本文關鍵詞： 肺栓塞 內皮素-1 金屬基質蛋白酶-9 尿激酶　出處：《山東大學》2014年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：研究背景 肺血栓栓塞癥(PTE)是內源性或外源性血栓栓子堵塞肺動脈所引起肺循環(huán)障礙的臨床和病理生理綜合征。PTE發(fā)病率、病死率和致殘率高,是繼惡性腫瘤、心肌梗死之后第三大死亡原因和婦女產后首位死亡原因,已成為國際性醫(yī)療保健問題。據(jù)文獻報道,未治療的肺栓塞死亡率高達30%,且其PTE漏誤診率極高,歐美國家高達70%,國內則約在90%左右。由于大部分患者得不到及時治療,急性肺血栓栓塞后大多數(shù)患者在解剖、血流動力學方面不能完全恢復正常,另有少數(shù)患者發(fā)展為預后不良的慢性血栓栓塞性肺動脈高壓(CTEPH)。上述情況均伴有肺血管重構,即小的肌型肺動脈中膜增厚和／或非肌型動脈肌型化；其機制主要是在細胞因子作用下,血管平滑肌細胞(SMC)遷移至肺動脈內膜并增殖所致。低分子肝素(LMWH)和尿激酶(UK)均具有抗SMC增殖作用,目前關于LMWH和UK對急性PTE后肺動脈內膜增生作用機制的研究極少。 目的 1.觀察急性肺栓塞后內皮素-1、基質金屬蛋白酶-9的變化及不同表達,探討它們對肺動脈內膜增生的影響機制,并研究其與PTE程度和抗凝溶栓治療的相關性。 2.觀察LMWH和UK在急性肺血栓栓塞癥后肺動脈新生內膜形成中的作用機制,并進行對比性研究。 方法 1.雄性SD大鼠124只,隨機分為假手術組(Sham組)、肺栓塞組(PTE組)、尿激酶組組(UK組)和低分子肝素組(LMWH組)各30只。制作急性肺栓塞模型過程中死亡4只。鼠尾靜脈取血,制備自體血栓；頸靜脈插管注入自體血栓栓子制成急性PTE模型。Sham組注入等量生理鹽水作對照。LMWH組于PTE模型制成后開始皮下注射LMWH(速碧林,0.01ml/Kg),Q12h,連續(xù)7天。UK組于模型制成后開始靜脈滴注尿激酶(20000IU/Kg),繼以LMWH(速碧林,0.01ml/Kg)皮下注射,Q12h,至7天。Sham組及PTE組皮下注射等量生理鹽水,時間同LMWH組。每組分別于栓塞后2h、4h、6h、第1、4、7天各處死5只。 2.右心導管法測定肺動脈平均壓(mPAP),右心室壓力(RVP)。 3.右頸動脈插管取血分別進行血氣分析、ET-1、MMP-9水平的測定。 4.肺組織切片HE染色觀察PTE后肺組織病理學特點及肺動脈內膜增生情況。 5.采用免疫組織化學方法檢測ET-1、MMP-9表達。 6. Western blot方法檢測肺組織MMP-9的表達。 結果 1.共94只大鼠注入栓子,術后1小時內死亡3只,術后2小時內死亡1只,2小時后無死亡。所有大鼠注入栓子后均出現(xiàn)呼吸急促、紫紺、心率加快。制成急性PTE模型共90只,成功率95.7%。 2.栓塞后PTE、LMWH及UK組mPAP均明顯升高。PTE組h2、h4、h6、d1、d4時間點mPAP均升高,與Sham組比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。LMWH組h2、h4、h6、d1時間點mPAP與Sham組比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)；與PTE組比較d4時間點差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。UK組mPAP h2、h4、h6與Sham組比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)；與PTE組比較h6、d1、d4有統(tǒng)計學意義(p0.05)；與LMWH組比較h6、d1差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。 3.栓塞后PTE、LMWH及UK組RVP均明顯升高。PTE、LMWH組h2、h4、h6、d1時間點RVP均升高與Sham組比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。UK組RVP h2與Sham組比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)；UK組與PTE組、LMWH組比較,h6、d1時間點RVP差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。 4.PTE組所有時間點Pa02均降低與Sham組比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。LMWH組h2、h4、h6、d1、d4PaO2降低與sham組比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)；與PTE組比較d4、d,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。