發(fā)布時(shí)間：2017-10-16 02:35

  本文關(guān)鍵詞：ICAM-1在COPD樣大鼠肺損傷中的作用

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【摘要】：背景慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)是一種高患病率、高致殘率、高病死率的慢性呼吸系統(tǒng)疾病。COPD患者的肺功能逐漸下降,其機(jī)制目前尚不清楚,吸煙與感染是COPD的主要危險(xiǎn)因素,尤其是呼吸道反復(fù)感染及遷延后的慢性炎癥反應(yīng)是導(dǎo)致COPD發(fā)生發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。有研究表明慢性炎癥反應(yīng)及炎癥損傷是COPD的病理生理學(xué)基礎(chǔ)。 目的通過對正常大鼠、單純煙熏大鼠和煙熏+內(nèi)毒素處理大鼠的呼吸功能的對比、肺組織ICAM-1、TNF-α表達(dá)情況的對比及肺組織ICAM-1、TNF-α表達(dá)相互關(guān)系的研究,探討ICAM-1在COPD樣肺損傷中的作用。 方法選擇SD大鼠30只,隨機(jī)分為三組,每組10只。實(shí)驗(yàn)組大鼠每日煙霧暴露(簡稱煙熏)2次,每次30min,持續(xù)暴露28d,并在第1d、第14d以1mg.Kg-1的劑量氣管內(nèi)滴注脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS),復(fù)制慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)動(dòng)物模型。對照組大鼠在第1d、第14d氣管內(nèi)滴注等量的生理鹽水,其余處理同實(shí)驗(yàn)組�？瞻捉M大鼠不經(jīng)煙霧暴露處理、內(nèi)毒素處理和生理鹽水處理,其余處理同實(shí)驗(yàn)組。第29d將3組大鼠以4%水合氯醛(10ml.kg-1)腹腔注射麻醉,行胸頸部手術(shù)：行頸總動(dòng)脈插管術(shù)、暴露膈肌、暴露膈肌并與BL-420生物信號采集處理系統(tǒng)相連。3組大鼠均保留呼吸曲線,取動(dòng)脈血、支氣管肺泡灌洗液和肺組織標(biāo)本,完成①3組大鼠呼吸曲線參數(shù)、肺組織含水量、動(dòng)脈血氧分壓、動(dòng)脈血二氧化碳分壓的測算比較。②采用比色法測3組大鼠肺組織中髓過氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)活性并比較。③通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測3組大鼠外周血和支氣管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中TNF-α的水平。④通過HE染色觀察3組家大鼠組織病理形態(tài)。通過免疫組化SP法觀察3組大鼠肺組織細(xì)胞細(xì)胞粘附分子-1(Inflammatory cell adhesion molecules-1, ICAM-1)和腫瘤壞死因子-α (tumor necrosis factor-a, TNF-α)表達(dá)情況并比較,分析實(shí)驗(yàn)組大鼠肺組織ICAM-1、TNF-α表達(dá)變化及表達(dá)變化的相關(guān)性。⑤通過逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)檢測肺組織中ICAM-1蛋白、TNF-a蛋白mRNA水平。對上述結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果①對3組大鼠呼吸曲線參數(shù)的比較可知：實(shí)驗(yàn)組吸氣持續(xù)時(shí)間低于空白組(t=6.125,p0.001)與對照組(t=10.511,p0.001),對照組吸氣持續(xù)時(shí)間低于空白組(t=8.225,p0.001)；實(shí)驗(yàn)組呼氣持續(xù)時(shí)間高于對照組(t=17.327,p0.001)、高于空白組(t=13.261,p0.001),對照組呼氣持續(xù)時(shí)間高于與空白組(t=10.025,p0.05)；實(shí)驗(yàn)組呼吸幅度低于對照組(t=21.412,p0.001)、低于空白組(t=13.225,p0.001)。對3組大鼠血?dú)庵笜?biāo)的比較可知實(shí)驗(yàn)組大鼠Pa02低于對照組和空白組(t=17.125, p0.001; t=9.016, p0.001);實(shí)驗(yàn)組大鼠PaCO2高于對照組和空白組(t=16.412, p0.001; t=20.233, p0.001)。實(shí)驗(yàn)組大鼠左肺組織W/D值和含水量高于對照組(t=14.136, p0.001;1=12.147, p0.001)、高于空白組(t=11.145,p0.001；t=13.625,p0.001)。上述結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。②實(shí)驗(yàn)組大鼠肺組織MPO活性高于對照組(t=13.137,p0.001)、高于空白組(t=10.166,p0.001),結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③ELISA法檢測實(shí)驗(yàn)組大鼠肺組織勻漿中ICAM-1和TNF-α含量高于對照組(t=15.233, p0.001;t=15.135, p0.001)、高于空白組(t=12.108,p0.001t=11.124,p0.05)結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。④3組大鼠光鏡下組織結(jié)構(gòu)對比及透射電鏡下微觀結(jié)構(gòu)的對比顯示：實(shí)驗(yàn)組大鼠呈現(xiàn)典型的COPD病理改變,對照組大鼠也表現(xiàn)出COPD的病理變化特點(diǎn),但程度較輕,空白組大鼠無上述表現(xiàn)。免疫組化結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)組大鼠肺組織ICAM-1和TNF-α的表達(dá)高于對照組(x2=9.24,p0.05；x2=6.52,p0.05),高于空白組(x2=7,21, p0.05; x2=5.93, p0.05),對照組高于空白組(x2=8.46, p0.05;x2=7.54, p0.05),結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑤RT-PCR方法檢測3組大鼠肺組織ICAM-1蛋白和TNF-α蛋白nRNA水平,實(shí)驗(yàn)組大鼠ICAM-1蛋白和TNF-α蛋白mRNA水平高于對照組(t=18.022, p0.001;1=13.625, p0.001)、高于空白組(t=14.125, p0.001;1=21.126, p0.05)。 結(jié)論香煙煙霧、內(nèi)毒素是COPD樣肺損傷發(fā)生發(fā)展的重要危險(xiǎn)因素,可刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞和肺泡上皮細(xì)胞表達(dá)ICAM-1上調(diào),功能性ICAM-1增多啟動(dòng)炎細(xì)胞的黏附聚集釋放反應(yīng),促進(jìn)TNF-α的釋放,從而激活炎癥級聯(lián)反應(yīng)。TNF-α做為炎癥反應(yīng)始動(dòng)因子調(diào)控炎癥因子的釋放,擴(kuò)大炎癥反應(yīng),同時(shí)使ICAM-1高表達(dá),進(jìn)一步促進(jìn)炎癥反應(yīng)失衡。ICAM-1和TNF-α共同作用是導(dǎo)致COPD樣肺炎性損傷和呼吸功能障礙的重要機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：內(nèi)毒素 煙熏 細(xì)胞粘附分子-1 腫瘤壞死因子-α 慢性阻塞性肺病
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R563
【目錄】：

• 摘要5-8
• Abstract8-11
• 前言11-12
• 材料和方法12-20
• 結(jié)果20-28
• 討論28-32
• 小結(jié)32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 綜述：ICAM-1與急性呼吸功能障礙36-43
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 英文縮略詞43-44
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況44-45
• 致謝45-46
• 個(gè)人簡介46

【參考文獻(xiàn)】

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8 裴，

本文編號：1040151