本文關鍵詞：COPD大鼠氣道成纖維細胞轉染rHSG基因后觀察細胞增殖、凋亡及與TGF-β1、PDGF表達水平關系，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《貴陽中醫(yī)學院》 2012年

COPD大鼠氣道成纖維細胞轉染rHSG基因后觀察細胞增殖、凋亡及與TGF-β1、PDGF表達水平關系

李波  

【摘要】：目的：本研究通過構建攜帶增殖抑制基因(rHSG)的真核表達載體,轉染至慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠氣道成纖維細胞,觀察COPD大鼠氣道成纖維細胞增殖、凋亡及轉化生長因子(TGF-β1)、血小板衍生長因子(PDGF)表達水平關系,為干預氣道成纖維細胞增殖引起肺部疾病如慢性阻塞性肺疾病,打下基因治療基礎,并為尋找到延緩COPD病情進展提供了理論依據。 方法：采用SD雄性大鼠構建COPD大鼠模型,運用組織塊貼壁法,體外培養(yǎng)COPD大鼠氣道原代成纖維細胞,并用波形蛋白鑒定細胞,取3代細胞進行后續(xù)實驗。通過分子克隆,構建攜帶rHSG基因的真核表達載體,實驗分組為：對照組(COPD模型未轉染組)、空載體pEGFP-nl組、轉染pEGFP-rHSG組,實驗將陽離子脂質體作為轉染介質,把重組質粒轉染到COPD模型大鼠氣道成纖維細胞,分別感染24小時、48小時、3天、5天、7天后,使用MTT方法檢測轉染后成纖維細胞增殖凋亡情況；Western blot檢測轉染后rHSG、TGF-β1、PDGF蛋白含量；提取總RNA,逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測TGF-β1、PDGF及rHSGmRNA的表達水平。對數據進行統(tǒng)計學分析,應用SPSS18.0軟件,得到實驗數據用x±s表示,采用單因素方差分析均數、標準差,P0.05為有顯著性統(tǒng)計學意義。 結果：COPD大鼠氣道成纖維細胞原代培養(yǎng)成功,經過免疫組化,波形蛋白鑒定呈陽性。隨著rHSG基因轉染大鼠氣道成纖維細胞時間延長,rHSG基因轉染組明顯比模型對照組對成纖維細胞的增殖有抑制作用；TGF-β1、PDGF兩個基因的mRNA表達量減少出現在轉染24小時,其mRNA的表達量減少值達到了最大在7天的時侯,在5天-7天時候mRNA表達量也有減少,但是幅度較前減小各轉染組間TGF-β1、PDGFmRNA表達量差別,滿足P0.05。當pEGFP-rHSG轉染到細胞24小時,rHSGmRNA表達量開始增加,增加值達到最大在7天的時侯,而轉染5d-7d時表達仍有繼續(xù)增加,但增加幅度較前面明顯,各轉染組間rHSG mRNA表達差別滿足P0.05。 結論：rHSG基因與TGF-β1、PDGF基因的平衡關系被打破,是COPD氣道重塑中至關因素。rHSG基因轉染組隨著感染時間延長明顯夠抑制COPD氣道成纖維細胞增殖,相反COPD氣道成纖維細胞中TGF-β1與PDGF隨著rHSG基因感染時間延長出現低表達,證實當外源性rHSG基因轉染到COPD大鼠氣道成纖維細胞,能夠調節(jié)TGF-β1、PDGF基因的過度表達,進而使氣道成纖維細胞的增殖受到抑制。因此高效率的rHSG基因轉染有可能會在一定程度上延緩COPD氣道重塑進展。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：貴陽中醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R563.9
【目錄】：

下載全文 更多同類文獻

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購買知網充值卡、在線充值、在線咨詢)

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 劉憲俊;柯明遠;陳弼滄;吳秋英;;魚腥草注射液治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期的臨床觀察[J];福建中醫(yī)學院學報;2006年02期

