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吸入脂多糖對哮喘小鼠氣道炎癥和氣道黏液分泌的影響

發(fā)布時間:2018-06-17 23:40

  本文選題:哮喘 + 小鼠 ; 參考:《四川大學學報(醫(yī)學版)》2014年03期


【摘要】:目的觀察哮喘小鼠吸入脂多糖(LPS,作為刺激原)其氣道炎癥和氣道黏液分泌的變化。方法30只清潔級BALB/c小鼠隨機分為哮喘組(AST組)、LPS哮喘組(LAS組)和正常組(NS組),每組10只。哮喘組用卵清白蛋白(OVA)致敏和激發(fā)制作哮喘模型,LPS哮喘組在哮喘模型的基礎上加用LPS(50μg/mL)霧化吸入30min,正常組用生理鹽水代替OVA。檢測各組小鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)細胞總數(shù)和細胞分類計數(shù),采用ELISA檢測BALF中的白細胞介素4(IL-4)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平,HE染色觀察肺部病理學改變,用阿爾辛藍-過碘酸雪夫(AB-PAS)染色氣道杯狀細胞,免疫組織化學法檢測肺組織中黏蛋白5ac(Muc5ac)的表達,熒光定量RT-PCR檢測Muc5ac mRNA在肺內的表達。并分析Muc5ac蛋白表達與各指標的相關性。結果AST及LAS組小鼠較NS組在BALF中的細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞百分比,IL-4和TNF-α水平、肺組織AB-PAS陽染面積,Muc5ac蛋白和mRNA表達明顯升高,其差異均有統(tǒng)計學意義(P均0.05)。LAS組較AST組上述氣道炎癥(除單核細胞數(shù)外)和氣道黏液高分泌指標明顯增高,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。氣道Muc5ac蛋白表達與BALF中細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞數(shù)、IL-4、TNF-α水平、氣道AB-PAS染色陽性著色面積均呈正相關(P均0.05)。結論 OVA致敏和激發(fā)的哮喘小鼠出現(xiàn)以嗜酸性粒細胞、淋巴細胞浸潤為主的氣道炎癥及杯狀細胞增生的氣道黏液高分泌,且氣道炎癥和氣道黏液高分泌關系密切。LPS可使氣道炎癥和氣道黏液高分泌加重,可能與LPS激發(fā)了體內炎癥介質的生成、活化有關。
[Abstract]:Objective to observe the changes of airway inflammation and airway mucus secretion in asthmatic mice by inhaling lipopolysaccharide (LPS). Methods Thirty clean BALB / c mice were randomly divided into two groups: Asthma group (AST group) and LPS group (Las group) and normal control group (10 mice in each group). Asthmatic group was sensitized with ovalbumin (OVA) and stimulated to make asthmatic model. On the basis of asthma model, the asthmatic group was inhaled with 50 渭 g / mL LPSN for 30 min, and the normal group was replaced by normal saline instead of OVA. The total number of BALF cells and the number of BALF cells in BALF of each group were measured. The levels of IL-4 and TNF- 偽 in BALF were detected by Elisa and the pathological changes of lung were observed by HE staining. The airway goblet cells were stained with AlsinBlue and Scheffer periodate (AB-PAS). The expression of mucin 5acine Muc5ac. and the expression of Muc5ac mRNA in lung tissue were detected by immunohistochemistry and fluorescence quantitative RT-PCR. The correlation between Muc5ac protein expression and various indexes was analyzed. Results the total number of cells, the percentage of eosinophilic granulocytes, monocytes, lymphocyte percentage and the expression of Muc5ac protein and mRNA in lung tissue in AST and Las group were significantly higher than those in NS group. Compared with AST group, the airway inflammation (except monocyte number) and the hypersecretion index of airway mucus were significantly increased in both groups (P < 0.05). The expression of Muc5ac protein in airway was positively correlated with the total number of cells in BALF, the number of eosinophils and the level of IL-4 and TNF- 偽, as well as the positive staining area of AB-PAS staining in the airway (P < 0.05). Conclusion in OVA sensitized and stimulated asthmatic mice, airway mucus secreted mainly by eosinophilic granulocyte, lymphocyte infiltration and goblet cell proliferation. Airway inflammation and airway mucus hypersecretion were closely related. LPS could aggravate airway inflammation and airway mucus hypersecretion, which may be related to the production and activation of inflammatory mediators stimulated by LPS in vivo.
【作者單位】: 四川省仁壽縣人民醫(yī)院ICU;遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院呼吸二科;
【分類號】:R562.25

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本文編號:2032977

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