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過(guò)敏性哮喘氣道炎性細(xì)胞浸潤(rùn)與IL-10及IL-17水平變化的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-03-29 02:19

  本文選題:過(guò)敏性哮喘 切入點(diǎn):IL-10 出處:《鄭州大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:研究背景與目的過(guò)敏性哮喘在近幾年發(fā)病率有增高趨勢(shì)。研究顯示,過(guò)敏性哮喘是由多種細(xì)胞及細(xì)胞因子參與的一種頑固性慢性呼吸道疾病,以氣道高反應(yīng)性和氣道重構(gòu)為主要特征,氣道炎癥是過(guò)敏性哮喘的基本病理改變。氣道炎癥表現(xiàn)為炎性細(xì)胞在氣道浸潤(rùn)聚集,炎性細(xì)胞包括淋巴細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及巨噬細(xì)胞等,此外還有多種細(xì)胞因子及炎性介質(zhì)。大量文獻(xiàn)表明免疫細(xì)胞及其產(chǎn)生的細(xì)胞因子在哮喘的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮著重要作用,其中以CD4+T細(xì)胞亞群(Th1、Th2、Th17和調(diào)節(jié)性CD4+T細(xì)胞)比例的改變和IL-5、IL-10、IL-17等細(xì)胞因子的變化尤為突出。IL-10通過(guò)對(duì)炎癥細(xì)胞活化、增殖和細(xì)胞因子分泌的直接抑制作用,抑制T細(xì)胞應(yīng)答和特異性IgE分泌,而抑制氣道炎癥,最終起到抑制過(guò)敏性哮喘的作用。Th17的主要作用與炎癥相關(guān),Th17通過(guò)分泌炎癥性細(xì)胞因子IL-17而發(fā)揮作用。IL-17引起中性粒細(xì)胞的聚集和集落刺激因子的分泌,又可以促進(jìn)生成粒細(xì)胞,與一些自身免疫性疾病及炎癥反應(yīng)的發(fā)作與其有密切關(guān)系。近年來(lái)一個(gè)研究熱點(diǎn)的是Th17細(xì)胞及IL-17因子與慢性炎癥疾病及自身免疫性疾病的關(guān)系。研究表明,中性粒細(xì)胞數(shù)量及血清IL-17水平與過(guò)敏性哮喘患者及重癥患者的炎癥嚴(yán)重程度成正相關(guān),可能患者的氣道高反應(yīng)也與之有關(guān)。臨床上使用糖皮質(zhì)激素治療時(shí)可以明顯減輕患者的氣道炎癥。IL-17導(dǎo)致氣道局部炎癥持久存在或范圍擴(kuò)大是過(guò)敏性哮喘的發(fā)病機(jī)制中的關(guān)鍵因素。為進(jìn)一步探討過(guò)敏性哮喘氣道炎性細(xì)胞浸潤(rùn)與疾病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,本課題以臨床過(guò)敏性哮喘患者為研究對(duì)象,收集肺泡灌洗液(BALF)并對(duì)其進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類(lèi),使用流式細(xì)胞儀對(duì)外周血中單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)的Th1、Th2及Th17細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),使用酶聯(lián)免疫和熒光定量PCR對(duì)外周血中的IL-10及IL-17水平和PBMC中的IL-10 mRNA以及IL-17 mRNA水平進(jìn)行檢測(cè)。研究過(guò)敏性哮喘患者氣道炎性細(xì)胞浸潤(rùn)后IL-10及IL-17的變化,為過(guò)敏性哮喘臨床的診斷治療提供依據(jù)。方法1.研究對(duì)象:分為兩組。哮喘組哮喘組為記錄完整的未經(jīng)過(guò)規(guī)范化治療的30例過(guò)敏性哮喘患者,對(duì)照組為年齡相仿的正常健康志愿者30例。2.肺泡灌洗液中炎癥細(xì)胞檢測(cè):收集肺泡灌洗液,離心,取沉渣進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞分類(lèi)。3.肺泡灌洗液上清IgE水平檢測(cè):收集肺泡灌洗液,離心,取上請(qǐng),使用ELISA法檢測(cè)IgE水平。4.血清IL-10、IL-17水平檢測(cè):抽取外周血,分離血清,使用ELISA法對(duì)IL-10及IL-17水平進(jìn)行測(cè)定。5.外周血PBMC中的IL-10及IL-17 mRNA檢測(cè):抽取外周血,分離單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),提取RNA,使用PCR熒光定量對(duì)IL-10及IL-17 mRNA進(jìn)行測(cè)定。6.外周血PBMC Th1、Th2及Th17細(xì)胞亞群測(cè)定:使用流式細(xì)胞儀分析外周血PBMC中的Th1、Th2及Th17細(xì)胞亞群。結(jié)果1.哮喘組BALF中細(xì)胞總數(shù)46.45±4.07較對(duì)照組0.95±0.89多,淋巴細(xì)胞百分比(78.05±4.39)%明顯高于對(duì)照組(0.20±0.52)%,嗜酸性粒細(xì)胞百分比(19.75±3.20)%明顯高于對(duì)照組(0.10±0.22)%,且兩組之間都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.哮喘組BALF中IgE水平7.56±2.01明顯高于對(duì)照組2.68±1.32,兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.哮喘組血清IL-10水平8.64±0.98與對(duì)照組25.05±1.29相比有所下降,而哮喘組血清IL-17水平7.67±2.35顯著高于與對(duì)照組2.97±1.40。哮喘組外周血PBMC中的IL-10 mRNA水平0.384±0.459與對(duì)照組0.876±0.512相比有所下降,哮喘組外周血PBMC中的IL-17 mRNA水平0.674±0.481顯著升高與對(duì)照組0.289±0.265,哮喘組與對(duì)照組相比都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.哮喘組外周血PBMC中的CD4+IL-4+細(xì)胞水平10.79±2.16與對(duì)照組4.11±1.03相比明顯升高,同時(shí)CD4+IL-17A+細(xì)胞水平3.94±0.59與對(duì)照組1.13±0.59相比明顯升高,而CD4+IFN-γ+細(xì)胞水平2.68±1.32與對(duì)照組13.57±3.56比較明顯的降低,兩者相比都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論過(guò)敏性哮喘氣道炎性細(xì)胞浸潤(rùn)伴隨肺泡灌洗液炎性細(xì)胞增加、IgE水平增高和Th2、Th17細(xì)胞增加,因此,IL-10和IL-17是檢測(cè)過(guò)敏性哮喘疾病進(jìn)展的指標(biāo),并與氣道炎癥的發(fā)生機(jī)制相關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R562.25
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本文編號(hào):1679123

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