人體血清中葡萄糖、氫化可的松的含量測定是臨床檢測中極為關(guān)鍵的生化指標(biāo)之一,為臨床診斷和病情觀察提供了可靠的依據(jù),對相關(guān)疾病的診斷和治療具有重要意義。目前已有多種方法應(yīng)用于臨床實驗室中血清葡萄糖與氫化可的松的測定,但由于其測定結(jié)果間缺乏可比性,因此實現(xiàn)測定標(biāo)準(zhǔn)化迫切需要建立準(zhǔn)確、精密的參考方法。 本文中以D-[~(13)C_6]-葡萄糖作為測量內(nèi)標(biāo),分別考查了血清葡萄糖準(zhǔn)確測定所需的樣品前處理、衍生化反應(yīng)、色譜質(zhì)譜的分離和測量條件,建立了同位素稀釋質(zhì)譜技術(shù)準(zhǔn)確測定人體血清中葡萄糖的簡單方法。 文中采用本法對三種不同濃度血清中葡萄糖的含量進行定值,測量結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于1%;同時采用本法對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)SRM965a(level1、level 3)冰凍人血清進行了葡萄糖的方法準(zhǔn)確性的驗證,與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)保證值的相對偏差均在±1%以內(nèi);同時,進行了回收率實驗,方法的回收率在99～101%之間,證明方法準(zhǔn)確度較高。同時本文對葡萄糖的定值結(jié)果進行了全面的不確定度評定,總的不確定度在1%以內(nèi),符合人體血清葡萄糖測定的參考方法的要求。 本文提出的氣相色譜—同位素稀釋/質(zhì)譜法測定人體血清中葡萄糖的測定方法,前處理過程比較簡單,是較為準(zhǔn)確的分析方法,可作為人體血清葡萄糖測定的參考方法。 同位素稀釋質(zhì)譜技術(shù)同樣應(yīng)用于測定人體血清中氫化可的松。2006年,中國計量科學(xué)研究院化學(xué)計量與分析科學(xué)研究所參加了國際計量局物質(zhì)量咨詢委員會(CCQM)組織血清氫化可的松的國際比對CCQM-P77a,應(yīng)用液相色譜—同位素稀釋/質(zhì)譜法測定,方法精密、準(zhǔn)確,具有良好的特異性和靈敏度,測定結(jié)果與其他各國達到等效一致。
【學(xué)位單位】：北京化工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2008
【中圖分類】：R817.4
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 血清中葡萄糖的測定意義
        1.1.1 葡萄糖概述
        1.1.2 血清中葡萄糖的測定意義
    1.2 血清葡萄糖的測定方法
        1.2.1 氧化酶—偶聯(lián)比色法
        1.2.2 微電流法
        1.2.3 氧速率法
        1.2.4 已糖激酶法
        1.2.5 鄰甲苯胺法
        1.2.6 葡萄糖脫氫酶法
        1.2.7 氣相色譜—同位素稀釋/質(zhì)譜法
        1.2.8 無損技術(shù)檢測法
    1.3 血清中氫化可的松的測定意義
        1.3.1 氫化可的松概述
        1.3.2 血清中氫化可的松的測定意義
    1.4 血清中氫化可的松的測定方法
        1.4.1 放射免疫法
        1.4.2 酶分析法
        1.4.3 化學(xué)發(fā)光法
        1.4.4 熒光光度法
        1.4.5 高效液相色譜法
        1.4.6 同位素稀釋質(zhì)譜法
    1.5 本課題研究的目的和意義
第二章 氣相色譜—同位素稀釋/質(zhì)譜法測定血清葡萄糖
    2.1 儀器、試劑與實驗材料
        2.1.1 儀器
        2.1.2 血清樣品
        2.1.3 試劑
    2.2 溶液配制及樣品預(yù)處理
        2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
        2.2.2 樣品預(yù)處理
    2.3 實驗條件選擇
        2.3.1 蛋白沉淀試劑或除去裝置的選擇
        2.3.2 葡萄糖標(biāo)記物穩(wěn)定性考察
        2.3.3 血清蛋白沉淀離心條件選擇
        2.3.4 衍生條件的選擇
        2.3.5 色譜、質(zhì)譜條件的優(yōu)化
    2.4 測定與計算方法的選擇
    2.5 結(jié)果與討論
        2.5.1 方法的線性范圍
        2.5.2 檢測限與定量限
        2.5.3 單點法測定葡萄糖濃度
        2.5.4 標(biāo)準(zhǔn)交叉測定實驗
        2.5.5 方法驗證
第三章 氣相色譜—同位素稀釋/質(zhì)譜法測定血清葡萄糖的不確定度分析
    3.1 隨機因素產(chǎn)生的不確定度
    3.2 非隨機因素產(chǎn)生的不確定度
        3.2.1 重復(fù)測定產(chǎn)生的不確定度
        3.2.2 稱量的不確定度
        3.2.3 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度的不確定度
    3.3 不確定度一覽表
    3.4 測定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)不確定度
    3.5 測量結(jié)果的擴展不確定度
    3.6 測量結(jié)果的表達
第四章 血清氫化可的松測定的國際比對——CCQM-P77a
    4.1 儀器、試劑與實驗材料
        4.1.1 儀器
        4.1.2 比對血清樣品
        4.1.3 試劑
    4.2 血清中氫化可的松的測定方法
        4.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
        4.2.2 流動相的配制
        4.2.3 其他溶液配制
        4.2.4 比對樣品預(yù)處理
        4.2.5 色譜質(zhì)譜條件
        4.2.6 測定及計算方法
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 測定結(jié)果與不確定度分析
        4.3.2 測量結(jié)果的表達
        4.3.3 各實驗室比對結(jié)果
第五章 結(jié)論
參考文獻
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
作者和導(dǎo)師介紹

【參考文獻】

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本文編號：2837832