本文關(guān)鍵詞：血小板在免疫調(diào)節(jié)中的作用研究

  更多相關(guān)文章： 血小板 哮喘 CD154 內(nèi)毒素休克 IL-1 腫瘤轉(zhuǎn)移 vwf

【摘要】：血小板對免疫系統(tǒng)的調(diào)控作用在最近幾年受到免疫學界的廣泛重視,尤其是在各種免疫疾病中,血小板和血小板來源的免疫分子在自身免疫病和腫瘤中的作用更是普遍關(guān)注的焦點。本研究各部分工作擬通過不同的疾病模型探討疾病狀況下血小板對免疫系統(tǒng)的調(diào)控作用。。第一部分血小板的促哮喘作用在血液中血小板的數(shù)量僅次于紅細胞,除了在凝血及血栓形成中起關(guān)鍵性作用,長久以來的研究發(fā)現(xiàn)血小板參與免疫調(diào)節(jié),和多種自身免疫病的發(fā)生密切相關(guān)。血小板是由骨髓中巨核細胞分化而來,本身無核,不具有蛋白合成的機制,活化過程中釋放的多種可溶性因子或膜表面配體一般認為是預(yù)先合成儲存于細胞器中,主要是α顆粒和致密顆粒中。[2]一系列研究表明血小板活化之后釋放大量具有免疫調(diào)節(jié)的可溶性因子,其中包括IL-1 [27,28], HMGB1[29], CXCL7[30], PF4 (CXCL4)[30], GRO-(CXCL1), ENA-78 (CXCL5), IL-8 (CXCL8), RANTES (CCL5) [34], MIP-1 (CCL3) [34]和MCP-3 (CCL7) IL-7等。血小板活化后也同時釋放大量具有免疫調(diào)節(jié)作用的膜表面配體,其中包括CD62P(P-Selectin) [36], CD41/62 (GP Ⅱb/Ⅲa) [36], ICAM-2[54], CD154 (CD40L) [38], FasL (CD95L) [40], TRAIL (Apo2L) [41]以及CD40,這些膜表面配體主要存在于血小板活化后的微顆粒中。長久以來對過敏性哮喘的研究工作表明,哮喘病人或小鼠血液中或肺泡灌洗液中存在大量血小板活化的狀況[26],然而血小板的過度活化同哮喘發(fā)生的關(guān)系以及作用機制一直不是很確切。在本文的研究工作中,我們采用霧化吸入OVA誘導Balb/c小鼠哮喘的模型,結(jié)合使用血小板過繼以及血小板清除抗體,闡明血小板在哮喘發(fā)生過程中的作用,同時采用CD154敲除鼠闡明血小板來源的CD154在哮喘發(fā)生過程中起著重要的促進作用。第二部分血小板在內(nèi)毒素休克中的作用內(nèi)毒素如LPS對血小板的激活是這幾年血小板研究領(lǐng)域的一個熱點,多種TLR配體可以激活血小板。[55]內(nèi)毒素休克過程中,血液中存在大量TLR配體,可以激活血液中的血小板。激活的血小板釋放大量具有免疫調(diào)節(jié)作用的可溶性因子和配體可能對內(nèi)毒素休克具有調(diào)節(jié)作用。具體血小板在急性內(nèi)毒素休克中的作用尚未清楚,本部分工作通過清除或過繼血小板探討血小板在內(nèi)毒素休克中的作用。在內(nèi)毒素休克過程中,體內(nèi)大量產(chǎn)生的IL-1 β是小鼠致病和致死的重要原因,對IL-1 β信號的下調(diào)在體內(nèi)主要是通過IL-1R1 antagonist (IL-1Ra)完成的,在本部分工作中我們發(fā)現(xiàn)血小板表面有大量IL-1R1,活化后降解為可溶性IL-1R1,血小板可能通過釋放這種類似decoy receptor降低體內(nèi)IL-1 β下游作用第三部分血小板在乳腺癌肺轉(zhuǎn)移中的作用對乳腺癌小鼠以及乳腺癌病人的觀察中發(fā)現(xiàn),在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中,機體產(chǎn)生大量針對乳腺癌細胞的自身抗體,而且這些抗乳腺癌的自身抗體在腫瘤的轉(zhuǎn)移過程中起著重要的促進作用。既往研究也表明,血小板具有促進腫瘤細胞轉(zhuǎn)移的能力,但具體機制眾說紛紜。去年Cancer Cell上的文章闡明血小板來源的TGF-β能夠促進腫瘤細胞EMT轉(zhuǎn)化,從而促進腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移。