第一部分超聲微泡破裂法聯(lián)合陽(yáng)離子脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)研究目的探討超聲微泡破裂法聯(lián)合陽(yáng)離子脂質(zhì)體（cationic liposome，CL）介導(dǎo)綠色熒光蛋白質(zhì)粒在肝癌細(xì)胞（HepG2）基因轉(zhuǎn)染的可行性，并探索最佳轉(zhuǎn)染條件。方法依次采用培養(yǎng)液中是否含有血清和不同的CL濃度、不同超聲輻照時(shí)間點(diǎn)、不同納米級(jí)脂質(zhì)微泡造影劑（nano-liposomal bubble, NB）濃度等處理因素進(jìn)行細(xì)胞基因轉(zhuǎn)染。熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測(cè)基因轉(zhuǎn)染效率，CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞活性，以獲得優(yōu)化的轉(zhuǎn)染參數(shù)。結(jié)果血清能降低CL的細(xì)胞毒性，但對(duì)基因轉(zhuǎn)染效率無(wú)明顯影響，CL與質(zhì)粒DNA質(zhì)量比為4:1時(shí)可以達(dá)到相對(duì)高效低毒的轉(zhuǎn)染效果，細(xì)胞轉(zhuǎn)染率和存活率分別為（17.71±0.79）%和（91.28±0.76）%。CL聯(lián)合1小時(shí)時(shí)間點(diǎn)輻照超聲可以提高轉(zhuǎn)染率至（24.85±0.78）%（P<0.01），加入10%的NB可進(jìn)一步提高轉(zhuǎn)染率至（32.47±4.01）%（P<0.05）。結(jié)論超聲微泡破裂法可以有效增強(qiáng)陽(yáng)離子脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染，聯(lián)合應(yīng)用為基因治療提供了新思路。第二部分納米級(jí)脂質(zhì)超聲微泡造影劑制備... 

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【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同質(zhì)量比的CL-DNA復(fù)合物的電泳圖

熒光顯微鏡（100×）示不同處理因素下HepG2細(xì)胞表達(dá)綠色熒光蛋白情況

NBⅡ稀釋10倍后的光鏡圖（A：100×；B：400×）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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