HCMV急性間質(zhì)性肺炎小鼠模型的建立
本文選題:人巨細(xì)胞病毒 切入點(diǎn):小鼠模型 出處:《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2014年09期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的建立人巨細(xì)胞病毒(HCMV)急性間質(zhì)性肺炎的小鼠模型。方法用5.5×105PFU的HCMV AD169株尾靜脈注射6~8周SPF級(jí)BALB/c小鼠作為實(shí)驗(yàn)組,同時(shí)設(shè)立正常細(xì)胞作為對(duì)照組,分別于接種后第5天和第30天處死小鼠,無菌取小鼠肺組織,通過病毒分離、PCR檢測病毒特定保守基因、免疫組化、Western blot和HE染色的方法,觀察檢測小鼠肺組織中HCMV及其組織病理變化。結(jié)果在感染后第5天和第30天實(shí)驗(yàn)組小鼠的肺組織中分離出了HCMV病毒;PCR檢測到HCMV特異性早晚期基因IE和UL55DNA;Western blot、免疫組化檢測到HCMV特異性早晚期蛋白IE和gB;HE染色證實(shí)肺組織有明顯急性間質(zhì)性肺炎的病理改變;對(duì)照組對(duì)應(yīng)結(jié)果全為陰性。結(jié)論通過尾靜脈注射HCMV AD169株病毒,在感染后第5天成功構(gòu)建了HCMV急性間質(zhì)性肺炎小鼠模型,該模型的建立有利于該種疾病的發(fā)病機(jī)制研究及相關(guān)抗病毒疫苗和藥物的研發(fā)。
[Abstract]:Objective to establish a mouse model of acute interstitial pneumonia of human cytomegalovirus (HCMV). Methods SPF grade BALB/c mice with 5.5 脳 105 PFU HCMV AD169 strain were injected by tail vein for 68 weeks as experimental group, and normal cells were set up as control group. The mice were killed on the 5th and 30th day after inoculation. The lung tissues of the mice were collected aseptically. The specific conserved genes of the virus were detected by virus isolation and PCR, and the immunohistochemical staining was performed by Western blot and HE staining. HCMV and its histopathological changes in lung tissue of mice were observed. Results HCMV virus was isolated from lung tissue of experimental group on the 5th and 30th day after infection. HCMV specific genes IE and UL55 DNA were detected in the early and late stage of the mice, and the immunized group was immunized. The pathological changes of lung tissue in acute interstitial pneumonia were confirmed by HCMV specific early and late stage protein IE and HE staining. Conclusion the mouse model of HCMV acute interstitial pneumonia was successfully established by injecting HCMV AD169 virus into tail vein on the 5th day after infection. The establishment of the model is conducive to the pathogenesis of the disease and the development of related antiviral vaccines and drugs.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)微生物學(xué)教研室;哥倫比亞大學(xué)病理與細(xì)胞生物學(xué)教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(編號(hào):30872253) 安徽省科技廳科技攻關(guān)項(xiàng)目(編號(hào):8010302179) 安徽省教育廳自然科學(xué)重點(diǎn)課題(編號(hào):KJ2009A041Z)
【分類號(hào)】:R563.1;R-332
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本文編號(hào):1600067
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