目的評價甲狀腺細針穿刺細胞學(FNAB)聯(lián)合BRAF V600E基因檢測對甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性鑒別的診斷價值。方法總結(jié)經(jīng)手術(shù)病理證實的64個甲狀腺結(jié)節(jié)術(shù)前超聲引導下細針穿刺細胞學檢查和BRAF V600E基因檢測的資料,以手術(shù)后組織病理學結(jié)果作為甲狀腺結(jié)節(jié)性質(zhì)的診斷金標準,分析FNAB、BRAF V600E基因檢測以及兩者聯(lián)合診斷的價值。結(jié)果 62例患者64個結(jié)節(jié)(2例雙側(cè))接受手術(shù)處理,其中共有44個結(jié)節(jié)檢測到BRAF V600E突變,43個結(jié)節(jié)術(shù)后病理為甲狀腺乳頭狀癌,1個術(shù)后病理為結(jié)節(jié)性甲狀腺腫。在44個檢測到BRAF V600E突變結(jié)節(jié)中,FNAB診斷惡性28個,良性6個,無法確定性質(zhì)10個。在20個未檢測到BRAF V600E突變結(jié)節(jié)中,FNAB診斷惡性5個,良性3,無法確定性質(zhì)12個,術(shù)后病理14個甲狀腺乳頭狀癌,4個結(jié)節(jié)性甲狀腺腫,1個亞急性甲狀腺炎,1個甲狀腺腺瘤。共57個甲狀腺乳頭狀癌中,檢查到BRAF V600E基因突變有43個,突變率為75.4%。與手術(shù)病理金標準比較,FNAB判斷甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、正確率分別是78.9%、85.7%、97.8%、33.3%、79.7%;BRAF V600E基因檢測判斷甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、正確率分別是75.4%、85.7%、97.7%、30.0%、76.6%;FNAB聯(lián)合BRAF V600E基因檢測判斷甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、正確率分別是94.7%、71.4%、96.4%、62.5%、92.2%。采用Mc Nemar配對資料χ2檢驗比較FNAB、FNAB聯(lián)合BRAF基因檢測兩種診斷方法的差別,P0.001,兩者差異有顯著統(tǒng)計學意義。結(jié)論對FNAB無法明確性質(zhì)的甲狀腺結(jié)節(jié),輔助聯(lián)合BRAF V600E基因檢測,可以提高甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性診斷的準確性。
【部分圖文】：

介入放射學雜志2017年7月第26卷第7期JInterventRadiol2017，Vol．26，No．7表1132個甲狀腺結(jié)節(jié)FNAB及BRAF基因檢測結(jié)果（個）FNABBRAF基因合計未突變突變不能診斷516良性病變41849非典型病變22426濾泡性腫瘤202可疑惡性7714惡性腫瘤72835合計8448132①穿刺前定位；②針尖穿刺至病灶內(nèi)圖1穿刺方法①BRAFV600E測序為野生型，未發(fā)生突變；②BRAFV600E測序為突變型，檢測到突變圖2BRAFY600E測序結(jié)果ForReportingThyroidCytopathology，TBSRTC）［2］：Ⅰ級為無法明確診斷或細胞成分不足；Ⅱ級為良性病變；Ⅲ級為意義不明確的細胞異型性或濾泡性病變；Ⅳ級為濾泡性腫瘤或可疑濾泡性腫瘤；Ⅴ級為可疑甲狀腺癌；Ⅵ級為甲狀腺癌。BRAFV600E基因檢測方法：DNA提取和DNA擴增分別采用組織提取試劑盒和巢式PCR。具體如下：使用QIAampDNAMiniKit試劑盒（QIAGEN公司，德國）從細胞液基瓶里提取基因組DNA，操作參考試劑盒說明書進行。對提取好的DNA進行PCR擴增，引物由實驗室自行設(shè)計，如下：TCTTCATAAT-GCTTGCTCTGATAGG、TCTAGTAACTCAGCAGCA-TCTCA、M13F-TCATAATGCTTGCTCTGATAGGA、M13R-GGCCAAAAATTTAATCAGTGGA。PCR反應(yīng)體系為25μl：模板DNA2μl，Q5TMMasterMix（生產(chǎn)商：NEB）12.5μl，H2O5.5μl，引物混合物（巢式A輪和B輪正反向引物均為1∶1混合，濃度為5pmol/μl）5μl。PCR反應(yīng)條件：巢式A輪：98°C預(yù)變性30s，然后98°C10s，58°C30s，72°C1min，30個循環(huán)，最后72°C延伸5min；巢式B輪：加入2.0μl巢式A產(chǎn)物，98°C預(yù)變性30s，然后98°C10s，62°C30s，72°C1min，35個循環(huán)，最后72°C延伸5min。PCR產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳鑒定后純化，將純化的PCR產(chǎn)物進行測序。最后采用Sequencer軟件進行初步分析?

介入放射學雜志2017年7月第26卷第7期JInterventRadiol2017，Vol．26，No．7表1132個甲狀腺結(jié)節(jié)FNAB及BRAF基因檢測結(jié)果（個）FNABBRAF基因合計未突變突變不能診斷516良性病變41849非典型病變22426濾泡性腫瘤202可疑惡性7714惡性腫瘤72835合計8448132①穿刺前定位；②針尖穿刺至病灶內(nèi)圖1穿刺方法①BRAFV600E測序為野生型，未發(fā)生突變；②BRAFV600E測序為突變型，檢測到突變圖2BRAFY600E測序結(jié)果ForReportingThyroidCytopathology，TBSRTC）［2］：Ⅰ級為無法明確診斷或細胞成分不足；Ⅱ級為良性病變；Ⅲ級為意義不明確的細胞異型性或濾泡性病變；Ⅳ級為濾泡性腫瘤或可疑濾泡性腫瘤；Ⅴ級為可疑甲狀腺癌；Ⅵ級為甲狀腺癌。BRAFV600E基因檢測方法：DNA提取和DNA擴增分別采用組織提取試劑盒和巢式PCR。具體如下：使用QIAampDNAMiniKit試劑盒（QIAGEN公司，德國）從細胞液基瓶里提取基因組DNA，操作參考試劑盒說明書進行。對提取好的DNA進行PCR擴增，引物由實驗室自行設(shè)計，如下：TCTTCATAAT-GCTTGCTCTGATAGG、TCTAGTAACTCAGCAGCA-TCTCA、M13F-TCATAATGCTTGCTCTGATAGGA、M13R-GGCCAAAAATTTAATCAGTGGA。PCR反應(yīng)體系為25μl：模板DNA2μl，Q5TMMasterMix（生產(chǎn)商：NEB）12.5μl，H2O5.5μl，引物混合物（巢式A輪和B輪正反向引物均為1∶1混合，濃度為5pmol/μl）5μl。PCR反應(yīng)條件：巢式A輪：98°C預(yù)變性30s，然后98°C10s，58°C30s，72°C1min，30個循環(huán)，最后72°C延伸5min；巢式B輪：加入2.0μl巢式A產(chǎn)物，98°C預(yù)變性30s，然后98°C10s，62°C30s，72°C1min，35個循環(huán)，最后72°C延伸5min。PCR產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳鑒定后純化，將純化的PCR產(chǎn)物進行測序。最后采用Sequencer軟件進行初步分析?

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 徐偉銘;楊佩濃;袁秋琦;;細針穿刺細胞學與BRAF基因突變對甲狀腺結(jié)節(jié)的診斷價值[J];現(xiàn)代實用醫(yī)學;2016年05期

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【共引文獻】

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3 王江s

本文編號：2817868