發(fā)布時間：2018-04-06 07:31

  本文選題：miR-a-p　切入點：低氧誘導(dǎo)因子α　出處：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2015年09期

【摘要】：目的探討miR-199a-5p在常氧及低氧環(huán)境下的大鼠氣道平滑肌細(xì)胞(ASMC)中的表達(dá)以及miR-199a-5p對ASMC增殖的調(diào)控和低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)表達(dá)的影響。方法用貼壁法體外培養(yǎng)大鼠ASMC,在常氧及低氧條件下培養(yǎng)24 h,實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測ASMC中miR-199a-5p含量;人工合成大鼠miR-199a-5p的擬似物和抑制物,用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)入低氧培養(yǎng)的ASMC,qRT-PCR檢測miR-199a-5p及HIF-1αmRNA的表達(dá),Western blot法檢測HIF-1α蛋白的表達(dá),CCK-8法檢測ASMC的增殖情況。結(jié)果與常氧組相比,低氧處理促進(jìn)細(xì)胞增殖,低氧組HIF-1αmRNA及HIF-1α蛋白的相對水平顯著升高;低氧組miR-199a-5p的量較常氧組減少;轉(zhuǎn)染miR-199a-5p擬似物可以顯著減緩低氧條件下ASMC的增殖,而其抑制物可促進(jìn)低氧條件下的細(xì)胞增殖。擬似物組HIF-1α蛋白較對照組降低,抑制物組則升高,而低氧條件下各組HIF-1αmRNA水平無明顯差異。結(jié)論 miR-199a-5p能抑制低氧條件下ASMC的增殖和HIF-1α蛋白的表達(dá)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of miR-199a-5p in normoxia and hypoxia condition of rat airway smooth muscle cells (ASMC) in the expression and regulation of miR-199a-5p on the proliferation of ASMC and hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) was studied. Methods using adherent method in vitro cultured rat ASMC under normoxia and hypoxia cultured under 24 h, real time fluorescent quantitative PCR (qRT-PCR) to detect the content of miR-199a-5p in ASMC; analogue and synthetic inhibitor miR-199a-5p in rats, using liposome into hypoxia ASMC, miR-199a-5p and HIF-1 to detect the expression of qRT-PCR alpha mRNA, expression of Western blot was detected by HIF-1 protein and proliferation of ASMC CCK-8 detection method. Results compared with normoxia group, hypoxia can promote cell proliferation and relative levels of hypoxia group HIF-1 alpha mRNA and HIF-1 alpha protein was significantly increased; the amount of miR-199a-5p in hypoxia group compared with normoxia group decreased; transfection of miR-199a-5p analogues can significantly Slow under hypoxic conditions ASMC proliferation, and its inhibitor can promote cell proliferation under hypoxic conditions. Analogue of HIF-1 alpha protein group is lower than control group, inhibitor group was increased, while no significant difference under hypoxic conditions were HIF-1 alpha level of mRNA. Conclusion: miR-199a-5p can inhibit the expression of HIF-1 protein and proliferation of alpha ASMC hypoxia a.

【作者單位】： 徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【分類號】：R562.25

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1718573