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急性肺損傷患者誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞系的建立

發(fā)布時(shí)間:2018-04-12 11:41

  本文選題:急性肺損傷 + 皮膚成纖維細(xì)胞 ; 參考:《南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2014年10期


【摘要】:目的利用急性肺損傷患者皮膚成纖維細(xì)胞構(gòu)建誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)系。方法采用慢病毒介導(dǎo)逆轉(zhuǎn)錄的方法,將含有Oct4、Sox2、Klf4和Nanog四個(gè)因子的混合慢病毒轉(zhuǎn)染人皮膚成纖維細(xì)胞,誘導(dǎo)出胚胎干細(xì)胞樣克隆。根據(jù)人胚胎干細(xì)胞的特性,利用AP染色、實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)技術(shù)、免疫熒光、畸胎瘤形成實(shí)驗(yàn)對(duì)獲得的iPS細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果獲得的iPS細(xì)胞鏡下觀察呈典型的ES樣克隆狀生長(zhǎng),圓形或橢圓形,與飼養(yǎng)層細(xì)胞分界清楚;AP染色陽(yáng)性,RT-PCR及免疫熒光檢測(cè)iPS細(xì)胞高表達(dá)人胚胎干細(xì)胞標(biāo)志性基因及蛋白,移植到免疫缺陷鼠體內(nèi)能夠形成向三胚層分化的畸胎瘤。結(jié)論成功建立了急性肺損傷患者iPS細(xì)胞系,可為急性肺損傷的發(fā)病機(jī)制研究和臨床藥物篩選提供良好的細(xì)胞模型。
[Abstract]:Objective To investigate the formation of induced pluripotent stem cells ( iPSCs ) by using slow virus mediated reverse transcription ( RT - PCR ) in human skin fibroblasts .

【作者單位】: 昆明醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院;昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院康復(fù)科;復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81400240) 上海市衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)科研課題(201440632)~~
【分類(lèi)號(hào)】:R563

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1739580

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