原發(fā)性肝癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)是我國最常見的惡性腫瘤之一,由于HCC早期癥狀隱匿,合并肝硬化的發(fā)生率極高,肝功能儲備差,病人就診時多屬中晚期,手術(shù)切除率較低,且切除后復(fù)發(fā)率較高。因此,肝癌的早期診斷與治療面臨著巨大的挑戰(zhàn)。本實驗通過給予SD大鼠持續(xù)小劑量二乙基亞硝胺(Diethylnitrosamine, DENA)自由飲用的方法,建立與人類肝癌發(fā)生發(fā)展病程類似的動物模型,并動態(tài)分析誘癌過程中不同時期肝臟病變組織中Kupffer細胞吞噬超順磁性氧化鐵(Superparamagnetic iron oxide, SPIO)示蹤劑后的MR成像表現(xiàn)和病理學(xué)對照,研究肝硬化肝癌誘發(fā)過程中不同病變組織內(nèi)SPIO分布變化,不但能評估Kupffer細胞的功能,而且對肝臟彌漫性病變的早期診斷、肝臟惡性病變的檢出及用于分子影像學(xué)研究具有重要的臨床價值和意義。本研究主要包括三部分。 第一部分：SD大鼠肝硬化肝癌模型的建立及SPIO增強前后MR成像表現(xiàn) 目的：建立大鼠肝硬化肝癌模型,研究肝硬化背景下SPIO增強前后肝癌檢出率。 方法：30只雄性SD大鼠隨機分成2組：實驗組20只,予生理鹽水配制濃度為0.1mg/ml的DENA水溶液自由飲用,給藥12周后改為空白飲用水。對照組10只,整個實驗過程均飲用滅菌生理鹽水。20周后隨機抽取大鼠先行MRI T1WI、T2WI、T2*WI平掃,再注入SPIO1h后增強掃描,計算不同肝臟組織的相對信號強度比(SIR)、肝臟和病灶的對比噪聲比(CNR)及肝臟組織信號強度下降百分比(PSIL),取大于2mm的結(jié)節(jié)性病灶統(tǒng)計MRI增強前后各序列和病理檢出數(shù)；觀察MRI征象,標本行HE染色分析。 結(jié)果：實驗組大鼠肝功能指標ALT及AST[分別為(130.43±8.83)和(415.00±55.44)U/L]較對照組[分別為(39.57±7.25)和(132.93±39.03)U/L顯著升高(P0.001)。平掃T1WI上肝癌結(jié)節(jié)信號表現(xiàn)為稍低、等及稍高信號,部分病灶因出血、壞死而呈更低或高低混雜信號影,檢出率為46.88%；T2WI上肝癌表現(xiàn)為高、稍高信號及混雜信號,可以很好的顯示,檢出率達84.38%;T2*WI上肝癌檢出率為53.13%,信號主要表現(xiàn)為等及稍高信號；三者間總的檢出率之間有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。注入SPIO后1h增強掃描,T1WI上肝癌檢出率為71.88%,T2WI為94.79%,T2*WI為91.67%,三者間檢出率之間有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),但增強前后T2WI上肝癌檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),T1WI及T2*WI增強前后肝癌檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。各序列上肝臟組織的相對信號強度比(SIR)均較平掃時降低(P0.001),肝癌組織增強前后SIR無明顯變化(P0.05)；其肝臟組織信號強度下降百分比(PSIL)T2*WI序列最大,T2WI序列次之,T1WI序列最小,三者間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001),肝癌組織在各序列PSIL差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。各序列上肝臟與病灶的對比噪聲比(CNR)較增強前明顯提高,增強前后差值有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論：二乙基亞硝胺誘發(fā)SD大鼠肝硬化肝癌的模型與人類肝硬化肝癌的發(fā)生發(fā)展過程較為類似,通過SPIO增強MR掃描能有效增強肝臟腫瘤與正常肝組織的信號強度比,可提高肝硬化背景下小肝癌的檢出率。 