發(fā)布時(shí)間：2020-07-23 19:38

【摘要】：目的放射性肺損傷是胸部腫瘤放射治療后常見的并發(fā)癥，其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，一旦出現(xiàn)，可引起嚴(yán)重的呼吸衰竭甚至死亡，至今仍無有效的防治措施。因此，對(duì)放射性肺損傷的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行深入研究，積極尋找有效的防治方法顯得尤為重要。本研究通過建立小型豬放射性肺損傷模型，觀察放射線對(duì)肺組織形態(tài)以及SP-A、SP-D表達(dá)的影響，運(yùn)用腫節(jié)風(fēng)進(jìn)行干預(yù)，研究其可能的防護(hù)機(jī)制。 方法（1）本實(shí)驗(yàn)采用雄性巴馬小型豬作為研究對(duì)象，共60頭，隨機(jī)分為空白組（作為對(duì)照）、單照組（單純放射）和藥照組（腫節(jié)風(fēng)+單純照射）三個(gè)大組，每組20頭，每大組又隨機(jī)分為a、b、c、d四個(gè)平行小組，每小組5頭。藥照組在照射前7天持續(xù)給予腫節(jié)風(fēng)配方顆粒（0.3g/kg/d）溶液和飼料灌服，直至肺組織的取出，空白組及單照組則給予等量的生理鹽水。單照組和藥照組均采用單次劑量15Gy60COγ射線對(duì)右胸進(jìn)行照射，空白組在同條件下給予0Gy射線照射。a、b、c、d四個(gè)平行小組分別在照射后4周、8周、12周、24周取右側(cè)肺組織，稱重后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。（2）分別行HE、Masson染色觀察肺組織病理變化和膠原纖維沉積，免疫組化法測(cè)定肺組織TGF-β1的表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸附發(fā)（ELISA）檢測(cè)肺組織SP-A、SP-D蛋白的含量，實(shí)時(shí)熒光定量PCR法（FQ-PCR）測(cè)定肺組織SP-A mRNA、SP-D mRNA的表達(dá)。觀察肺組織形態(tài)及各組指標(biāo)的變化情況，以探討放射性肺損傷的可能機(jī)制及腫節(jié)風(fēng)的防護(hù)作用。 結(jié)果（1）大體變化：空白組肺組織呈淡紅色，質(zhì)軟，有彈性，照射后第4周，肺組織充血腫脹，隨著照射時(shí)間的增加，肺組織顏色逐漸變暗，局部有瘀斑形成，直至照射后第24周，肺組織體積萎縮，質(zhì)地變硬；（2）病理變化：空白組肺組織結(jié)構(gòu)清晰，無炎性細(xì)胞浸潤，照射后第4周肺組織改變以滲出、水腫為主，第8、12周主要表現(xiàn)為成纖維細(xì)胞增生，血管壁破壞，第24周肺組織有大量纖維化形成；上述大體和病理，藥照組肺組織變化均比單照組有所減輕；（3）免疫組化結(jié)果：四個(gè)時(shí)間點(diǎn)單照組TGF-β1表達(dá)明顯高于空白組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），在第8、12、24周三個(gè)時(shí)間點(diǎn)，藥照組TGF-β1表達(dá)均低于單照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。單照組和藥照組第12、24周TGF-β1表達(dá)分別高于同組第4周，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。（4）ELISA結(jié)果：同一時(shí)間點(diǎn)，肺組織SP-A、SP-D蛋白含量均表現(xiàn)為空白組藥照組單照組，兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；單照組和藥照組SP-A、SP-D蛋白含量隨時(shí)間的變化逐漸遞減，組內(nèi)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。（5）FQ-PCR結(jié)果：同一時(shí)間點(diǎn)，肺組織SP-A mRNA和SP-D mRNA表達(dá)量均表現(xiàn)為空白組藥照組單照組，兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；單照組和藥照組SP-A mRNA、SP-D mRNA表達(dá)量隨時(shí)間的變化逐漸遞減，組內(nèi)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論（1）運(yùn)用單次劑量15Gy60COγ射線成功建立起小型豬放射性肺損傷模型。（2）SP-A、SP-D參與了放射性肺損傷的發(fā)生、發(fā)展過程，電離輻射可能通過損傷肺Ⅱ型上皮細(xì)胞以及打破肺炎癥介質(zhì)/抗炎癥介質(zhì)平衡使肺內(nèi)SP-A、SP-D含量降低。（3）腫節(jié)風(fēng)能夠提高肺內(nèi)SP-A、SP-D的含量，從而對(duì)放射性肺損傷起到防護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R730.55
【圖文】：

8周 12周 時(shí)間圖 2-2 各組小型豬 SP-D 含量變化柱ig2-2 The histogram of SP-D content on the m果檢測(cè)及產(chǎn)物的鑒定RNA 經(jīng)分光光度計(jì)檢測(cè)純度均在。內(nèi)參 β-actin 和目的基因 SP-A小與預(yù)先設(shè)計(jì)的引物大小一致 SP-A 產(chǎn)物大小為 163bp，目的基因產(chǎn)物電泳結(jié)果見圖 2-3。M β-actin SP-A SP-D

β-actin的擴(kuò)增曲線和融解曲線

注：左圖為擴(kuò)增曲線，右圖為融解曲線圖 2-4 β-actin 的擴(kuò)增曲線和融解曲線Fig2-4 Amplification curve and melting curve of β-actin

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2767755