發(fā)布時(shí)間：2017-11-26 00:14

  本文關(guān)鍵詞：上調(diào)miR-21表達(dá)促進(jìn)肺成纖維細(xì)胞增殖和膠原蛋白合成

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【摘要】：目的探討miR-21在肺纖維化小鼠肺組織中的表達(dá)及其在肺成纖維細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)分化、膠原蛋白合成中的作用。方法將30只C57BL/6小鼠隨機(jī)分為對照組(n=5)和模型組(n=25)。經(jīng)氣管內(nèi)注入博萊霉素A5建立肺纖維化模型,分別于第3、7、14、28、56天隨機(jī)處死5只小鼠,而對照組于第56天全部處死作為總體對照,采用熒光實(shí)時(shí)定量PCR測定肺組織中miR-21表達(dá)。另外,NIH3T3肺成纖維細(xì)胞分別予LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染試劑(空白對照組)以及miR-21陰性對照物、模擬物、抑制物處理,通過MTT法檢測細(xì)胞增殖能力,應(yīng)用熒光實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot法分別檢測α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、含1型血小板結(jié)合蛋白基序的去整合素和金屬蛋白酶1(ADAMTS-1)、1型膠原蛋白(Col1)、3型膠原蛋白(Col3)mRNA與蛋白表達(dá)情況。結(jié)果模型組第7~56天,肺組織中miR-21表達(dá)水平明顯高于對照組,第28天達(dá)到高峰。在共同培養(yǎng)24、48、72、96 h后,miR-21模擬物組細(xì)胞活力較空白對照組增加,而miR-21抑制物組細(xì)胞活力較空白對照組降低。與空白對照組比較,miR-21模擬物組α-SMA、Col1、Col3 mRNA與蛋白表達(dá)水平升高,ADAMTS-1 mRNA與蛋白表達(dá)水平減少;然而miR-21抑制物組α-SMA、Col1、Col3 mRNA與蛋白表達(dá)水平下降,ADAMTS-1 mRNA與蛋白表達(dá)水平上升。陰性對照組上述指標(biāo)與空白對照組比較,無顯著性差異。結(jié)論 miR-21在肺纖維化小鼠肺組織中表達(dá)上調(diào),miR-21高表達(dá)可促進(jìn)肺成纖維細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)分化以及膠原蛋白的合成。
【作者單位】： 湖南醫(yī)藥學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)系;
【基金】：湖南省教育廳優(yōu)秀青年項(xiàng)目(14B142)
【分類號】：R563
【正文快照】： 肺纖維化(pulmonary fibrosis)是由感染、藥物、化學(xué)制劑、粉塵等因素引起的一種肺間質(zhì)性疾病,其主要病理特征是早期呈現(xiàn)彌漫性肺泡炎,后期發(fā)生大量成纖維細(xì)胞病理性增殖、轉(zhuǎn)型以及細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)在肺間質(zhì)不斷沉積,迄今尚無有效的治療方法[1-4]。含1型

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本文編號：1227891