2 陳明靜;吳維平;;COPD中醫(yī)病因病機及辨證分型研究進展[J];光明中醫(yī);2009年01期

3 陳斯寧;黃美杏;潘玲;馮原;;利金方對COPD穩(wěn)定期肺氣虛證患者免疫功能影響的研究[J];甘肅中醫(yī);2007年12期

4 丁凡;邵增務;;骨肉瘤基因治療載體研究進展[J];國際骨科學雜志;2007年06期

5 曹紅九,王東華;益氣活血法治療慢性阻塞性肺病[J];湖北中醫(yī)雜志;2001年01期

6 李素云;陳萍;李建生;李彬;侯政昆;趙君玫;王明航;;燥濕化痰方藥對痰濕壅肺證慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者細胞因子的影響[J];中醫(yī)學報;2010年01期

7 胡振明,丁云東;補中益氣湯治療慢性阻塞性肺病穩(wěn)定期的臨床觀察[J];江西中醫(yī)藥;2005年11期

8 張洪春,晁恩祥;調補肺腎膠囊治療慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期臨床研究[J];北京中醫(yī)藥大學學報;2003年02期

9 陶志強;高想;唐艷芬;孫建;章勻;尤菊松;倪衛(wèi)兵;喻海忠;;金蕎麥水劑對慢性阻塞性肺病患者血清細胞因子和肺功能的影響[J];遼寧中醫(yī)雜志;2008年03期

10 湯翠英,林琳,許銀姬;培土生金法綜合治療對COPD穩(wěn)定期患者營養(yǎng)狀況及肺功能的影響[J];南京中醫(yī)藥大學學報;2005年01期

【共引文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 呂英;;慢性阻塞性肺病的中醫(yī)研究現狀[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2006年02期

2 耑冰;胡天成;陳紹平;蔡定筠;劉小燕;;六君子湯對COPD穩(wěn)定期氧化／抗氧化失衡的影響[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2006年03期

3 陳莉;周蘭;汪超;姚詩清;孫濤;;康艾注射液與抗生素聯合治療老年慢性阻塞性肺病急性加重期療效觀察[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2010年12期

4 李長安;;中藥配合常規(guī)治療COPD急性加重期肺腎氣虛證臨床觀察[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2011年07期

5 張念志;王國臣;;清肺祛痰方對慢性阻塞性肺疾病急性加重期(痰熱郁肺證)治療作用的臨床觀察[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2011年11期

6 王德琴;徐彬;李澤庚;彭波;童佳兵;楊程;;芪白平肺膠囊治療痰瘀阻肺型COPD臨床觀察[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2012年04期

7 張杰;張穎;馬晉;;低鈉血癥與慢性阻塞性肺疾病急性發(fā)作合并呼衰程度的關系[J];安徽衛(wèi)生職業(yè)技術學院學報;2009年06期

8 竇紅漫,王元勛,蔡圣榮,方志斌;實驗性肺氣虛證大鼠氣道病理組織學及超微結構觀察[J];安徽醫(yī)學;2004年05期

9 周凌燕;黃美健;;慢性阻塞性肺疾病藥物治療進展[J];安徽醫(yī)學;2011年06期

10 徐道洲;劉琨;唐暉;;雙水平無創(chuàng)氣道正壓通氣治療AECOPD并Ⅱ型呼吸衰竭失敗原因分析[J];安徽醫(yī)學;2011年12期

中國重要會議論文全文數據庫 前10條

1 沈蕓;唐神結;孫華;郝曉暉;;肺結核合并慢性阻塞性肺疾病患者免疫功能的變化及意義[A];中華醫(yī)學會結核病學分會2011年學術會議論文匯編[C];2011年

2 朱文娟;李映霞;牛敏芬;何慈勝;程光宇;薛漢榮;吳海桂;;慢阻肺患者肺功能變化與中醫(yī)痰瘀虛證相關性研究[A];江西省中西醫(yī)結合學會呼吸病專業(yè)委員會首次學術會議論文集[C];2009年

3 張秋;陳建建;吳吉鋒;;防感扶正合劑治療COPD患者穩(wěn)定期療效觀察[A];江西省第七次中西醫(yī)結合危重病、急救醫(yī)學學術研討會論文集[C];2011年

4 李海寧;王丹鳳;王洋;孫瑩;;小潮氣量聯合低水平PEEP機械通氣治療COPD呼衰并肺大泡療效觀察[A];創(chuàng)新沈陽文集（B）[C];2009年

5 趙寧民;趙紅衛(wèi);秦玉花;張偉;張磊;張海峰;馬愛玲;;慢性阻塞性肺炎的非藥物治療新進展[A];2011年中國藥學大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

