早期矽肺損傷的蛋白質(zhì)組學研究及α晶狀體球蛋白B的表達與驗證
本文關(guān)鍵詞:早期矽肺損傷的蛋白質(zhì)組學研究及α晶狀體球蛋白B的表達與驗證 出處:《中南大學學報(醫(yī)學版)》2015年08期 論文類型:期刊論文
更多相關(guān)文章: 矽肺 蛋白質(zhì)組學 α晶狀體球蛋白B 二維凝膠電泳 基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜
【摘要】:目的:建立二氧化硅誘導早期肺損傷大鼠肺組織的二維凝膠電泳圖譜,篩選在此過程中起關(guān)鍵作用的靶蛋白分子并進行驗證。方法:制作二氧化硅誘導大鼠早期肺損傷模型(實驗組),通過HE染色觀察肺部形態(tài)變化,用雙向凝膠電泳法建立二維凝膠圖譜,用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)分析鑒定差異表達蛋白分子,用Western印跡驗證差異表達蛋白分子在肺組織中的表達。結(jié)果:成功制作二氧化硅早期肺損傷模型,建立實驗組及對照組肺組織二維凝膠電泳圖譜,二者蛋白表達及分布存在差異,發(fā)現(xiàn)差異點40個,選取重復性好,在凝膠上位置和表達適中的共20個進行MALDI-TOF-MS鑒定及數(shù)據(jù)庫搜索并篩選,鑒定出差異蛋白13種,包括α晶狀體球蛋白B、間隙蛋白I、肥大細胞蛋白酶等,進一步用Western印跡證實實驗組α晶狀體球蛋白B表達明顯增加,與蛋白質(zhì)組學結(jié)果一致。結(jié)論:α晶狀體球蛋白B在早期矽肺組織中表達明顯升高,提示其可能在矽肺的發(fā)生發(fā)展中起關(guān)鍵作用。
[Abstract]:Objective: to establish a two-dimensional gel electrophoresis map of lung tissue in rats with early lung injury induced by silica. Methods: early lung injury model of rats induced by silica was made. (experimental group, HE staining was used to observe the changes of lung morphology. Two-dimensional gel map was established by two-dimensional gel electrophoresis. Differential expressed protein was identified by matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS). Expression of differentially expressed protein molecules in lung tissue was verified by Western blotting. Results: early lung injury model of silica was successfully made and two-dimensional gel electrophoresis patterns of lung tissue of experimental group and control group were established. There were differences in protein expression and distribution between the two groups, 40 of them were found to be different, and the selection was reproducible. A total of 20 proteins with moderate position and expression on the gel were identified by MALDI-TOF-MS identification and database search. 13 differential proteins including 偽 -lens globulin B and interstitial protein I were identified. The expression of 偽 -lens globulin B in experimental group was further increased by Western blotting. Conclusion: the expression of 偽 -lens globulin B is significantly increased in early silicosis tissues, suggesting that 偽 -lens globulin B may play a key role in the occurrence and development of silicosis.
【作者單位】: 中南大學湘雅三醫(yī)院病理科;中南大學湘雅三醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;中南大學湘雅醫(yī)院病理科;
【基金】:國家自然科學基金(30170399) 湖南省自然科學基金青年基金(12JJ4079)~~
【分類號】:R135.2
【正文快照】: Methods:Th e animal models of silicosis were established and morphology changes were observedby HE staining,and then the key protein biomarkers in silicosis were identifi ed by 2-DE and matrix-第一作者(First author):初令,Email:catsnow88@126.comassisted l
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,本文編號:1434175
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