本文關(guān)鍵詞：白介素-23和白介素-21在支氣管哮喘氣道炎癥中的作用研究　出處：《華中科技大學(xué)》2015年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：第一部分支氣管哮喘小鼠模型的建立以及不同激發(fā)方式對氣道炎癥的影響 目的：探討滴鼻和霧化兩種不同代表性激發(fā)方式對小鼠支氣管哮喘模型氣道炎癥的影響,為研究和優(yōu)化支氣管哮喘動(dòng)物模型提供理論依據(jù)。 方法：選擇6-8周齡雌性BALB/c小鼠采用雞卵清蛋白(OVA)進(jìn)行致敏,分別采用滴鼻和霧化兩種不同方式進(jìn)行激發(fā),復(fù)制哮喘模型,觀察支氣管肺泡灌洗液(BALF)中白細(xì)胞總數(shù)和細(xì)胞分類計(jì)數(shù),采用ELISA方法檢測BALF上清中IL-4、IL-13含量,常規(guī)病理切片HE染色觀察肺內(nèi)炎癥情況。 結(jié)果：滴鼻組小鼠BALF中白細(xì)胞總數(shù)最高,其次為霧化組小鼠；且滴鼻組小鼠嗜酸性粒細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞總數(shù)亦明顯高于霧化組與正常組,差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。滴鼻組小鼠BALF中IL-4、IL-13水平明顯高于霧化組與正常組小鼠,差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；霧化組小鼠BALF中IL-4、IL-13水平高于正常組小鼠,差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。滴鼻組肺組織炎癥最明顯,可見上皮細(xì)胞破壞,杯狀細(xì)胞增生,支氣管和血管周圍有大量炎癥細(xì)胞浸潤,以嗜酸性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞為主。霧化吸入組炎癥程度較輕,正常對照組無明顯炎癥改變。 結(jié)論：霧化吸入和經(jīng)鼻滴入的激發(fā)方式都可以成功制作出支氣管哮喘模型,經(jīng)鼻滴入方式可以引起肺部更加明顯的炎癥浸潤及細(xì)胞因子表達(dá),為哮喘研究提供更好的選擇。 第二部分.阻斷IL-23通路通過降低Tc17細(xì)胞浸潤改善支氣管哮喘小鼠肺部炎癥 目的：Tc17細(xì)胞是產(chǎn)生IL-17的CD8+T細(xì)胞,并被發(fā)現(xiàn)參與過敏性哮喘的發(fā)病。IL-23通過調(diào)控Th17細(xì)胞參與IL-17相關(guān)炎癥反應(yīng)。本部分研究探討IL-23是否對Tc17細(xì)胞也有免疫調(diào)控作用。 方法：6-8周齡雌性BALB/c小鼠根據(jù)致敏/激發(fā)/干預(yù)的不同分為4組：1)陰性對照組,2)哮喘組,3)IL-23中和抗體干預(yù)組,4)同型對照抗體干預(yù)組。IL-23中和抗體和同型對照抗體在激發(fā)前氣道內(nèi)給予。氣道反應(yīng)性通過FlexiVent、鼠肺功能儀測定。觀察支氣管肺泡灌洗液中白細(xì)胞總數(shù)和分類計(jì)數(shù),肺組織炎癥和粘液分泌分別通過HE染色和PAS染色進(jìn)行觀察。制作肺組織單細(xì)胞懸液,用流式細(xì)胞術(shù)檢測Tc17/Th17細(xì)胞浸潤,ELISA方法檢測肺組織勻漿IL-17水平。 結(jié)果：IL-23中和抗體干預(yù)后降低了哮喘小鼠氣道高反應(yīng)性、BALF中白細(xì)胞總數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞。IL-23抗體干預(yù)也降低了肺組織Thl7和Tc17細(xì)胞浸潤比例以及IL-17水平。 結(jié)論：作為IL-23/Th17細(xì)胞軸的補(bǔ)充,IL-23/Tc17細(xì)胞軸也參與支氣管哮喘的發(fā)病。 第三部分IL-21對支氣管哮喘氣道炎癥的影響研究 目的：細(xì)胞因子,尤其是Th2型細(xì)胞因IL-5和IL-13已經(jīng)證實(shí)在支氣管哮喘發(fā)病中起重要作用。IL-21對免疫系統(tǒng)有重要作用,但在過敏性疾病發(fā)展中的作用目前研究中尚有不一致之處。本部分研究以在體干預(yù)方式探討IL-21對支氣管哮喘氣道炎癥的影響。 方法：使用卵清蛋白OVA誘導(dǎo)的小鼠支氣管哮喘模型,通過ELISA方法檢測其肺泡灌洗液(BALF)中IL-21濃度。比較正常對照組、哮喘組及IL-21干預(yù)組之間的BALF細(xì)胞學(xué)、肺組織病理學(xué)及血漿IgE水平。OVA誘導(dǎo)的過敏性鼻炎及IL-21干預(yù)作為陽性對照,比較IL-21對嗜酸性粒細(xì)胞鼻粘膜浸潤的影響。 結(jié)果：哮喘組小鼠BALF中IL-21濃度低于正常對照組。哮喘組和IL-21干預(yù)組在BALF細(xì)胞學(xué)、肺組織病理學(xué)和血漿IgE水平上未見顯著差異。作為陽性對照的過敏性鼻炎組經(jīng)IL-21干預(yù)后鼻粘膜嗜酸性粒細(xì)胞浸潤減少。 結(jié)論：外源性單獨(dú)給予IL-21可能對過敏性肺部炎癥無改善作用。
[Abstract]:The establishment of the first part of the mouse model of bronchial asthma and the effect of different excitation methods on airway inflammation
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R562.25

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本文編號(hào)：1340323