6 趙寧民;趙紅衛(wèi);秦玉花;張偉;張磊;張海峰;馬愛玲;;慢性阻塞性肺炎的藥物治療新進展[A];2011年中國藥學大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

7 姚婉貞;陳亞紅;;慢性阻塞性肺疾病患者的表型[A];呼吸與危重癥醫(yī)學（2010-2011）[C];2011年

8 于麗麗;王天芳;徐雯潔;王智瑜;吳秀艷;焦揚;蘇惠萍;呂佳蒼;鄒小娟;陳憲海;苗建英;徐艷玲;李素云;王慶國;;慢性阻塞性肺疾病患者急性加重期到穩(wěn)定期中醫(yī)證候演變特點的研究[A];全國第十二次中醫(yī)診斷學術年會論文集[C];2011年

9 吳巧媚;;大黃粉臍療對AECOPD呼衰無創(chuàng)通氣患者腹脹影響的研究[A];2011·中國醫(yī)師協會中西醫(yī)結合醫(yī)師大會論文集[C];2011年

10 吳巧媚;彭鹿;陳配配;;中醫(yī)情志護理配合穴位按摩在AECOPD呼衰無創(chuàng)通氣患者的應用[A];2011·中國醫(yī)師協會中西醫(yī)結合醫(yī)師大會論文集[C];2011年

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 廖華;Mfn2基因抑制血管平滑肌細胞增殖的功能序列及肽研究[D];華中科技大學;2011年

2 李淵;痰熱清注射液對產ESBLs大腸埃希菌耐藥性影響的研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2011年

3 王毅;慢性阻塞性肺疾病模型大鼠“肺病及腸”的實驗觀察[D];北京中醫(yī)藥大學;2011年

4 李亞;慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的優(yōu)化與評價及補肺健脾方對膈肌功能的影響[D];北京中醫(yī)藥大學;2011年

5 趙丹;調補肺腎法治療慢阻肺穩(wěn)定期臨床療效評價指標體系研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2011年

6 孫武裝;慢性阻塞性肺疾病基質金屬蛋白酶、apelin的表達及糖皮質激素的治療作用和機制研究[D];河北醫(yī)科大學;2011年

7 郭愛敏;慢性阻塞性肺疾病患者穩(wěn)定期的功能狀態(tài)及其相關因素[D];北京協和醫(yī)學院;2010年

8 張艷;內皮特異性分子-1在慢性阻塞性肺疾病中的變化和可能的作用[D];中南大學;2011年

9 王丹妮;扶正排毒片對無癥狀HIV感染者免疫功能調節(jié)的研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2011年

10 劉曉丹;健身氣功防治COPD穩(wěn)定期患者的臨床觀察及機理的研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2011年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 高景蓬;克侖特羅對COPD大鼠膈肌細胞凋亡影響的實驗研究[D];南京醫(yī)科大學;2009年

2 歐陽曉平;磷脂酶C抑制劑U73122對COPD大鼠CD8+T細胞肺內募集及MMP-9、MMP-12表達的影響[D];南京醫(yī)科大學;2010年

3 陳遠校;瀉肺逐痰丸治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期（痰熱壅肺證）的臨床研究[D];湖南中醫(yī)藥大學;2010年

4 錢文君;COPD病人T淋巴細胞和細胞因子的檢測及意義[D];蘇州大學;2010年

5 張華;COPD患者對疾病的認知情況及其生活質量影響因素分析[D];中國醫(yī)科大學;2010年

6 王燕芳;補肺益腎方聯合穴位貼敷對慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期的療效評價及成本效果分析[D];河南中醫(yī)學院;2010年

7 張海龍;辨證治療慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期的療效及對全身炎癥反應的影響[D];河南中醫(yī)學院;2010年

8 武偉華;6分鐘步行試驗（6MWT）、BMI及MMRC對評價COPD病情嚴重程度的意義[D];泰山醫(yī)學院;2010年

9 李常;轉染HSG基因干預COPD氣道成纖維細胞增殖的研究[D];貴陽中醫(yī)學院;2010年

10 朱曉龍;中藥“穴位貼敷”治療慢性阻塞性肺疾病肺腎氣虛型患者臨床療效觀察[D];貴陽中醫(yī)學院;2010年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 李萍,王北寧,丁振若;轉染p53基因對肺腺癌細胞株裸鼠移植瘤生長的影響[J];癌癥;2001年05期

