本文關鍵詞：TRPC1在人氣道上皮內的表達及其意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《重慶醫(yī)科大學》 2015年

TRPC1在人氣道上皮內的表達及其意義

何葉  

【摘要】：研究背景：瞬時受體電位蛋白-1(transient receptor potential canonical 1, TRPC1)是廣泛存在于人體多種細胞膜及細胞器膜上一種壓力敏感受體,參與人體內多種細胞的機電換能機制。氣道高壓力與肺功能減損、呼吸道炎癥反應、氣道黏液高分泌、氣道重塑等肺臟多種病理生理改變有關,但其信號傳導機制尚不清楚。因此,我們推測TRPC1蛋白可能是支氣管上皮細胞內感知機械壓力并介導相關病理改變的重要受體。目的：探討人支氣管上皮細胞內TRPC1蛋白的表達情況及其在氣道感知機械壓力機制中的作用。方法：1.收集人肺癌患者肺癌旁5cm以外的無病變組織,根據(jù)臨床表現(xiàn)分為正常組、慢性阻塞性肺病組(COPD)和哮喘組,通過細胞免疫組織化學、Western-blot方法、實時熒光定量聚合酶鏈反應(qRT-PCR)證實TRPC1在人支氣管上皮細胞中的表達情況,以及各組分布特點；2.16HBE細胞經(jīng)TRPCl siRNA NC siRNA轉染技術實現(xiàn)基因沉默后,通過細胞免疫熒光技術、Western-blot檢測沉默效率；3.將16HBE細胞分組處理：單純刺激組、刺激+TRPCl siRNA轉染組、對照組,以細胞牽張刺激系統(tǒng)處理6 mmin后,激光共聚焦技術檢測細胞內鈣離子濃度變化。結果：1.COPD組、哮喘組支氣管上皮細胞內TRPCl表達水平明顯高于對照組(均P0.05)；2.經(jīng)TRPCl siRNA轉染后,16HBE細胞內TRPCl蛋白表達水平明顯降低(均P0.01),經(jīng)NC siRNA轉染后,TRPCl蛋白的表達水平無明顯變化(P=0.06,P=0.10)；3.單純刺激組細胞內鈣離子熒光強度顯著高于對照組(對照組：0.08±0.007,單純刺激組：0.18±0.008,P0.01),而刺激+TRPCl siRNA轉染組鈣離子熒光強度與對照組無明顯差異(刺激+TRPCl siRNA組：0.09±0.007,P=0.06)。結論：1.TRPC1在支氣管上皮細胞中廣泛表達,且在COPD及哮喘患者肺組織中表達量較正常肺組織表達量明顯升高；2.支氣管上皮細胞16HBE經(jīng)TRPCl siRNA轉染后,細胞內TPRC1蛋白表達水平明顯抑制；3.支氣管上皮細胞內的TRPCl蛋白對機械壓力刺激敏感。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R56
【目錄】：

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