本文關鍵詞：富氧全氟化碳乳劑對油酸誘導家兔急性呼吸窘迫綜合征的保護作用研究

  更多相關文章： 全氟化碳 二棕櫚酸卵磷脂 急性呼吸窘迫綜合征 油酸 細胞毒性 復氧

【摘要】：重大自然災害、重大礦難、高樓火災等災難事故以及社會安全事件等突發(fā)公共事件頻發(fā),均造成大面積的重大人員傷亡。據相關統(tǒng)計,第一死亡高峰約在1h之內,這段時間死亡的數量占死亡的50%,多由于嚴重創(chuàng)傷直接導致死亡;而第二死亡高峰大約在傷后2-4h之內,這部分傷者主要是由于休克、低氧血癥而導致死亡。根據報道急性呼吸窘迫綜合征(Acute respiratory distress syndrome,ARDS)是導致戰(zhàn)傷死亡的主要原因之一,同時也是和平時期危重癥患者死亡的主要原因之一。因此,低氧血癥是突發(fā)事件中易導致死亡的主要原因,但現(xiàn)有的急救產品存在攜帶不便、見效慢的缺點,最終導致第一時間內現(xiàn)場死亡人數最多。因此,在研制快速、高效、便攜式急救藥品是突發(fā)事件創(chuàng)傷緊急救治的重要物資基礎與保障,不僅具有廣闊的應用前景,而且具有重要的社會意義。全氟化碳(Perfluorocarbon,PFC)具有良好的溶解非極性氣體的功能,可以作為氧氣和二氧化碳的運載體,而二棕櫚酸卵磷脂(Dipalmitoylphosphatidylcholine,DPPC)是肺表面活性物質(Pulmonary surfactant,PS)的主要成分,既可修飾PFC制成全氟化碳乳劑(Perfluorocarbon emulsion),又能夠提供肺表面活性物質起到改善肺順應性的作用。PFC乳劑具有改善低氧血癥的條件:(1)PFC具有易溶解大量氧氣和快速釋放的能力;(2)PFC和人工肺表面活性物質都具有改善肺順應性的能力。此外,目前已有文獻報道PFC具有抑制炎癥反應作用。所以我們設想:(1)霧化吸入PFC乳劑可迅速提供大量的氧氣,起到改善低氧血癥的作用。(2)PFC和人工肺表面活性物質改善肺順應性,達到間接改善低氧血癥的目的。第一部分富氧全氟化碳乳劑對HCT116細胞的毒性及復氧研究目的探討富氧全氟化碳乳劑的體外細胞毒性以及對缺氧HCT116細胞的供氧能力。方法通過體外培養(yǎng)HCT116細胞后加入含不同濃度(0、0.03、0.06、0.12、0.25、0.5mg/ml)全氟化碳乳劑的培養(yǎng)基分別共孵育培養(yǎng)4、8、12小時,采用CCK-8法測定細胞增殖率,進而分析細胞毒性。將HCT116細胞分為正常對照組(始終在正常培養(yǎng)基和正常氧濃度下培養(yǎng))、缺氧4h組和缺氧8h組,采用液體石蠟制造缺氧模型,加入含不同濃度(0、0.05、0.1、0.2mg/ml)全氟化碳乳劑的培養(yǎng)基復氧2h,也采用CCK-8法測定細胞增殖率。HCT116細胞缺氧處理12小時后(正常對照組除外),加入正常培養(yǎng)基及含有不同濃度(0、0.05、0.1、0.2mg/ml)全氟化碳乳劑的培養(yǎng)基復氧2小時,采用熒光顯微鏡檢測DCF熒光,從而分析該乳劑的供氧能力。結果關于細胞毒性研究,HCT116細胞與依次濃度梯度的全氟化碳乳劑共孵育4小時后,可見細胞增殖率都有一定提高(104%、105%、102%、104%、101%);與依次濃度梯度的全氟化碳乳劑共孵育8小時后,可見0.25、0.5mg/ml的濃度下細胞增殖率有稍下降(98%、97%),其余都有一定提高;與依次濃度梯度的全氟化碳乳劑共孵育12小時后,可見0.5mg/ml的濃度下細胞增殖率有一定下降(91%),但仍高于90%。關于細胞復氧研究,在HCT116細胞缺氧處理后,相比正常對照組,細胞增殖率明顯下降(88%、76%),并且缺氧8小時組較缺氧4小時組下降更明顯。當采用含全氟化碳乳劑的培養(yǎng)基復氧處理后,相比正常培養(yǎng)基復氧的對照組,細胞增殖率有明顯提高,都是隨著全氟化碳乳劑濃度的升高,細胞增殖率也逐漸升高。其中,缺氧4小時處理的細胞,其細胞增殖率從88%上升到99%,并且0.1mg/ml濃度較0mg/ml濃度的細胞增殖率差異具有統(tǒng)計學意義;缺氧8小時的細胞,其細胞增殖率從76%上升至92%,并且0.2mg/ml濃度較0mg/ml濃度的細胞增殖率差異具有統(tǒng)計學意義。使用DCFH-DA探針檢測HCT116細胞缺氧復氧后產生的活性氧的含量。正常培養(yǎng)組未見明顯DCF熒光,經過缺氧處理12小時可見一定的DCF綠色熒光。同時,在缺氧處理12小時后給予全氟化碳乳劑復氧處理后,可見DCF熒光較前進一步增強,并且隨全氟化碳乳劑濃度的增加,DCF熒光強度也逐漸提高,提示細胞內的活性氧含量逐漸升高。結論富氧全氟化碳乳劑對HCT116細胞無明顯細胞毒性,并且該乳劑中所攜帶的氧氣能夠釋放供缺氧HCT116細胞攝取利用。