2 徐雯潔;王天芳;王智瑜;于麗麗;呂佳蒼;王慶國;;基于現代文獻的慢性阻塞性肺疾病中醫(yī)證候及證候要素的研究[J];中華中醫(yī)藥雜志;2008年01期

3 雷撼,錢桂生,吳國明,黃桂君;新型陽離子脂質體的制備及其轉染效率的測定[J];第三軍醫(yī)大學學報;2005年02期

4 林允信,王育敏,王華月;肺心病患者血漿內皮素-1和降鈣素基因相關肽的水平[J];第四軍醫(yī)大學學報;2000年06期

5 劉肇杰,范永琛;氣道粘液纖毛功能障礙與治療[J];國外醫(yī)學(兒科學分冊);1998年01期

6 丁凡;邵增務;;骨肉瘤基因治療載體研究進展[J];國際骨科學雜志;2007年06期

7 陳謹;王浩彥;;慢性阻塞性肺疾病急性感染與機體免疫的關系[J];國外醫(yī)學(內科學分冊);2006年04期

8 陳曉紅;韓德民;;頭頸惡性腫瘤的基因治療[J];國際耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2006年03期

9 林磊;熊偉;祝慶余;;非病毒型載體介導基因轉染[J];醫(yī)學分子生物學雜志;2007年01期

10 黃黎;李成文;;脂質體在醫(yī)學中的應用進展[J];國際生物制品學雜志;2006年03期

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 陳哲;慢性阻塞性肺疾病患者血清白介素-8的測定及其意義[J];天津醫(yī)科大學學報;2000年03期

2 李龍平;黃芪注射液治療COPD心肺功能不全療效觀察[J];中國醫(yī)師雜志;2001年S1期

3 孫寧奮;肝素霧化吸入治療COPD的療效觀察[J];現代護理;2001年06期

4 王剛,王蕾,李廷謙;COPD免疫調節(jié)治療臨床試驗文獻評價[J];中國循證醫(yī)學雜志;2001年02期

5 高秀蘭,李莉;慢性阻塞性肺疾病與腦血管病的關系[J];醫(yī)師進修雜志;2003年06期

6 田紅;N-乙酰半胱氨酸治療COPD急性加重期的療效觀察[J];臨床醫(yī)學;2003年10期

7 周小青,霍震;COPD三角指數分析[J];四川醫(yī)學;2003年11期

8 王曾禮;抗膽堿藥——COPD的一線用藥[J];中國處方藥;2004年03期

9 張建全;慢性阻塞性肺疾病全球倡議——穩(wěn)定期COPD的治療[J];廣西醫(yī)學;2004年03期

10 王路巖;銀杏葉注射液對COPD急性加重期患者血流變的影響[J];山西職工醫(yī)學院學報;2004年01期

中國重要會議論文全文數據庫 前10條

1 尹燕;李久榮;康健;王秋月;;過氧化物酶體增殖物激活受體γ在COPD大鼠氣道慢性炎癥中的作用及其機制研究[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術會議）論文匯編[C];2011年

2 劉敏;;老年COPD患者使用干粉吸入器的相關因素分析研究[A];第14屆全國老年護理學術交流會議論文匯編[C];2011年

3 黎寶紅;董嘉怡;;中重度COPD患者中醫(yī)灸法、西醫(yī)聯合治療3例報道[A];廣東省針灸學會第十一次學術研討會論文匯編[C];2010年

4 林燕萍;俞綺虹;;哮喘與COPD重疊綜合癥[A];第五屆全國中西醫(yī)結合變態(tài)反應學術會議論文集[C];2011年

5 ;Toll-like receptors—novel potential targets for COPD treatment[A];2011年中國藥學大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

6 賀向紅;曹潔;陳寶元;;肺結核對COPD影響因素的研究[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術會議）論文匯編[C];2011年

7 趙明華;海迪婭·艾爾肯;孜比爾;韓克斯;馬巖霞;徐春蓮;;COPD患者短期住院干預治療療效分析[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術會議）論文匯編[C];2011年

8 馮宇;李慶云;劉嘉琳;萬歡英;;營養(yǎng)不良對COPD氣道炎癥的影響[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術會議）論文匯編[C];2011年