UK組PaO2h2、 h4、h6、d1與Sham組比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)；與PTE組比較h6、d1、d4、d,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)；與LMWH組比較h6、d1、d4差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。四組各時間點PaC02比較差異均無統(tǒng)計學意義。 5.栓塞后PTE、LMWH及UK組ET-1值均明顯升高。PTE、LMWH組h2、h4、h6時間點ET-1值升高與Sham組比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。LMWH組在d4、d,ET-1值明顯降低與Sham組比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。UK組h2、h4、h6ET-1值升高與Sham組比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)；與PTE組比較h4、h6、d,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)；與LMWH組比較h4、h。差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。 6.栓塞后PTE、LMWH及UK組MMP-9值均明顯升高。PTE組所有時間點MMP-9值與Sham組均有統(tǒng)計學意義(p0.05)。LMWH、UK組h2、h4、h6、d1MMP-9值與Sham組比較差異均有統(tǒng)計學意義(p0.05)。LMWH組與PTE組比較d4、d7MMP-9值差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。UK組與PTE組比較d1、d4、d7MMP-9值差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。 7.免疫組化結果顯示：ET-1主要由肺血管內皮細胞、平滑肌細胞、新生內膜中平滑肌細胞、肺泡和支氣管上皮細胞等表達。PTE組ET-1呈強陽性表達,LMWH組和UK組均表達弱陽性。MMP-9主要由肺血管內皮細胞、平滑肌細胞、新生內膜中平滑肌細胞及浸潤的單核-巨噬細胞表達。栓塞后PTE組MMP-9呈強陽性表達,LMWH組和UK組均呈弱陽性表達。 8. Western blot結果顯示：PTE、LMWH及UK組MMP-9蛋白表達較Sham組均增高。PTE組MMP-9蛋白表達量明顯增高(p0.05). LMWH和UK兩組MMP-9蛋白表達量較PTE組降低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05),但較Sham組仍高。 結論 1.經頸靜脈注入自體血栓可制成理想的大鼠急性肺栓塞模型。 2.大鼠急性PTE后第4天即出現(xiàn)肺動脈內膜增生；肺動脈壁炎性細胞浸潤,中膜平滑肌細胞向內膜遷移、增生是急性PTE后肺動脈內膜增生的主要機制；ET-1、MMP-9在大鼠急性PTE后肺動脈內膜增生、肺血管重構過程中起著重要作用。 3. LMWH和UK可以減輕大鼠急性PTE后肺動脈內膜增生；還可以降低ET-1、MMP-9血漿中的水平及其在肺動脈中的蛋白合成；UK與LMWH比較,可以更加迅速地緩解呼吸困難、糾正低氧血癥、降低肺動脈壓力、使栓塞的血管再通。 4.急性PTE后肺動脈內膜增生情況比預想要嚴重的多,這必將影響患者的預后,因此進一步研究急性PTE將對減少CTEPH的發(fā)生有至關重要的意義。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R563.5

【參考文獻】

相關期刊論文 前5條

1 許俊堂,袁訓芝,黃永麟,田野,孟繁超,楊志潔,徐云松;實驗性急性肺栓塞及溶栓療法與動脈血漿內皮素水平變化[J];哈爾濱醫(yī)科大學學報;1998年01期

2 季穎群,關宏偉,谷玲,李敬,張延軍,張學武,徐岳紅,譚園園,張中和;實驗性肺血栓栓塞癥后血栓形成及其意義[J];中華結核和呼吸雜志;2001年12期

3 夏書月,王實,王洪霞,何曉琳,馮學威,高鴻美;急性肺血栓栓塞癥患者血和尿中內皮素1水平的變化[J];中華結核和呼吸雜志;2002年05期

4 李曉光,劉雅君,王樂民,魏林;急性肺栓塞的動物實驗研究[J];中華心血管病雜志;2001年05期

5 陸慰萱,劉春萍;深靜脈血栓形成和肺血栓栓塞癥的自然病程[J];中華醫(yī)學雜志;2003年01期

，

本文編號：1551660