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USPIO標(biāo)記anti-VEGFR-2抗體探針的體外MR成像研究

發(fā)布時間:2017-09-06 11:47

  本文關(guān)鍵詞:USPIO標(biāo)記anti-VEGFR-2抗體探針的體外MR成像研究


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【摘要】:目的:研究USPIO標(biāo)記anti-VEGFR-2抗體的探針的生物學(xué)性質(zhì)與體外MR成像能力,為基于MRI技術(shù)的VEGF/VEGFRs體內(nèi)分子成像提供理論基礎(chǔ)。方法:體外培養(yǎng)高表達(dá)VEGFR的小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞。采用化學(xué)耦聯(lián)法合成USPIO標(biāo)記的anti-VEGFR-2抗體的特異性探針,用單純USPIO納米顆粒作為對照組。然后進(jìn)行:(1)DLS法質(zhì)控探針質(zhì)量:將探針制成懸液,用DLS法檢測探針合成情況;(2)探針的細(xì)胞毒性試驗(yàn)(MTT試驗(yàn)):選取兩組細(xì)胞,分別加入不同濃度的探針懸液與USPIO懸液,孵育4h后,采用MTT法測定兩組細(xì)胞的OD值;(3)探針的體外結(jié)合能力:選取兩組細(xì)胞,分別加入不同濃度的探針懸液與USPIO懸液,孵育4h后,進(jìn)行普魯士藍(lán)染色成像;(4)探針的體外MR成像能力:取2皿處于對數(shù)生長期的MSl細(xì)胞,分別加入相同濃度的探針懸液與USPIO懸液,孵育4h后,在西門子1.5T MRI機(jī)上進(jìn)行FSE T2WI掃描,觀察其MR成像能力;(5)探針弛豫率的測量:采用多回波SE-T2WI掃描呈濃度梯度的不同濃度探針懸液,用線性回歸方程計(jì)算探針弛豫率。結(jié)果:(1)通過DLS法證實(shí)特異性抗體(anti-VEGFR-2)可成功結(jié)合到USPIO顆粒上;(2)MTT實(shí)驗(yàn)表明探針在10-120ug/ml的濃度范圍內(nèi)對細(xì)胞無毒性;(3)普魯士藍(lán)結(jié)果證明,特異性探針具有高效結(jié)合MS1細(xì)胞的能力,且隨探針濃度增加,細(xì)胞結(jié)合探針的量也增加;(4)利用西門子1.5T磁共振儀,通過對實(shí)驗(yàn)組及對照組細(xì)胞懸液進(jìn)行MRI T2WI成像,觀察到實(shí)驗(yàn)組較對照組表現(xiàn)出T2WI信號的明顯衰減,表明特異性探針具備良好的MR成像能力;(5)探針與USPIO弛豫率之間不存在差異,表明USPIO表面結(jié)合的抗體不會影響USPIO本身的弛豫特征。結(jié)論:USPIO標(biāo)記的anti-VEGFR-2抗體探針具有良好的生物學(xué)特性與體外MR成像能力。
【關(guān)鍵詞】:USPIO 分子影像 VEGFR-2 MS1 MRI
【學(xué)位授予單位】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R445.2
【目錄】:
  • 中文摘要5-6
  • Abstract6-7
  • 前言7-8
  • 材料和方法8-13
  • 結(jié)果13-21
  • 討論21-22
  • 結(jié)論22-23
  • 綜述23-26
  • 參考文獻(xiàn)26-29
  • 英文縮略詞29-30
  • 致謝30
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本文編號:802955

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