第二部分：SPI0增強MRI評估大鼠肝硬化肝癌形成過程中Kupffer細胞功能的實驗研究 目的：探討大鼠肝硬化肝癌形成不同時期各病變組織SPIO增強后MR信號改變與藍染Kupffer細胞之間的關(guān)系。 方法：30只雄性SD大鼠,分別建立單純性肝硬化模型10只,肝硬化肝癌模型10只,正常對照組10只,分別行SPIO增強前后T2WI及T2*WI掃描,計算肝臟組織信號強度下降百分比(PSIL),標本行HE及普魯士蘭(Perl's)染色,分析病灶增強后信號變化與藍染Kupffer細胞數(shù)量之間的關(guān)系。 結(jié)果：注入SPIO1h后增強掃描,正常肝組織在各序列信號明顯均勻下降,單純性肝硬化組織較正常肝組織輕度均勻下降,癌旁肝硬化組織不均勻下降,而肝癌組織信號無明顯改變；在同一序列不同病變組織間PSIL比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001),其中正常肝組織在各序列上PSIL值最大,單純性肝硬化組織及癌旁肝硬化組織依次之,肝癌組織PSIL最小。普魯士藍染色顯示正常肝組織藍染顆粒數(shù)量最多,肝硬化組織藍染顆粒較正常肝組織稍減少,但兩者間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),癌旁肝硬化組織藍染顆粒較上述組織減少,肝癌組織有少許甚至無藍染顆粒。4種不同肝臟組織間藍染顆粒數(shù)量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。不同肝臟組織SPIO增強后MR各序列信號變化與組織中的藍染顆粒數(shù)呈線性相關(guān)趨勢,并具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。 結(jié)論：通過SPIO增強MR檢查不但能間接反映不同病變組織中Kupffer細胞數(shù)量及功能狀態(tài)變化,而且對肝臟彌漫性病變的早期診斷、肝臟惡性病變的檢出具有重要的臨床價值和意義。 第三部分：運用MRI評估超順磁性氧化鐵納米粒在肝硬化肝癌組織中分布變化的實驗研究 目的：研究超順磁性氧化鐵納米粒(SPIO)作為MRI對比劑在肝硬化肝癌組織中分布變化情況,探討其用于分子靶向成像的可行性。 方法：建立肝硬化肝癌模型25只,對照組10只。于20周后先進行MR T2WI及T2*WI平掃,再注入SPIO后1小時、24小時、48小時、72小時及96小時分別行MR增強掃描,每一時段5只,每一時段大鼠掃描完成后立即處死。同理,空白對照組每一時段取2只。分析MR圖像,取肝臟標本進行HE和普魯士藍染色病理學(xué)檢查。 結(jié)果：正常肝組織及癌旁肝硬化組織,注入SPIO后1h增強掃描,各序列上肝臟組織信號明顯下降,24h肝臟組織信號強度下降百分比(PSIL)達到最大,48h、72h及96h后均下降,下降程度依次減低,五者間其PSIL差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001),其中24h正常肝組織信號下降程度最大；而20W肝癌組織,注入SPIO各時段其信號無明顯變化,PSIL差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。普魯士藍染色顯示正常肝組織及肝硬化組織藍染的Kupffer細胞數(shù)在24h達到最多,后逐步減少,正常肝組織減少幅度最大,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)；部分高分化肝癌組織散在少許藍染的Kupffer細胞,低分化肝癌組織內(nèi)無藍染細胞。 結(jié)論：通過MR掃描動態(tài)觀察SPIO分布變化情況,不僅可用于肝臟惡性病變的檢出,而且具有將SPIO作為MRI對比劑用于分子靶向成像的潛能。
【學(xué)位單位】：揚州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2013
【中圖分類】：R735.7;R445.2

【參考文獻】

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本文編號：2816096