14天經(jīng)氣道內(nèi)注入0.9%氯化鈉溶液,無(wú)香煙煙霧暴露。COPD模型組大鼠于實(shí)驗(yàn)第1、14天經(jīng)氣道內(nèi)注入脂多糖(LPS)溶液,200μg/次,香煙煙霧暴露1 h/d,共8周。模型建立后,組織塊貼壁法提取并原代培養(yǎng)各組大鼠遠(yuǎn)端PASMCs。倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)特點(diǎn);細(xì)胞免疫組化染色、透射電鏡鑒定PASMCs;CCK-8和細(xì)胞熒光流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞增殖情況。結(jié)果倒置相差顯微鏡下PASMCs為長(zhǎng)梭形或魚尾狀,為典型的"峰-谷"樣生長(zhǎng);細(xì)胞免疫組化染色、透射電鏡鑒定所培養(yǎng)的細(xì)胞97%以上為PASMCs。COPD模型組PASMCs吸光度(1.079±0.119)高于對(duì)照組(0.871±0.041)(t=4.039,P0.05)。COPD模型組PASMCs增殖(1.315±0.203)強(qiáng)于對(duì)照組(1.023±0.057)(t=3.387,P0.05)。結(jié)論對(duì)照組與COPD模型組原代培養(yǎng)的PASMCs形態(tài)學(xué)相似,但生物學(xué)特性不同,功能亦存在差異。
[Abstract]:Objective by tissue adherent culture of primary rat distal pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs), chronic obstructive pulmonary disease (COPD) and the biological characteristics and function of model rat and normal rat distal PASMCs. Methods SPF SD male rats 12, according to the random number table method divided into 2 groups: control group rats 1,14 days Intratracheal injection of 0.9% Sodium Chloride Solution, no cigarette smoke exposure of.COPD rats in the 1,14 days after injection of lipopolysaccharide in the airway (LPS) solution, 200 g/, 1 h/d of cigarette smoke exposure, a total of 8 weeks. After the establishment of the model, the cell morphology was observed by tissue adherent extraction and primary cultured rats the distal PASMCs. under inverted phase contrast microscope And the growth characteristics of cells; immunohistochemical staining, transmission electron microscopy and fluorescence identification of PASMCs CCK-8 cells; flow cytometry was used to detect the proliferation of cells in each group. Results under inverted phase contrast microscope PASMCs were fusiform or fishtail, growth is the typical "peak and valley" pattern; immunohistochemical staining, transmission electron microscopy identified above the cells for 97% PA The SMCs.COPD model group, PASMCs absorbance (1.079 + 0.119) higher than that of the control group (0.871 + 0.041) (t=4.039, P0.05).COPD model group PASMCs proliferation (1.315 + 0.203) than in control group (1.023 + 0.057) (t=3.387, P0.05). Conclusion PASMCs morphology control group and COPD model group in primary culture is similar, but the biological characteristics of different functions, there are also differences.
【作者單位】: 桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81360010) 廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳項(xiàng)目(重2012004)
【分類號(hào)】:R563.9

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本文編號(hào):2047510

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