miR-21通過下調(diào)ADAMTS-1表達促進大鼠肺纖維化
本文選題:微小RNA(miR-) + 肺纖維化。 參考:《細胞與分子免疫學(xué)雜志》2016年12期
【摘要】:目的探討微小RNA21(miR-21)對博萊霉素誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化的影響及相關(guān)機制。方法收集特發(fā)性肺纖維化(IPF)患者及正常人的外周血各20份,采用熒光實時定量PCR檢測miR-21表達。將45只SD大鼠隨機分為對照組、miR-21激動劑(miR-21agomir)和miR-21拮抗劑(miR-21antagomir)組,每組15只。經(jīng)氣管內(nèi)注入博萊霉素A5建立肺纖維化模型后,分別給予生理鹽水、miR21 agomir、miR21 antagomir尾靜脈注射,第28天處死所有大鼠。取出肺組織,行HE和Masson染色,通過熒光實時定量PCR和Western blot法分別檢測含1型血小板結(jié)合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶(ADAMTS-1)、1型膠原蛋白(Col1)、Col3 mRNA與蛋白表達,分離血清,ELISA檢測血清1型前膠原蛋白羧基端前肽(P1CP)和3型前膠原蛋白氨基端前肽(P3NP)的含量。結(jié)果 IPF患者外周血miR-21表達水平明顯高于正常人。miR-21 agomir組大鼠肺泡炎和肺纖維化程度明顯重于對照組,而miR-21 antagomir組大鼠肺泡炎和肺纖維化程度顯著輕于對照組。與對照組相比,miR-21 agomir組ADAMTS-1mRNA與蛋白表達水平降低,Col1、Col3的mRNA與蛋白表達水平及血清P1CP、P3NP水平均增加。但miR-21 antagomir組ADAMTS-1 mRNA與蛋白表達水平較對照組升高,Col1、Col3的mRNA與蛋白表達水平及血清P1CP、P3NP含量較對照組減少。結(jié)論 miR-21促進博萊霉素誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化進展,其機制可能與下調(diào)ADAMTS-1表達及隨后增加肺組織Col1、Col3含量有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of minimal RNA21 miR-21 on bleomycin induced pulmonary fibrosis in rats and its related mechanisms. Methods 20 patients with idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) and 20 normal controls were collected. The expression of miR-21 was detected by fluorescence real time quantitative PCR. Forty-five SD rats were randomly divided into control group (n = 15) and miR-21 antagonist group (n = 15). The pulmonary fibrosis model was established by intratracheal injection of bleomycin A _ 5. All the rats were killed on the 28th day after intravenous injection of normal saline miR21 agomirir-miR21 antagomir. Lung tissue was taken out and stained with HE and Masson. The expression of ADAMTS-1 collagen type 1 collagen was detected by real-time quantitative PCR and Western blot, respectively. Serum procollagen type 1 (P1CPP) and type 3 procollagen amino terminal propeptide (P3NPP) were detected by Elisa. Results the expression of miR-21 in peripheral blood of patients with IPF was significantly higher than that of normal persons. The degree of alveolitis and pulmonary fibrosis in the group of miR-21 agomir was significantly higher than that in the control group, while the degree of alveolitis and pulmonary fibrosis in the group of miR-21 antagomir was significantly lower than that in the control group. Compared with the control group, the expression of ADAMTS-1mRNA and protein in the miR-21 agomir group was significantly lower than that in the control group. However, the expression level of ADAMTS-1 mRNA and protein in miR-21 antagomir group was significantly higher than that in control group. The expression of mRNA and protein in Col1C Col3 and the level of P1CPP P3NP in serum were lower in miR-21 antagomir group than in control group. Conclusion miR-21 can promote the progression of pulmonary fibrosis induced by bleomycin in rats. The mechanism may be related to the down-regulation of ADAMTS-1 expression and the subsequent increase of Col1c Col3 content in lung tissue.
【作者單位】: 湖南醫(yī)藥學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)院;湖南醫(yī)藥學(xué)院第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科;懷化市第一人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科;南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【基金】:湖南省教育廳資助優(yōu)秀青年科研項目(14B142)
【分類號】:R563
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本文編號:1891789
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