本文關(guān)鍵詞：羅格列酮對(duì)博萊霉素誘導(dǎo)大鼠肺纖維化的治療作用及信號(hào)機(jī)制

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【摘要】：目的:特發(fā)性肺纖維化(Idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一種進(jìn)展性、致命性的彌漫性肺間質(zhì)疾病,近年來發(fā)病率和死亡率明顯升高,以成纖維細(xì)胞過度增殖、細(xì)胞外基質(zhì)成分堆積為主要特征,但目前其病因和發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明且缺乏有效治療。本研究初步探討羅格列酮(Rosiglitazone,RSG)是否通過活化過氧化物酶體增殖物活化受體γ(PPAR-γ),進(jìn)而抑制成纖維細(xì)胞增生及轉(zhuǎn)化,減少膠原合成和沉積,發(fā)揮治療肺纖維化的作用;是否通過調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡,延緩肺纖維進(jìn)程。同時(shí)初步探討細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信號(hào)途徑是否參與了羅格列酮治療肺纖維化過程。方法:健康雄性Wistar大鼠54只,體重(125±5)g,選用隨機(jī)數(shù)字表法將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為3組,對(duì)照組(Control組)、博萊霉素組(BLM組)、博萊霉素+羅格列酮組(BLM+RSG組),每組18只。大鼠經(jīng)10%水合氯醛(3ml/kg)腹腔注射麻醉后,仰臥位固定于鼠臺(tái)上,常規(guī)頸部皮膚消毒,行頸正中切口,逐層分離組織并暴露氣管,BLM組、BLM+RSG組大鼠氣管內(nèi)一次性注入博萊霉素(5mg/kg)建立大鼠肺纖維化模型,Control組注入等體積生理鹽水,注射后立即將動(dòng)物直立并左右旋轉(zhuǎn),使藥液在肺內(nèi)分布均勻。造模24小時(shí)后給予BLM+RSG組大鼠RSG(3mg/kg.d)灌胃,其余2組灌入等體積生理鹽水。于第7天、14天、28天,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各組隨機(jī)取出6只大鼠,經(jīng)10%水合氯醛(3ml/Kg)腹腔麻醉后,雙側(cè)頸總動(dòng)脈放血處死,沿劍突正中快速剪開胸骨,打開胸腔,充分暴露雙肺并分離氣管及雙肺,右肺中葉肺組織供組織病理學(xué)觀察(HE染色,Masson染色),肺泡炎和肺纖維化程度用Szapiel法進(jìn)行分級(jí);右上葉肺組織行Real time RT-PCR測(cè)定PPAR-γ、α平滑肌激動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原及caspase-3 m RNA的表達(dá);右肺下葉肺組織行Western blot測(cè)定磷酸化-細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(P-ERK)蛋白表達(dá)量。采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,P0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1 肺組織病理結(jié)果:7天、14天、28天,對(duì)照組大鼠肺組織肺泡結(jié)構(gòu)均正常,無明顯的炎細(xì)胞浸潤(rùn)及膠原沉積。BLM組大鼠肺組織7天時(shí)炎細(xì)胞浸潤(rùn),肺泡炎明顯,14天、28天時(shí)肺泡炎程度減輕,但顯著高于同期Control組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),14天、28天BLM組大鼠肺組織成纖維細(xì)胞增多并可見小灶樣及片狀藍(lán)染膠原沉積,肺纖維化程度顯著高于Control組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),表明肺纖維化模型復(fù)制成功。給予RSG治療后,BLM+RSG組大鼠肺組織肺泡炎及肺纖維化程度較同一時(shí)間點(diǎn)BLM組明顯減輕,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2 Real time RT-PCR結(jié)果:7天、14天、28天,BLM組大鼠肺組織α-SMA、Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原m RNA的表達(dá)均較同期的Control組顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);給予RSG治療后BLM+RSG組大鼠肺組織α-SMA、Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原m RNA的表達(dá)較同一時(shí)間點(diǎn)BLM組顯著下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。給予RSG治療后,7天,14天,28天,BLM+RSG組大鼠肺組織PPAR-γm RNA的表達(dá)較同一時(shí)間點(diǎn)BLM組明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。7天、14天、28天,BLM+RSG組大鼠肺組織的caspase-3m RNA表達(dá)較BLM組顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3 Western blot結(jié)果:7天、14天、28天,BLM組大鼠肺組織P-ERK的表達(dá)較同期的Control組上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);給予RSG治療后BLM+RSG組大鼠肺組織P-ERK表達(dá)均較同期的BLM組下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1在博萊霉素誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化模型中,RSG通過活化PPAR-γ發(fā)揮治療肺纖維化的作用。2 RSG通過上調(diào)caspase-3的表達(dá),促進(jìn)成纖維細(xì)胞凋亡,阻滯肺纖維化的發(fā)展。3 PPAR-γ與ERK信號(hào)途徑的相互作用可能參與了RSG治療肺纖維化的過程。
【關(guān)鍵詞】：肺纖維化 羅格列酮(RSG) α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA) Ⅰ型膠原 Ⅲ型膠原 caspase-3 ERK信號(hào)通路
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R563
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮寫10-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-21
• 結(jié)果21-23
• 附圖23-29
• 附表29-30
• 討論30-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-40
• 綜述 結(jié)締組織病相關(guān)間質(zhì)性肺疾病診治進(jìn)展40-54
• 參考文獻(xiàn)48-54
• 致謝54-55
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷55

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 郭晏同,冷希圣,李濤,宋盛晗,秦致中,熊亮發(fā);過氧化物酶體增殖物活化的受體γ特異配體羅格列酮對(duì)肝星狀細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[J];解剖學(xué)報(bào);2005年02期

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本文編號(hào)：1072662