本文選題：過敏性支氣管哮喘 + 豚鼠　； 參考：《南昌大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：目的： 探討抗TNF-α和IL-1β IgY抗體霧化吸入治療過敏性支氣管哮喘的作用機(jī)制。 方法： 1、應(yīng)用卵清蛋白（OVA）霧化吸入法建立Hartley豚鼠過敏性支氣管哮喘模型。 2、霧化吸入抗TNF-α和IL-1β IgY抗體及布地奈德混懸液。 3、隨機(jī)分為五組：正常對照組（C組）；過敏性支氣管哮喘組（M組）；0.1%抗TNF-α和IL-1β IgY抗體治療組（Z1組）；1.0%抗TNF-α和IL-1β IgY抗體治療組（Z_2組）；布地奈德混懸液治療組（常規(guī)藥物陽性治療組）（Z_3組）。 4、觀察各組用藥治療前后1h的活動、進(jìn)食、噴嚏、抓鼻、咳嗽、呼吸頻率和呼吸深度等一系列變化。 5、所有實(shí)驗(yàn)組豚鼠于末次治療結(jié)束后第2、4、8、24小時等4個時間點(diǎn)處死，取右肺做病理切片，經(jīng)HE染色，觀察肺組織病理變化。 6、所有實(shí)驗(yàn)組豚鼠于末次治療結(jié)束后第2、4、8、24小時等4個時間點(diǎn)處死，左肺行支氣管肺泡生理鹽水灌注，收集肺泡灌洗液（BALF）測定細(xì)胞因子及IgE含量。 7、采用雙抗夾心ELISA方法檢測BALF中TNF-α、IL-1、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13、IL-16和TGF-β等細(xì)胞因子和IgE的含量。 8、應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)采用X±SD表示。對各組不同時間之間先進(jìn)行χ~2正態(tài)分布和方差齊性檢驗(yàn)，若符合正態(tài)分布和方差齊性，則采用單因素方差分析（one-way ANOVA）,多重比較再采用LSD檢驗(yàn)。若不符合正態(tài)分布和方差不齊性，則采用多重秩和檢驗(yàn)，多重比較用Mann-Whiteney法。相關(guān)性檢驗(yàn)使用Pearson方法。取P0.05表示差異有顯著性。進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果： 1、應(yīng)用卵清蛋白（OVA）霧化吸入法建立Hartley豚鼠過敏性支氣管哮喘模型成功。 2、動物行為學(xué)觀察：模型組（M組）動物在霧化吸入致敏后表現(xiàn)比較興奮，煩躁不安，摩擦皮毛，抓鼻、噴嚏、咳嗽現(xiàn)象；0.1%抗TNF-α和IL-1β IgY抗體治療組（Z_1組）、1.0%抗TNF-α和IL-1β IgY抗體治療組（Z_2組）、布地奈德混懸液（常規(guī)藥物陽性治療組）（Z_3組）動物進(jìn)食、飲水、活動在治療后較M組動物明顯改善。 3、肺組織病理學(xué)檢查： C組各時間點(diǎn)下的肺組織在光鏡下可見氣道壁和肺泡壁結(jié)構(gòu)完整，毛細(xì)血管密集，管腔通暢；肺泡腔內(nèi)清潔透亮，肺泡上皮細(xì)胞排列有序；肺泡上皮與毛細(xì)血管及其間質(zhì)成份結(jié)構(gòu)完整并構(gòu)成完整的肺泡呼吸膜；各級支氣管周圍未見炎性細(xì)胞浸潤。 M組動物各時間點(diǎn)下的肺支氣管、肺泡壁和肺泡腔結(jié)構(gòu)不完整；毛細(xì)血管發(fā)生擴(kuò)張，白細(xì)胞明顯增多；肺泡腔發(fā)生大面積破裂，腔內(nèi)可見滲出液，包括壞死的肺泡上皮細(xì)胞，并有白細(xì)胞浸潤；支氣管管壁平滑肌細(xì)胞肥大和增生，基底膜顯著增厚并玻璃樣變；肺間質(zhì)有淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸性細(xì)胞浸潤。 Z_1組和Z_2組肺泡管和肺泡壁結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)較完整；肺泡形態(tài)較M組規(guī)則，肺泡腔內(nèi)偶見少量炎癥細(xì)胞游離于其中；肺泡毛細(xì)血管內(nèi)炎性細(xì)胞較M組明顯減少；支氣管粘膜有部分增厚現(xiàn)象，管壁平滑肌細(xì)胞較M組明顯減少；支氣管管腔內(nèi)及管腔旁僅可見少量炎性細(xì)胞浸潤。 