本文關(guān)鍵詞：探討香煙煙霧提取物導(dǎo)致鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞周期變化中TGF-β1的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《重慶醫(yī)科大學(xué)》 2015年

探討香煙煙霧提取物導(dǎo)致鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞周期變化中TGF-β1的作用

吳曉穎  

【摘要】：目的：觀(guān)察香煙煙霧提取物(Cigarette smoke extract, CSE)是否導(dǎo)致大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(Rat alveolar Type Ⅱ epithelial cell, RLE-6TN)細(xì)胞周期的改變以及在這其中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 (transforming growth factor-β1, TGF-β1)是否有發(fā)揮作用。方法：選用健康清潔級(jí)SD雄性大鼠8只(重量：180～220g),完全隨機(jī)平均分配為對(duì)照組、煙熏組,每組4只,給予煙熏組大鼠暴露于香煙煙霧中每天6小時(shí)連續(xù)3天,于第4天處死動(dòng)物后取肺組織,進(jìn)行石蠟包埋切片后,HE染色觀(guān)察結(jié)構(gòu)改變,免疫組化法測(cè)定CyclinD1的表達(dá)情況。體外培養(yǎng)的大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞,除對(duì)照組外,其余各組分別予0.25%、0.5%、1%濃度的CSE刺激48 h。TGF-β1受體抑制劑(SB431542)預(yù)處理細(xì)胞6 h,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)為對(duì)照組、1%CSE組、SB431542組、1%CSE+SB431542組,CSE刺激48 h。各組細(xì)胞于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h后收集細(xì)胞,分別采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期,ELISA、Western blot法測(cè)定TGF-β1、CyclinD1蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果：煙熏組大鼠肺組織發(fā)生形態(tài)學(xué)及病理學(xué)的改變,TGF-β1表達(dá)增加、CyclinD1表達(dá)抑制(與對(duì)照組比較)。CSE暴露干預(yù)細(xì)胞后,G1期細(xì)胞的比例呈濃度依賴(lài)性與時(shí)間依賴(lài)性的增高,同時(shí)TGF-β1表達(dá)增加、CyclinD1表達(dá)抑制(與空白對(duì)照組比較P0.05)。使用SB431542預(yù)處理細(xì)胞后,CSE干預(yù)細(xì)胞發(fā)現(xiàn)CyclinD1表達(dá)增加(與模型組比較P0.05)。結(jié)論：綜上所述,我們發(fā)現(xiàn)香煙煙霧可以誘導(dǎo)大鼠肺發(fā)生病理學(xué)改變,伴有TGF-β1、CyclinD1表達(dá)變化。CSE暴露誘導(dǎo)RLE-6TN發(fā)生細(xì)胞周期改變,G1期細(xì)胞比例增高,這一改變可能是通過(guò)TGF-β1/CyclinD1通路發(fā)揮作用,且TGF-β1發(fā)揮著重要作用。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R563
【目錄】：

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