第二部分富氧全氟化碳乳劑對油酸誘導家兔急性呼吸窘迫綜合征的保護作用目的探討富氧全氟化碳乳劑對油酸誘導家兔急性呼吸窘迫綜合征的供氧情況。方法18只家兔麻醉后,隨機分為3組,每組6只,BC組為對照組,只行PE-50聚乙烯導管插入右股動靜脈操作,不行其余任何干預;OA組為油酸組,在造模成功后霧化吸入生理鹽水15min;OE組為油酸+乳劑組,在造模成功后霧化吸入富氧全氟化碳乳劑15min。OA組和OE組均從耳緣靜脈注入油酸0.1ml/kg建立ARDS模型,BC組注入等量生理鹽水。觀察和記錄基線、成模、霧化吸入后0、5、15、30、60、120、240、360min時的一般情況、呼吸頻率、血氧分壓、血清和肺灌洗液中TNF-α、IL-1β、IL-10濃度,同時,計算Smith肺損傷評分、肺系數、肺通透指數、并觀察肺組織光鏡。結果觀察一般情況,家兔注射油酸后出現(xiàn)RR加快、嘴唇發(fā)紺、躁動等缺氧癥狀,油酸組肺大體標可見肺表面片狀出血和壞死,且伴有明顯的水腫,同時切面和氣管內可見粉紅色泡沫狀液體流出;油酸+乳劑組肺表面可見點狀出血和壞死灶,橫切面和氣管內可見少量粉紅色泡沫狀液體流出。當ARDS造模成功時,與對照組(53.0±11.2次/分)比較,油酸組和油酸+乳劑組呼吸頻率(108.7±24.1次/分、106.3±30.1次/分)明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。當ARDS造模成功時,與對照組(113.5±7.4mm Hg)比較,油酸組和油酸+乳劑組PO2(58.2±3.2mm Hg、60.2±2.5mm Hg)明顯降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。在霧化吸入全氟化碳乳劑后0min,油酸+乳劑組PO2較前上升(67.2±11.8mm Hg),但油酸組較前下降(53.3±6.0mm Hg),差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.035)。在霧化吸入全氟化碳乳劑后360min,與油酸組(66.2±15.2mm Hg)比較,油酸+乳劑組PO2(92.2±23.1mm Hg)明顯較高,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.044)。與對照組(0.6±0.4)比較,油酸組和油酸+乳劑組Smith評分(10.7±0.8、9.3±1.0)明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);與油酸組(10.7±0.8)比較,油酸+乳劑組Simth評分(9.3±1.0)較低,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.026)。與對照組(0.5±0.1)比較,油酸組和油酸+乳劑組的肺系數(1.2±0.2、1.0±0.1)明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);油酸組肺系數(1.2±0.2)比油酸+乳劑組(1.0±0.1)高,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.033)。與對照組(2.9±0.3)比較,油酸組和油酸+乳劑組的肺通透系數(3.5±0.4、3.9±0.5)明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。給藥后360min時,與對照組(32.7±7.4 pg/ml)比較,油酸組、油酸+乳劑組血清TNF-α濃度(48.5±13.9 pg/ml、54.9±10.1 pg/ml)明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與對照組比較,油酸組、油酸+乳劑組肺灌洗液中TNF-α、IL-1β、IL-10濃度明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。肺光鏡可見,對照組為正常肺組織表現(xiàn),油酸組與之比較肺泡內可見大量淡粉色水腫液,肺泡中可見大量炎癥細胞,血管及肺泡中可見大量淤血,部分肺泡萎縮或消失。經全氟化碳乳劑處理后與之比較,油酸+乳劑組可見各方面肺損傷較油酸組明顯減輕。結論富氧全氟化碳乳劑能夠提高油酸致家兔ARDS模型的血氧分壓和減輕肺組織的損傷程度,但不能抑制炎性因子的釋放,有待進一步研究富氧全氟化碳乳劑的作用機制和有效成分。
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R563.8