Z_3組和M組比較肺泡結(jié)構(gòu)破壞減少。Z_1組、Z_2組、Z_3組之間相比較形態(tài)結(jié)構(gòu)未見明顯的差別。 4、BALF細(xì)胞因子變化： 2h：M組各細(xì)胞因子含量高于C組（P0.05），IL-1含量高于其他各組（P0.05）；TNF-α含量高于Z_1、Z_2組（P0.05）；IL-16含量高于Z_1、Z_3組（P0.05）；IL-4、IL-8、TGF-β含量高于Z_3組（P0.05）；IgE含量高于Z_1組（P0.05）。Z_1、Z_2、Z_3各組IL-1、IL-6、IL-10含量各組間無顯著性差異；Z_3組IL-4、IL-13含量低于Z_1、Z_2組（P0.05），而TNF-α含量高于Z_1、Z_2組（P0.05）；Z_2組IL-16、IgE含量高于Z_1、Z_3組（P0.05）；Z_3組TGF-β含量低于Z_1、Z_2組（P0.05）。 4h：M組IL-1、IL-4、IL-6、IgE含量高于其他各治療組（P0.05）； IL-8、IL-13、TNF-α含量高于Z_2、Z_3組（P0.05）；IL-16含量高于Z_1、Z_3組（P0.05）；TGF-β含量高于Z_1、Z_2組（P0.05）。Z_1、Z_2、Z_3各組在IL-1、IL-13、IgE含量各組間無顯著性差異；Z_2組IL-4、IL-6含量高于Z_1組（P0.05）；Z_1組IL-8、含量高于Z_2、Z_3組（P0.05）；IL-16含量Z_2組顯著高于Z_1、Z_3組（P0.05），而TGF-β含量顯著低于Z_1、Z_3組（P0.05）。Z_3組TNF-α低于Z_1、Z_2組（P0.05）。Z_3組TNF-α、TGFβ低于Z_1、Z_2組（P0.05）。 8h：M組在IL-1、IL-4、IL-6、IL-8、IL-13、IL-16、TNF-α、TGF-β含量均顯著高于Z_1、Z_2、Z_3組（P0.05），IgE顯著高于Z_2、Z_3組（P0.05）。Z_1、Z_2、Z_3各組在IL-1、IL-6、IL-8、IL-13、IL-16含量各組間無顯著性差異；Z_3組IL-4含量顯著低于Z_1組（P0.05）；Z_3組TNF-α含量顯著低于Z_1組，，高于C組、Z_2組（P0.05）；Z_2組TNF-α、IgE含量顯著低于Z_1組（P0.05）。 24h：M組在IL-1、IL-4、IL-6、IL-8、IL-13、IL-16、TNF-α、TGF-β、IgE仍顯著高于C組（P0.05）；IL-1、IL-4、IL-6、IL-13、IL-16、TNF-α、TGF-β、IgE顯著高于Z_3組（P0.05）；IL-4、IL-6、IL-8、IL-13、IL-16、TGF-β、IgE顯著高于Z_2組（P0.05）；IL-4、TGF-β也顯著高于Z_1組（P0.05）。Z_3組在IL-1含量顯著低于Z_1、Z_2組（P0.05）；TNF-α含量顯著高于Z_1、Z_2組（P0.05）；IL-4含量顯著高于Z_2組（P0.05）；IL-6、IL-13、IgE含量低于Z_1組（P0.05）。Z_2組在IL-4、IL-6、IL-13、IL-16、IgE含量低于Z_1組（P0.05）。IL-1在Z_1、Z_2組含量高于C組（P0.05），IL-4在Z_2組含量高于C組（P0.05），IL-13、IL-16在Z_1組含量高于C組（P0.05），TNF-α在Z_2、Z_3組含量顯著高于C組（P0.05），IgE在Z_1、Z_2、Z_3組含量高于C組（P0.05）。 IL-10在2h、4h、8h、24h各組之間無統(tǒng)計學(xué)差異。但在M組IL-4/IL-10比值在2h、4h、8h、24h分別為0.86、1.08、0.86、0.83，均高于C組在相應(yīng)時間點(diǎn)的IL-4/IL-10比值0.54、0.54、0.48、0.73。