【摘要】： 研究目的 本課題以固體脂質(zhì)納米粒(SLN)為載體,負(fù)載釓噴替酸葡甲胺(Gd-DTPA)而制備納米化MR對比劑。通過納米化MR對比劑直腸給藥后,大腸壁吸收納米化對比劑后于T1WI的MR上增強顯示及有助于大腸癌的顯示,以建立基于固體脂質(zhì)體納米粒的新型MR大腸成像方法。 材料與方法 1.主要以硬脂酸及Gd-DTPA為原料,采用乳化-溶劑揮發(fā)法合成Gd-DTPA-SLN、FITC-Gd-DTPA-SLN及SLN三種納米粒,并對納米粒進(jìn)行檢測、體外釋放及體外MR成像。 2.基于納米化對比劑的正常小鼠大腸MR成像方法的建立及組織細(xì)胞學(xué)定位30只正常小鼠隨機分5組(Gd-DTPA-SLN、FITC-Gd-DTPA-SLN、SLN、Gd-DTPA及水),每組各6只。分別進(jìn)行小鼠乙狀結(jié)腸及直腸灌藥前、保留灌腸中及灌藥后20分鐘MR掃描。測量每只動物灌藥前后大腸壁的T1值及大腸壁與周圍正常肌肉C及CNR。此外,選擇2只正常小鼠進(jìn)行靜脈注射Gd-DTPA作為對照。最后處死動物,取正常大腸壁進(jìn)行組織細(xì)胞學(xué)分析。 3.基于納米化對比劑的大腸癌MR成像方法的初步應(yīng)用2只大腸癌小鼠乙狀結(jié)腸及直腸灌藥(Gd-DTPA-SLN)前、保留灌腸中及灌藥后20分鐘MR掃描。然后處死動物,取正常大腸壁進(jìn)行組織學(xué)分析。 結(jié)果 1.采用乳化-溶劑揮發(fā)法合成Gd-DTPA-SLN、FITC-Gd-DTPA-SLN及SLN三種納米粒平均粒徑40.8nm-300.8nm,Gd-DTPA-SLN及FITC-Gd-DTPA-SLN中Gd-DTPA包封率分別為55.8%和55%。Gd-DTPA-SLN納米粒在pH7.4的PBS中1h釋放約32%,8h才達(dá)到平衡。體外MR成像顯示Gd-DTPA-SLN、FITC-Gd-DTPA-SLN中的Gd-DTPA與Gd-DTPA溶液中T1馳豫時間相當(dāng)。 2.基于納米化對比劑的正常小鼠大腸MR成像方法的建立及組織細(xì)胞學(xué)定位Gd-DTPA-SLN及FITC-Gd-DTPA-SLN納米粒保留灌腸T1WI的MR可以獲得與Gd-DTPA保留灌腸MR成像類似的明腔MR結(jié)腸成像。由Gd-DTPA-SLN納米粒及FITC-Gd-DTPA-SLN納米粒保留灌腸20分鐘后T1WI的FLAIR的MR圖像與保留灌腸前相比,所有小鼠大腸壁全層明顯均勻強化,然而SLN納米粒、Gd-DTPA及蒸餾水對照組小鼠大腸壁信號強度則無明顯變化。與MR圖像一致,Gd-DTPA-SLN納米粒及FITC-Gd-DTPA-SLN納米粒組大腸壁T1馳豫時間保留灌腸20分鐘后較灌腸前明顯降低,而大腸壁與周圍正常肌肉C及CNR保留灌腸20分鐘后較灌腸前明顯升高。FITC-Gd-DTPA-SLN保留灌腸20分鐘后大腸壁熒光顯微鏡及激光共聚焦熒光顯微鏡顯示大腸壁各層細(xì)胞核外部分包括細(xì)胞漿及細(xì)胞外間隙內(nèi)均勻分布的由FITC發(fā)射的高濃度綠熒光。Gd-DTPA-SLN、SLN、Gd-DTPA及蒸餾水組保留灌腸20分鐘后大腸壁內(nèi)未見熒光物質(zhì)。對照組則未見上述MR及組織細(xì)胞學(xué)表現(xiàn)。 3.基于納米化對比劑的大腸癌MR成像方法的初步應(yīng)用Gd-DTPA-SLN保留灌腸中T1WI的MR成像可以獲得腫瘤明腔MR結(jié)腸成像。Gd-DTPA-SLN保留灌腸20分鐘后T1WI的MR成像檢查顯示正常腸壁明顯均勻強化,而大腸癌病灶的主體部分強化程度較輕,病灶與正常腸壁對比鮮明。 結(jié)論 1.采用乳化-溶劑揮發(fā)法合成負(fù)載Gd-DTPA的固體脂質(zhì)體納米粒具備腸道易吸收、Gd-DTPA負(fù)載量大及包封率高、粒徑適宜及不改變Gd-DTPA的高順磁性等特點。 2.本研究發(fā)揮MR及納米技術(shù)的優(yōu)勢而建立了基于納米的新型大腸成像方法,其主要特點:經(jīng)直腸給藥,而不需要靜脈用藥;一次灌藥后可以獲得明腔大腸MR成像及大腸壁吸收增強成像;FITC-Gd-DTPA-SLN納米粒即可用于MR成像,又可用于組織細(xì)胞學(xué)的定位;納米顆粒進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而實現(xiàn)細(xì)胞水平的顯像;可能實現(xiàn)大腸吸收功能的評價。 3.基于固體脂質(zhì)體納米粒的新型MR大腸成像方法在大腸癌中的初步應(yīng)用表明該方法具有可行性并有助于腫瘤病變的顯示。 4.基于納米化對比劑MR大腸成像方法的建立還可能成為結(jié)腸定位釋藥系統(tǒng)的新型體內(nèi)評價方法。 5.臨床上所用的3T MR掃描儀配置一小鼠專用線圈完全可以應(yīng)用小鼠腹盆腔成像,并可獲得高質(zhì)量的MR圖像。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R445.2
【圖文】：

及FITC一Gd一DT隊一SLN中Gd一DTPA包封率高，分別為55.8%和55%。從外觀上看，Gd一DT隊一SLN納米粒與空白SLN納米粒凍干粉劑均為乳白色，F(xiàn)ITC一Gd一DTPA一SLN納米粒因加入了ODA一FITC呈現(xiàn)黃色(圖4)。Gd一DTPA一SLN納米粒在電鏡下表現(xiàn)為圓形的高電子密度影(圖5)o納米粒的體外釋放試驗結(jié)果(圖6)表明，Gd一DTPA一sLN納米粒在pH7.4的PBS中，lh內(nèi)約釋放32%，4h內(nèi)釋放58.4%，在8h后呈現(xiàn)緩慢釋放的趨勢。表1各種固體脂質(zhì)納米粒的理化特性納米粒表面電位包封率、.少 1nOC

本文編號：2784369