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全氟化碳對熱煙霧吸入性肺損傷大鼠肺氧化應(yīng)激保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-18 01:19

  本文選題:熱煙霧 + 吸入性肺損傷 ; 參考:《新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院》2012年碩士論文


【摘要】:目的: 制作大鼠熱煙霧吸入性肺損傷模型,觀察不同劑量全氟化碳(PFC)對早期熱煙霧吸入性肺損傷大鼠肺泡灌洗液中髓過氧化物酶(MPO)及血漿中丙二醛(MDA)、3-硝基酪氨酸(3-NT)等反映肺部氧化應(yīng)激程度指標(biāo)含量的影響。觀察熱煙霧吸入性肺損傷及全氟化碳治療后大鼠氣管、肺組織病理變化情況,探討全氟化碳對早期熱煙霧吸入性肺損傷大鼠肺部氧化應(yīng)激保護(hù)作用及其可能作用機(jī)制,為臨床治療熱煙霧吸入性肺損傷提供新的治療方法。 方法: 1.20只雄性健康Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對照組和煙霧吸入性肺損傷組,每組各10只。在本課題組制作的大鼠熱煙霧發(fā)生器及前期實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,制作大鼠煙霧吸入性肺損傷模型。各組大鼠6h后活殺,取腹主動(dòng)脈血行血?dú)夥治?右肺中葉做病理切片,觀察大鼠動(dòng)脈血氧分壓(Pa02)與(PaCO2)變化情況及肺部病理變化,進(jìn)一步從生化和病理兩方面評價(jià)復(fù)制模型的成功性。 2.40只雄性健康Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對照組(N組)、煙霧吸入性肺損傷組(S組)、煙霧吸入傷十全氟化碳低劑量組(S+L組)、煙霧吸入傷+全氟化碳中劑量組(S+M組)、煙霧吸入傷+全氟化碳高劑量組(S+H組)共5組,每組8只。正常對照組不致傷,其他各組均按照標(biāo)準(zhǔn)復(fù)制煙霧吸入傷模型,煙霧吸入傷+全氟化碳治療組分體位經(jīng)大鼠氣管環(huán)狀軟骨下第3氣管環(huán)間隙處穿刺給予2m1/kg、4ml/kg、8ml/kg全氟化碳(C6F14)緩慢注入,N組和S組大鼠分別經(jīng)相同位置緩慢注入2m1/kg生理鹽水。各組大鼠于6h后活殺,心臟穿刺抽血,左肺離體做支氣管肺泡灌洗,血及肺泡灌洗液(BALF)標(biāo)本離心后取上清裝EP管于-20℃保存,ELISA法檢測標(biāo)本中髓過氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、3-硝基酪氨酸(3-NT)指標(biāo)含量。右肺前葉做肺干/濕重比,中葉及氣管固定后做病理切片,右肺后葉及氣管做免疫組化染色觀察誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá)情況。 3、統(tǒng)計(jì)方法 所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±SD)表示,采用spss17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述、數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料的多組間比較采用單因素方差分析,方差齊性時(shí)使用SNK(Student-Newman-Keuls)法,方差不齊時(shí)采用Dunnett'C方法作多重比較方式。P0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著差異,P0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著。 結(jié)果: 1、熱煙霧吸入性肺損傷大鼠的表現(xiàn):損傷組與正常組相比,可見各大鼠呼吸頻率明顯增快(100~125次/分),腹式呼吸增強(qiáng)。大鼠口鼻周圍濕潤,可見黑色炭末樣分泌物,伴雙眼鞏膜充血,聽診肺部可聞及哮鳴音及濕性Up音。肺病理大體標(biāo)本可見雙肺顏色變深呈彌漫性損傷改變,局部散在出血點(diǎn)。病理可見煙霧吸入性肺損傷大鼠肺部中性粒細(xì)胞大量聚集,伴肺泡間隔增寬及肺泡腔內(nèi)出血。與正常組相比,6h后熱煙霧吸入性損傷組大鼠動(dòng)脈血氧分壓(PaO2)及血PH較正常組降低(P0.01),血二氧化碳分壓(PaCO2)較正常組升高。 2、低中劑量PFC氣管內(nèi)應(yīng)用可以改善煙霧吸入性肺損傷早期肺干濕重比,降低肺泡灌洗液中MPO含量及血漿中MDA、3-NT含量(P0.05)。低劑量PFC抑制肺泡灌洗液中MPO效果較中劑量效果好(P0.05)。高劑量PFC雖可降低血漿MDA水平,但對降低肺干濕重及灌洗液MPO水平無明顯影響(P0.05),并可增加血漿3-NT水平(P0.05) 3、低中劑量PFC氣管內(nèi)應(yīng)用可抑制氣管及肺組織iNOS表達(dá)水平,且低劑量PFC效果優(yōu)于中等劑量(P0.05)。高劑量PFC情況下氣管及肺組織iNOS表達(dá)水平反而增加(P0.05)。 結(jié)論: 1.從動(dòng)物致傷后表現(xiàn)、動(dòng)脈血?dú)夥治黾把狿H值觀察,認(rèn)為該大鼠模型可較好模仿熱煙霧吸入性肺損傷時(shí)肺部病理變化,且該模型穩(wěn)定,重復(fù)性好。 2.早期采用經(jīng)氣管切開處緩慢注入全氟化碳可降低肺部氧化應(yīng)激程度,但是兩者之間呈非劑量-效應(yīng)依賴關(guān)系。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看,低中劑量全氟化碳在改善大鼠熱煙霧吸入性肺損傷肺部氧化應(yīng)激程度上效果更好,可改善肺水腫程度。兩者相比低劑量優(yōu)于中劑量。高劑量組可在改善肺部氧化應(yīng)激指標(biāo)方面無明顯效應(yīng)。
[Abstract]:Objective:
The effects of different doses of perfluorocarbon (PFC) on the concentration of myeloperoxidase (MPO), malondialdehyde (MDA) and 3- nitrotyrosine (3-NT) in the alveolar lavage fluid of rats with early thermal smoke inhalation injury were observed. The protective effect of perfluorocarbon on lung oxidative stress in rats with early thermal smoke inhalation injury and its possible mechanism of action are discussed in order to provide a new therapeutic method for clinical treatment of heat smoke inhalation lung injury.
Method錛,

本文編號:2033342

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