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 崔俊昌,劉又寧;全氟化碳的醫(yī)學應用[J];北京醫(yī)學;2001年03期

2 陳鳳娥,朱琦,許迅,方麗珍,黃璐璐;全氟化碳液體在孔源性視網膜脫離手術中的應用[J];眼科研究;2004年03期

3 張健鵬;劉又寧;;全氟化碳吸入技術及其應用前景[J];中國實用內科雜志;2007年05期

4 馬利波,劉華,王澤歐,張先平,尚志宏;前房殘留全氟化碳液臨床分析[J];中國實用眼科雜志;2001年02期

5 王方;應用于復雜性視網膜脫離手術中的全氟化碳液體[J];國外醫(yī)學.眼科學分冊;1997年02期

6 馬利波;全氟化碳液的臨床應用及并發(fā)癥[J];眼科;2003年03期

7 王曉光;張健鵬;趙曉巍;劉又寧;楊海波;于紅;;全氟化碳汽化吸入對急性呼吸窘迫綜合征豬血氣及血流動力學的影響[J];解放軍醫(yī)學雜志;2009年06期

8 茹錦榮;;全氟化碳—多元醇對紅細胞生成和人工血液的替代作用[J];國外醫(yī)學.生物醫(yī)學工程分冊;1980年04期

9 陳丹;“生命之水”——全氟化碳——注入肺部 冷卻大腦 拯救生命[J];中國高校技術市場;2001年12期

10 王立平,趙曉晶,曹書杰,張大予;全氟化碳液在爆炸傷致巨大裂孔視網膜脫離中的應用[J];眼外傷職業(yè)眼病雜志.附眼科手術;1999年02期

中國重要會議論文全文數據庫 前7條

1 李影;楊震;陳良安;;全氟化碳對脂多糖誘導的肺泡液體清除能力下調的保護作用[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2013第十四次全國呼吸病學學術會議論文匯編[C];2013年

