AKT信號轉(zhuǎn)導途徑在尼古丁促進大鼠氣道平滑肌細胞增殖中的作用
本文關鍵詞:AKT信號轉(zhuǎn)導途徑在尼古丁促進大鼠氣道平滑肌細胞增殖中的作用
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【摘要】:目的探討AKT信號途徑在尼古丁誘導大鼠氣道平滑肌細胞增殖中發(fā)揮的作用。方法 (1)Western blot檢測不同濃度尼古丁作用原代培養(yǎng)的大鼠氣道平滑肌細胞不同時間段,AKT/磷酸化AKT、GSK3β/磷酸化GSK3β在氣道平滑肌細胞上的表達水平;(2)細胞分析計數(shù)儀檢測AKT抑制劑和GSK3β抑制劑對尼古丁促進大鼠氣道平滑肌細胞增殖活性的影響。實驗分組:對照組、尼古丁單獨作用組、AKT抑制劑LY294002組、AKT抑制劑LY294002+尼古丁組、GSK3β抑制劑SB216763組、GSK3β抑制劑SB216763+尼古丁組;(3)EDUd{入法測定AKT抑制劑和GSK3β抑制劑對尼古丁處理大鼠氣道平滑肌細胞DNA復制活性的影響,實驗分組同上。對照組應用1%胎牛血清培養(yǎng)基,各抑制劑和尼古丁應用1%胎牛血清培養(yǎng)基配制,分別在尼古丁加入前30 min應用。結(jié)果 (1)大鼠氣道平滑肌細胞上有AKT和GSK3β的表達;尼古丁引起AKT和GSK3β的快速磷酸化,且尼古丁促進AKT和GSK3β的磷酸化作用具有時間依賴性;(2)細胞計數(shù)法顯示,AKT抑制劑與尼古丁聯(lián)合組細胞計數(shù)明顯低于尼古丁單獨作用組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);(3)EDUd{入法測定顯示,AKT抑制劑與尼古丁聯(lián)合組細胞DNA復制水平明顯下降,與尼古丁單獨作用組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論尼古丁促進大鼠氣道平滑肌細胞的增殖作用依賴AKT/GSK3β信號途徑。
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學形態(tài)學實驗中心;廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院、呼吸疾病國家重點實驗室;
【關鍵詞】: 尼古丁 大鼠氣道平滑肌細胞 AKT信號途徑 細胞增殖
【基金】:廣州醫(yī)科大學博士、留學回國人員科研項目(編號:2013C09)
【分類號】:R56
【正文快照】: 510120)慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)是一種具有氣流受限特征的可以預防和治療的疾病。其氣流受限不完全可逆、呈進行性發(fā)展,與肺臟對吸入煙草煙霧等有害氣體或顆粒的異常炎癥反應有關[1]。慢阻肺發(fā)病與多種因素有關[2],吸煙是導致慢阻肺的最主要原因,流行病學資料顯示,長期吸煙
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本文編號:1085522
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