另外大量數(shù)據(jù)表明在腫瘤病人或荷瘤小鼠的外周血中存在很多腫瘤細胞和血小板的結(jié)合物,血小板可能通過與腫瘤細胞的結(jié)合從而促進腫瘤細胞在血液中的遷移。但血小板通過何種方式與腫瘤細胞結(jié)合,具體的機制并不清楚。國外一項血小板輔助革蘭氏陽性菌在血液中遷移的文章引起了我們的注意[50]。該項研究表明,革蘭氏陽性菌,如李斯特菌表面多糖可以以非經(jīng)典途徑激活補體通路,在對革蘭氏陽性菌和血小板結(jié)合物的研究中發(fā)現(xiàn),如果清楚補體,或者阻斷血小板表面的GPIb,可以有效地阻斷血小板和李斯特菌的結(jié)合,提示我們補體和血小板表面的GPIb是參與革蘭氏菌和血小板結(jié)合的關(guān)鍵分子。另外一項類似的研究結(jié)果表明,血小板表面的GPIb可以與大量存在于血液中的一個寡聚大分子von willbrand factor (VWF)的D’D3結(jié)合,在以往對VWF的結(jié)構(gòu)分析中,VWF的A1結(jié)構(gòu)域被認為很可能含有免疫球蛋白的結(jié)合位點。[51]基于以上發(fā)現(xiàn),我們假設(shè)：乳腺癌病人或荷瘤小鼠體內(nèi)存在的抗乳腺癌細胞自身抗體可以與乳腺癌細胞形成抗原抗體復合物,并與VWF的A1結(jié)構(gòu)域結(jié)合,VWF的另一端的D’D3可以與血小板表面的GPIb結(jié)合,從而形成乳腺癌細胞-自身抗體-VWF-血小板的復合物。腫瘤細胞通過抗腫瘤細胞抗體和vwf的橋聯(lián)完成與血液中血小板的結(jié)合,從而借助與血小板的結(jié)合輔助腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移。為了驗證這一假設(shè),我們克隆了小鼠vwf的A1和D’D3序列,并在小鼠乳腺癌細胞4T1中分別過表達,通過G418篩選過表達克隆,接種于Balb/c小鼠乳腺皮下,觀察不同過表達株在體內(nèi)肝臟及肺轉(zhuǎn)移情況。
【關(guān)鍵詞】：血小板 哮喘 CD154 內(nèi)毒素休克 IL-1 腫瘤轉(zhuǎn)移 vwf
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 致謝6-8
• 序言8-10
• 中文摘要10-13
• Abstract13-17
• 縮略詞表17-20
• 第一部分 血小板的促哮喘作用研究20-40
• 1 引言20-21
• 2 材料與方法21-23
• 2.1 實驗材料21
• 2.2 實驗方法21-23
• 3 實驗結(jié)果23-36
• 3.1 OVA霧化吸入誘導呼吸道血小板活化23-24
• 3.2 血小板過繼暫時性提高肺泡灌洗液中血小板數(shù)目,血小板清除性抗體暫時降低肺泡灌洗液中血小板數(shù)目24-25
• 3.3 過繼血小板后哮喘程度加重,清除血小板后哮喘程度減輕25-29
• 3.4 CD154敲除血小板促哮喘能力明顯低于野生型血小板29-34
• 3.5 血小板通過表面CD154抑制Treg分化34-36
• 4 討論36-38
• 5 結(jié)論38-40
• 第二部分 血小板在內(nèi)毒素休克中的作用40-55
• 1 引言40-41
• 2 材料與方法41-43
• 2.1 實驗材料41
• 2.2 實驗方法41-43
• 3 實驗結(jié)果43-52
• 3.1 清除血小板后小鼠對亞致死劑量LPS敏感43-44
• 3.2 過繼血小板可以保護小鼠抵抗致死劑量LPS44-45
• 3.3 過繼/清除血小板后,LPS刺激IL-1β水平變化不顯著45-46
• 3.4 清除血小板后,LPS刺激產(chǎn)生持久大量IL-646-47
• 3.5 血小板表面高表達IL-1R147-49
• 3.6 骨髓來源的IL-1R1在亞致死劑量LPS刺激中起保護作用49-52
• 4 討論52-53
• 5 結(jié)論53-55
• 第三部分 血小扳在乳腺癌轉(zhuǎn)移模型中的功能55-64
• 引言55-57
• 材科與方法57-60
• 結(jié)果60-64
• 參考文獻64-71
• Review: Platelet modulation of immune responses71-82
• References75-82

