本文選題：肺纖維化 + 羅格列酮　； 參考：《河北醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：研究背景及目的:特發(fā)性肺纖維化(Idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一種病因不明的慢性、進(jìn)展性的間質(zhì)性肺疾病,目前尚無足夠的證據(jù)來支持任何特定的藥物療法的使用。因漸進(jìn)性呼吸困難和頑固性咳嗽,IPF患者的生活質(zhì)量很差。目前對其尚無有效的治療,故IPF患者一般預(yù)后較差,確診后的中位生存期為3 5年。據(jù)報(bào)道,IPF的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)在增加,但其病理生理機(jī)制尚不明確且缺乏有效治療,因此關(guān)于IPF的病理生理機(jī)制及其治療藥物一直是國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。微小RNAs(miRNAs)是一類由大約19-22個(gè)核苷酸組成的非編碼RNAs,在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達(dá)。異常表達(dá)的miRNAs,如let-7d、mi RNA-21、mi RNA-155,在肺纖維的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。這些miRNAs對認(rèn)識肺纖維化的發(fā)生機(jī)制及臨床治療提供一種新思路,有可能成為新的治療靶點(diǎn)。羅格列酮(Rosiglitazone,RSG)是過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)的人工合成配體,在臨床上多用于治療2型糖尿病,是一種常見的噻唑烷二酮類新型胰島素增敏劑。近年來發(fā)現(xiàn)PPARγ及其配體可參與腎、肝、肺等多個(gè)器官纖維化的發(fā)生和發(fā)展。已有研究者通過不同的技術(shù)手段明確了羅格列酮在改善肺纖維化中的效果。有報(bào)道稱PPARγ的合成配體可干擾TGF-β1/Smad信號途徑,從而抑制TGF-β1的致纖維化作用。但羅格列酮治療肺纖維化的分子機(jī)制仍不明確,需進(jìn)一步的研究。通過本實(shí)驗(yàn)可觀察到RSG在治療肺纖維化過程中,是否存在miRNAs的表達(dá)異常,這種表達(dá)變化是否與TGF-β1信號系統(tǒng)有關(guān),初步探討miRNAs是否參與了RSG治療肺纖維化的過程。方法:雄性健康Wistar大鼠54只,體重在120-130g之間,應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表法將其隨機(jī)分為3組即對照組(Control組)、博萊霉素組(BLM組)、博萊霉素+羅格列酮組(BLM+RSG組),每組共18只,于后兩組大鼠氣管內(nèi)一次性注入博萊霉素(5mg/kg)建立大鼠肺纖維化模型,對照組則注入等體積生理鹽水。造模24小時(shí)后給予BLM+RSG組大鼠羅格列酮(3mg/kg.d)灌胃,余2組灌入等體積生理鹽水。于第7天、14天、28天3個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別于各組隨機(jī)取出6只大鼠處死,然后取右肺中葉行病理學(xué)觀察(HE染色,Masson染色)、右肺上葉取材應(yīng)用Real time RT-PCR測定肺組織mi RNA-21、mi RNA-155、let-7d的表達(dá),并利用免疫組化檢測TGF-β1的表達(dá)。采用SPSS21統(tǒng)計(jì)軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,以P0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1肺組織病理結(jié)果:7、14、28天,Control對照組肺泡結(jié)構(gòu)正常,存在少許膠原纖維,7天時(shí)BLM組大鼠與Control相比肺泡炎明顯(P0.05),14、28天BLM組大鼠肺纖維化程度逐漸加重,顯著高于同期Control組(P0.05),證明肺纖維化模型復(fù)制成功。經(jīng)RSG治療后,BLM+RSG組大鼠肺泡炎及肺纖維化程度較同期BLM組明顯減輕(P0.05)。2 Real time RT-PCR結(jié)果:7、14、28天,BLM組mi RNA-21及mi RNA-155的表達(dá)水平較Control組顯著增加(P0.05),let-7d的表達(dá)水平較Control組顯著減少(P0.05);經(jīng)RSG治療后BLM+RSG組mi RNA-21及mi RNA-155的表達(dá)較同一時(shí)間點(diǎn)BLM組顯著減少(P0.05),let-7d的表達(dá)水平較同期的Control組顯著增加(P0.05)。3免疫組化結(jié)果:7、14、28天,BLM組TGF-β1表達(dá)水平與Control組相比明顯升高(P0.05);經(jīng)RSG治療后BLM+RSG組TGF-β1表達(dá)水平均較同一時(shí)間點(diǎn)的BLM組下調(diào)(P0.05)。4 TGF-β1與miRNAs相關(guān)分析:BLM組及BLM+RSG組在7、14、28天3個(gè)時(shí)間點(diǎn)上mi RNA-21及mi RNA-155的表達(dá)量均與TGF-β1呈正相關(guān)(P0.05),而let-7d的表達(dá)量與TGF-β1呈負(fù)相關(guān)(P0.05)。結(jié)論:1羅格列酮可以減輕博萊霉素誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化。2在羅格列酮治療肺纖維化過程中,mi RNA-21及mi RNA-155的表達(dá)上調(diào),let-7d表達(dá)下調(diào)。3羅格列酮可能是通過調(diào)節(jié)miRNAs及TGF-β1信號通路減輕博萊霉素誘導(dǎo)的大鼠纖維化。
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本文編號：1831603