2 徐順貴;;全氟化碳對大鼠肺微血管內皮細胞形態(tài)和活力的影響[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2013第十四次全國呼吸病學學術會議論文匯編[C];2013年

3 王曉光;張健鵬;趙曉巍;尹利華;謝景紅;高紅梅;劉又寧;;全氟化碳吸入對急性呼吸窘迫綜合征豬血氣及血流動力學影響的實驗研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國呼吸病學術會議暨學習班論文匯編[C];2006年

4 樊毫軍;張健鵬;胡紅焱;王海燕;劉書盈;劉又寧;;全氟化碳乳劑對急性肺損傷大鼠肺內水通道1影響的實驗研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國呼吸病學術會議暨學習班論文匯編[C];2006年

5 張健鵬;樊毫軍;劉書盈;劉又寧;;全氟化碳乳劑靜脈注射對急性肺損傷預防作用的實驗研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國呼吸病學術會議暨學習班論文匯編[C];2006年

6 徐順貴;;全氟化碳吸入對內毒素急性肺損傷大鼠的保護作用及機制探討[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2013第十四次全國呼吸病學學術會議論文匯編[C];2013年

7 王韌韜;;全氟化碳對脂多糖誘導急性肺損傷A549細胞表面活性蛋白的影響[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2013第十四次全國呼吸病學學術會議論文匯編[C];2013年

中國重要報紙全文數據庫 前1條

1 陳丹;“生命之水”——全氟化碳[N];科技日報;2001年

中國博士學位論文全文數據庫 前8條

1 梁志欣;全氟化碳汽化吸入對急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征治療作用的臨床研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2012年

2 徐淑鳳;全氟化碳對脂多糖誘導的肺微血管內皮細胞和肺泡上皮細胞損傷的保護作用和機制研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2008年

3 秦鑫;汽化吸入全氟化碳對行機械通氣肺損傷小豬肺外臟器的保護作用[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2006年

4 樊毫軍;腹腔或靜脈注射全氟化碳對大鼠急性肺損傷預防作用的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2006年

5 張兆瑞;全氟化碳對沖擊波致肺Ⅱ型上皮細胞損傷的作用及機制探討[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2014年

6 王曉光;全氟化碳霧化及汽化吸入治療ARDS小豬的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2005年

7 徐順貴;全氟化碳吸入對脂多糖誘導大鼠急性肺損傷的保護作用及機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2007年

8 韓丙超;汽化吸入全氟化碳對內毒素性急性肺損傷兔表面活性蛋白和基質金屬蛋白酶的影響[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2012年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 張平;全氟化碳對動脈粥樣硬化大鼠內皮功能的影響[D];青島大學;2016年

2 聞鄭峰;富氧全氟化碳乳劑對油酸誘導家兔急性呼吸窘迫綜合征的保護作用研究[D];第二軍醫(yī)大學;2016年

3 李影;全氟化碳對脂多糖誘導的肺泡液體清除能力下調的保護作用[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2013年

4 葉樹鳴;全氟化碳對脂多糖致A549細胞損傷的生物學影響[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2013年

5 曹熙;腹腔預注射全氟化碳對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用[D];青島大學;2013年

6 黃志堅;全氟化碳聯(lián)合鹽酸氨溴索霧化吸入治療油酸型兔ALI的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學;2007年

7 胡曄;全氟化碳對脂多糖致肺泡表面Ⅱ型上皮細胞損傷時MAPK細胞信號通路的影響[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2014年

8 趙燦;腹腔預注射全氟化碳對大鼠缺血心肌的保護作用及機制研究[D];青島大學;2011年

9 蔡添才;全氟化碳對A549細胞鈉離子通道表達影響的研究[D];河北醫(yī)科大學;2008年

10 黃賢;全氟化碳汽化吸入治療對肺水通道蛋白影響的研究[D];河北醫(yī)科大學;2008年

，

本文編號：1278662