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李峰 ,徐仁寶;內(nèi)毒素休克狗白細胞糖皮質(zhì)激素受體的變化[J];第二軍醫(yī)大學學報;1989年01期

2 ;氯胺酮對內(nèi)毒素休克小鼠存活率的影響[J];中國病理生理雜志;2001年11期

3 李伊為,鄧汝東,陳東風,黎暉,杜少輝;牛珀至寶微丸對內(nèi)毒素休克腎組織誘生型一氧化氮合酶表達的影響[J];解剖學研究;2003年01期

4 胡振杰,劉麗霞,孫莉霄,李勇;連續(xù)性靜-靜脈血液濾過對內(nèi)毒素休克羊血流動力學的影響[J];中國危重病急救醫(yī)學;2005年04期

5 趙裕光,王爽,時德;胸腺素β_4治療脂多糖誘導小鼠內(nèi)毒素休克的實驗研究[J];江西醫(yī)學院學報;2005年03期

6 姚詠明;姚鳳華;彭志齊;胥彩林;于燕;;內(nèi)毒素休克大鼠生物喋呤改變與多器官損害的關(guān)系[J];中華急診醫(yī)學雜志;2006年04期

7 盧曉燕;韋丹;;內(nèi)毒素對心血管影響的研究進展[J];華夏醫(yī)學;2006年02期

8 吳麗娜;劉勇;;內(nèi)毒素結(jié)合蛋白的研究進展[J];微生物與感染;2006年03期

9 楊覺民;夏海鳴;朱曉云;馮艷紅;杜開和;殷國慶;;內(nèi)毒素休克獼猴肺內(nèi)血小板衍生因子和溶酶體變化[J];中華急診醫(yī)學雜志;2007年11期

10 應(yīng)楹;田野蘋;;新型α-黑素細胞刺激素類似物對內(nèi)毒素休克小鼠的保護作用[J];福州總醫(yī)院學報;2008年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馮剛;蔣建;惠小平;喻中城;史以玨;;一氧化氮與內(nèi)毒素休克關(guān)系的實驗研究[A];中華醫(yī)學會急診醫(yī)學學會第六次全國急診醫(yī)學學術(shù)會議論文匯編[C];1996年

2 趙明哲;;內(nèi)毒素休克磷酸化蛋白質(zhì)組學分析[A];中國病理生理學會受體和信號轉(zhuǎn)導專業(yè)委員會暨消化專業(yè)委員會聯(lián)合學術(shù)會議論文匯編[C];2008年

3 張耀宗;趙鶴齡;;不同藥物對內(nèi)毒素休克大鼠腎組織誘導型一氧化氮合酶、線粒體活性及血清胱抑素C的影響[A];第三屆重癥醫(yī)學大會論文匯編[C];2009年

4 張靜;;正常淋漿對內(nèi)毒素休克大鼠微循環(huán)障礙的干預(yù)作用[A];中國病理生理學會第九屆全國代表大會及學術(shù)會議論文摘要[C];2010年

5 王濤;;內(nèi)毒素休克大鼠腸粘膜免疫功能的改變及意義[A];第三屆重癥醫(yī)學大會論文匯編[C];2009年

6 梁家林;李濤;楊光明;徐競;賀教江;陳墾;劉良明;;白介素-1 β 介導內(nèi)毒素休克后α_1腎上腺素能受體失敏的作用[A];第八屆海峽兩岸心血管科學研討會論文集[C];2011年

7 王小亭;劉大為;楊榮利;柴文昭;隆云;崔娜;石巖;周翔;張青;;心肌細胞凋亡與線粒體能量代謝在內(nèi)毒素休克犬心功能不全時的作用[A];第三屆重癥醫(yī)學大會論文匯編[C];2009年