9 杜井波;;兩種不同強度的上下肢訓練對老年COPD的療效比較[A];中國康復醫(yī)學會運動療法分會第十一屆全國康復學術大會學術會議論文摘要匯編[C];2011年

10 李海軍;肖偉;;Th17細胞與T調節(jié)細胞在COPD中的平衡關系及意義研究[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術會議）論文匯編[C];2011年

中國重要報紙全文數據庫 前10條

1 北京朝陽醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學科副主任醫(yī)師 張鴻;[N];健康報;2009年

2 武漢大學中山醫(yī)院 教授 李定國;[N];醫(yī)藥經濟報;2009年

3 中華醫(yī)學會呼吸病學分會主任委員 王辰　青年委員會副主任委員 黃克武;[N];健康報;2011年

4 本報記者 應剛;[N];中國高新技術產業(yè)導報;2001年

5 朱國旺;[N];中國醫(yī)藥報;2003年

6 繼成 勞毛;[N];醫(yī)藥經濟報;2001年

7 本報特約撰稿人 陸志城;[N];醫(yī)藥經濟報;2003年

8 江波;[N];中國醫(yī)藥報;2002年

9 解放軍總醫(yī)院呼吸內科主任醫(yī)師 高德偉;[N];中國中醫(yī)藥報;2002年

10 徐述湘;[N];中國醫(yī)藥報;2004年

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 張一;尿激酶型纖溶酶原激活物系統(tǒng)成分在COPD病理改變中作用的研究[D];山東大學;2012年

2 崔江禹;適宜我國社區(qū)和基層應用的慢性阻塞性肺疾病病情初步判別方法研究[D];廣州醫(yī)學院;2010年

3 王靜;幽門螺桿菌感染與慢性阻塞性肺病（COPD）的關系探討[D];吉林大學;2011年

4 路雅茹;血小板衍生生長因子-BB與經皮冠狀動脈介入術后再狹窄的相關性研究[D];天津醫(yī)科大學;2012年

5 尉坤;KLF4在全反式維甲酸和PDGF調節(jié)SM22α表達中的作用及機制研究[D];河北醫(yī)科大學;2011年

6 劉潔瓊;PDGF-D在乳腺癌進展、轉移及化療藥物運輸中的作用和機制研究[D];中南大學;2011年

7 連重光;補氣健脾法治療COPD急性加重期的理論與臨床療效研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2012年

8 楊悅;內皮祖細胞在慢性阻塞性肺疾病中的變化和作用[D];中南大學;2010年

9 劉愛軍;法舒地爾對PDGF誘導的人肺動脈平滑肌細胞增殖的抑制作用及機制研究[D];北京協和醫(yī)學院;2011年

10 邵光;西洛司特干預慢性阻塞性肺疾病的系統(tǒng)評價[D];南方醫(yī)科大學;2011年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 海迪婭·艾爾肯;104例男性COPD患者辯證分型與骨密度相關性分析[D];新疆醫(yī)科大學;2010年

2 謝年華;COPD患者生存質量評價[D];華中科技大學;2009年

3 劉柳;慢性阻塞性肺疾病急性加重期對老年COPD患者T淋巴細胞免疫的影響及免疫干預觀察[D];廣西醫(yī)科大學;2010年

4 胡曉婷;新疆和田地區(qū)農村慢性阻塞性肺疾病的患病調查[D];新疆醫(yī)科大學;2010年

5 張鑫;昆明市居民慢性阻塞性肺疾病流行病學調查分析[D];昆明醫(yī)學院;2011年

6 王娟;中文版慢性阻塞性肺疾病篩查問卷在吸煙者中的初步檢驗與評價[D];中國協和醫(yī)科大學;2010年

7 李冠華;COPD傳導性氣道的改變及其對機械通氣的影響[D];天津醫(yī)科大學;2010年

8 張會娟;慢性阻塞性肺�。–OPD）合并肺結核的臨床特征[D];山東大學;2010年

9 王成;云南漢族老年人群β_2-AR基因多態(tài)性與COPD合并EH相關性的初步研究[D];昆明醫(yī)學院;2010年

10 房賓;64層螺旋CT評價COPD氣道壁厚度與肺功能的相關性研究[D];山西醫(yī)科大學;2010年

  本文關鍵詞：COPD大鼠氣道成纖維細胞轉染rHSG基因后觀察細胞增殖、凋亡及與TGF-β1、PDGF表達水平關系，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：182155