Z_1組IL-4/IL-10比值在2h、4h、8h、24h分別為1.34、0.56、0.71、0.75；Z_2組IL-4/IL-10比值在2h、4h、8h、24h分別為0.98、0.68、0.53、0.57，Z_1組、Z_2組2h高于M組（0.86），其他時間點(diǎn)均低于M組（P0.05）；Z_3組IL-4/IL-10比值在2h、4h、8h、24h分別為0.74、0.67、0.57、0.93，除了治療后期的24h高于M組（0.83），其他時間點(diǎn)均低于M組（P0.05）。從IL-4/IL-10比值看Z_1、Z_2、Z_3組均低于M組，稍高于C組，說明Z_1、Z_2、Z_3組的IL-10相對提高，出現(xiàn)過敏性炎癥的抑制。 5、BALF中細(xì)胞因子的相關(guān)性： BALF中TNF-α與IL-1、IL-4、IL-8、IL-13、IL-16、IgE含量呈正相關(guān)（P0.05）。BALF中IL-1與IL-4、IL-6、IL-8、IL-13、IL-16、TNF-α、TGF-β、IgE呈正相關(guān)（P0.05）。BALF中IL-4與IL-1、IL-6、IL-8、IL-13、IL-16、TNF-α、TGF-β、IgE呈正相關(guān)（P0.05）。BALF中IL-6與IL-1、IL-4、IL-8、IL-13、IL-16、TGF-β、IgE呈正相關(guān)（P0.05）。BALF中IL-8與IL-1、IL-4、IL-6、IL-13、IL-16、TNF-α、TGF-β、IgE呈正相關(guān)（P0.05）。BALF中IL-10的變化與其他各細(xì)胞因子及IgE變化無相關(guān)性。BALF中IL-13與IL-1、IL-4、IL-6、IL-8、IL-16、TNF-α、TGF-β、IgE呈正相關(guān)（P0.05）。BALF中IL-16與IL-1、IL-4、IL-6、IL-8、IL-13、TNF-α、TGF-β、IgE呈正相關(guān)（P0.05）。BALF中IgE與IL-1、IL-4、IL-6、IL-8、IL-13、IL-16、TNF-α、TGF-β呈正相關(guān)（P0.05）。BALF中TGF-β與IL-1、IL-4、IL-6、IL-8、IL-13、IL-16、IgE呈正相關(guān)（P0.05）。 結(jié)論： 1、本文從動物行為學(xué)表現(xiàn)、組織病理學(xué)切片觀察、以及致炎細(xì)胞因子（IL-1、IL-4、IL-6、IL-8、IL-13、IL-16、TNF-α、TGF-β）和抑炎細(xì)胞因子（IL-10）在BALF的含量變化證明，抗TNF-α和IL-1β IgY抗體霧化治療能夠有效地控制過敏性支氣管炎癥癥狀和體征，以及支氣管肺組織炎癥病理反應(yīng)。 2、初步揭示了各種致炎和抑炎細(xì)胞因子在過敏性支氣管肺部炎癥中及病理過程中的變化及相互關(guān)系，在BALF中的IL-4、IL-6、IL-8、IL-13、IL-16、TGF-β等細(xì)胞因子及IgE與TNF-α、IL-1的變化具有相關(guān)性，并初步證明TNF-α和IL-1β不但在過敏性支氣管肺炎病理過程中對組織產(chǎn)生損傷，而且是作為炎癥級聯(lián)反應(yīng)的啟動因子。 3、通過抗TNF-α和IL-1β IgY抗體霧化治療OVA致敏的支氣管哮喘模型豚鼠證明，其減少了肺組織局部IL-4、IL-6、IL-8、IL-13、IL-16和TGF-β等致炎細(xì)胞因子的分泌，減輕了過敏性支氣管哮喘的病理損害的嚴(yán)重程度，減緩炎癥癥狀和體征，治療療效與布地奈德相似。故抗TNF-α和IL-1β IgY抗體霧化吸入治療有可能成為新的過敏性支氣管哮喘的手段，其治療時間以3次/天為宜。 4、BALF中IL-1與IL-4、IL-6、IL-8、IL-13、IL-16、TNF-α、TGF-β、IgE呈正相關(guān)；TNF-α與IL-1、IL-4、IL-8、IL-13、IL-16、IgE含量呈正相關(guān)。
[Abstract]:Objective:
Objective to investigate the mechanism of aerosol inhalation of anti TNF- alpha and IL-1 beta IgY on allergic bronchial asthma.
Method錛

本文編號：1839460