本文關(guān)鍵詞：小鼠氣管平滑肌原代細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定

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【摘要】：目的建立一種可靠的通過(guò)組織塊貼壁法分離培養(yǎng)原代小鼠氣管平滑肌細(xì)胞及免疫組化鑒定的方法。方法體視顯微鏡下立體分離小鼠氣管平滑肌組織,組織塊貼壁法培養(yǎng)原代細(xì)胞,對(duì)分離培養(yǎng)細(xì)胞通過(guò)免疫組化方法進(jìn)行鑒定,并用MTT法對(duì)其增殖特性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果從BALB/c雄性小鼠分離氣管平滑肌組織,剪碎為1 mm3,用含1%青-鏈霉素的PBS及培養(yǎng)液漂洗,使組織塊貼于培養(yǎng)皿底,并加入5 m L培養(yǎng)液,放入37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng),3~5 d后有明顯梭狀細(xì)胞從組織塊爬出,5~6 d后,細(xì)胞可見(jiàn)明顯"峰-谷"結(jié)構(gòu)。經(jīng)免疫熒光鑒定,在傳代、純化后,可得純度為99%以上的氣管平滑肌細(xì)胞。用MTT法測(cè)量其生長(zhǎng)曲線。結(jié)論本方法操作簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì),獲得的氣管平滑肌細(xì)胞具有較好增殖能力,細(xì)胞數(shù)量和純度能夠滿足后續(xù)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究的需要。
【作者單位】： 中南民族大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物研究所武陵山區(qū)特色資源植物種質(zhì)保護(hù)與利用湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30900816,31371307) 湖北省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2014CFC116)
【分類號(hào)】：R562.25
【正文快照】： pyb1980@mail.scuec.edu.cnCorresponding author:PENG Yong-bo.E-mail:pyb1980@mail.scuec.edu.cn哮喘是一種常見(jiàn)的氣道慢性炎癥性疾病,目前我國(guó)有約2000萬(wàn)人罹患哮喘[1,2]。近些年,由于霧霾等空氣質(zhì)量與環(huán)境污染程度的日益惡劣,呼吸系統(tǒng)疾病也逐漸成為了全世界范圍影響人類

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10 ;[J];;年期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 徐，

本文編號(hào)：1232572