8 曾皋;孫蓬然;劉安雷;劉潔;郭樹彬;;內(nèi)毒素休克小鼠脂鈣蛋白2及其相關(guān)細胞因子的表達[A];中華醫(yī)學會急診醫(yī)學分會第十六次全國急診醫(yī)學學術(shù)年會論文集[C];2013年

9 劉大為;王小亭;楊榮利;;內(nèi)毒素休克犬的腎臟血流動力學變化[A];第三屆重癥醫(yī)學大會論文匯編[C];2009年

10 姚詠明;于燕;彭志齊;施志國;盛志勇;;殺菌／通透性增加蛋白對內(nèi)毒素休克時微循環(huán)灌注與生物喋呤誘生的影響[A];中華醫(yī)學會急診醫(yī)學分會復蘇、災(zāi)害、中毒專業(yè)聯(lián)合學術(shù)交流會資料匯編[C];1999年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 杜少輝；徐志偉；陳東風;牛珀至寶微丸能減輕內(nèi)毒素休克肺損[N];中國醫(yī)藥報;2005年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 田軍;血小板在免疫調(diào)節(jié)中的作用研究[D];浙江大學;2014年

2 崔曉輝;硫化氫在大鼠內(nèi)毒素休克發(fā)生發(fā)展中的作用及其對一氧化氮和一氧化碳的影響[D];河北醫(yī)科大學;2007年

3 郭祥瑞;心理應(yīng)激對髓系抑制性細胞和內(nèi)毒素休克的影響及初步機理探討[D];吉林大學;2012年

4 趙裕光;胸腺素β4治療內(nèi)毒素休克的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學;2005年

5 王一梅;不同劑量血液濾過對內(nèi)毒素休克豬炎癥狀態(tài)和免疫功能的影響和機制[D];復旦大學;2008年

6 陳騰祥;內(nèi)毒素休克小鼠肝臟核蛋白質(zhì)組學研究[D];第一軍醫(yī)大學;2007年

7 劉菲;不同潮氣量機械通氣對失血性和內(nèi)毒素休克兔多器官損傷的影響[D];中國醫(yī)科大學;2006年

8 姚琦;內(nèi)毒素休克小鼠肺血管特異性結(jié)合肽的篩選與鑒定[D];南方醫(yī)科大學;2009年

9 杜少輝;牛珀至寶微丸對內(nèi)毒素休克相關(guān)基因表達調(diào)控的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學;2007年

10 高峰;CCK-8對LPS誘導ECV-304 iNOS表達的調(diào)節(jié)作用及其信號轉(zhuǎn)導機制的研究[D];河北醫(yī)科大學;2006年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高雪松;p38MAPK在Keap1-Nrf2/ARE通路對電針刺減輕兔內(nèi)毒素休克誘發(fā)肺損傷中的作用[D];天津醫(yī)科大學;2015年

2 陳牡林;PI3K/Nrf2通路在內(nèi)毒素休克兔腎損傷中的作用[D];天津醫(yī)科大學;2015年

3 蔡炳岡;人源抗TLR4抗體Fab片段抑制內(nèi)毒素（LPS）引起的炎癥反應(yīng)的體內(nèi)及體外研究[D];安徽醫(yī)科大學;2016年

4 楊林;以氨基酸為配基的聚偏氟乙烯中空纖維膜對人血中內(nèi)毒素去除的研究[D];浙江大學;2008年

5 李娜;內(nèi)毒素休克時肺與體循環(huán)壓力變化及毒蕈堿M受體對肺、體血管的調(diào)節(jié)作用[D];中國醫(yī)科大學;2009年

6 趙明哲;內(nèi)毒素休克小鼠肝臟細胞質(zhì)磷酸化蛋白質(zhì)組學的研究[D];東北林業(yè)大學;2009年

7 袁利華;內(nèi)毒素休克小鼠肝臟血管特異性結(jié)合肽的體內(nèi)篩選及鑒定[D];南方醫(yī)科大學;2008年

8 胡水旺;內(nèi)毒素休克小鼠肝臟線粒體差異蛋白質(zhì)組的鑒定[D];南方醫(yī)科大學;2008年

9 陶炳東;多巴胺對內(nèi)毒素休克犬肺動脈壓力的影響[D];中國醫(yī)科大學;2009年

10 李靜;乙酸鈉對內(nèi)毒素休克的保護作用及抗炎機制的研究[D];河北大學;2011年

，

本文編號：1080560