【摘要】： 題目:~(99m)Tc-TRODAT-1顯像診斷帕金森病的實驗研究 目的:研究多巴胺轉運蛋白(DAT)顯像劑~(99m)Tc-2β-[N,N’-雙(2-巰乙基)乙撐二胺基]甲基,3β-(4-氯苯基)托烷( ~(99m)Tc-TRODAT-1)用于帕金森病(PD)早期診斷的價值。 方法:實驗(一)動物模型的制作:將SD大鼠分成三組:①正常組30只。②單側PD模型組:本研究將40μg6-羥基多巴注射到65只SD大鼠一側紋狀體制作單側PD動物模型,采用阿樸嗎啡(APO)誘導旋轉實驗,觀察術后1,7,14,21d行為學變化。采用阿樸嗎啡誘導旋轉實驗,注射5min后用旋轉檢測儀記錄動物40min內的旋轉情況(旋轉次數(shù)以大鼠向對側不改變方向旋轉3600為一次計算標準),每次旋轉次數(shù)達7圈以上為成功的PD模型鼠。③多發(fā)性腔梗模型組:頸動脈注射自體血栓術,觀察術后行為學變化。對22只大鼠做了處理,成模標準為大鼠行動遲緩,呆滯,出現(xiàn)逆時針繞圈(追尾現(xiàn)象),旋轉次數(shù)少于6次/min為標準。實驗(二)單側PD模型組的病理學研究:利用免疫組織化學觀察單側PD模型組(術后1、7、14、21d)各時間點黑質形態(tài)學變化。對單側PD模型組(術后14d)健側及毀損側紋狀體行電鏡觀察分別(含正常組對比實驗)。實驗(三)三組大鼠的核醫(yī)學及影像學研究:于24只正常SD大鼠尾靜脈注入37MBq(2ml)~(99m)Tc-TRODAT-1,注射后0.5,1.0,2.0,4.0h后,取出血、心、肺、腎、肝、紋狀體、小腦、海馬、大腦皮質稱重,測放射性計數(shù),計算體內放射性分布百分比(%ID/organ)以及紋狀體與小腦(ST/CB)攝取比值。于16只單側PD模型鼠(毀損術后14d)尾靜脈注入37MBq(2ml)~(99m)Tc-TRODAT-1,注射后0.5,1.0,2.0,4.0h后,取出紋狀體毀損側及健側稱重,測放射性計數(shù),計算兩者的攝取比值,多發(fā)性腔梗模型組(無特殊時間要求,本實驗為術后14d,注射后測量時間同前)做與PD模型組同樣的處理。將74MBq(2ml) ~(99m)Tc -TRODAT-1從尾靜脈注入三組實驗動物(PD模型8只,正常組4只,腔梗1只,共計12只)分別對紋狀體部行放射性自顯影(其中PD模型鼠為毀損術后1、7、14、21d),并進行析光度分析測定。對正常組及PD模型組(術后14d)行MRI顯像。 結果:實驗(一)兩種動物模型成功建立(行為學指標均符合標準)。共對65只正常大鼠做了毀損手術,有37只制成PD模型;共對22只正常大鼠做了注射血栓處理,成模16只。實驗(二)免疫組織化學觀察,陽性細胞(多巴胺神經元細胞)明顯減少,在毀損術后1、7、14、21d分別損失55%,55-65%,75-85%,85%,于行為學觀察結果基本一致。電鏡圖片示于PD模型毀損側圖中清晰可見毀損的多巴胺神經元細胞。(三)三組大鼠的核醫(yī)學及影像學研究:正常大鼠腦內及體內分布實驗結果,紋狀體與小腦、海馬和大腦皮質的放射性攝取的相互比值分別為1.74,1.26,1.15;2.38, 1.76,2.06;4.25, 2.55,3.10;3.01,2.17,2.45(注射后0.5,1.0,2.0,4.0h),表明紋狀體明顯攝取~(99m)Tc-TRODAT-1。PD模型鼠分布實驗表明毀損側紋狀體放射性攝取較健側明顯減少,并隨毀損時間延長日趨明顯。放射性自顯影結果表明正常大鼠在紋狀體內的攝取明顯高于大腦皮質自顯影(圖片上在紋狀體區(qū)只可見額葉皮質),兩者比值為2.52,正常大鼠兩側紋狀體比值為1.02,無明顯差異,多發(fā)性腔梗模型大鼠結果與正常組相同。PD模型大鼠(術后1、7、14、21d,注射后2h)健側的攝取明顯高于毀損側比值為2.19,2.51,4.12,5.21。MRI顯像中,正常組與PD模型組圖像結果無明顯差別。 結論:兩種制作模型的方法可靠,成模率高。~(99m)Tc-TRODAT-1顯像劑體外穩(wěn)定,制備方便,安全可靠,特異性強,因此~(99m)Tc-TRODAT-1 SPECT腦顯像能為PD早期診斷提供了有利依據(jù)。
【學位授予單位】：東南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R742.5;R817.4
【圖文】：

圖 899mTc-TRODAT-1 的分子結構99mTc-TRODAT-1 放射性同位素標記后的保留時間為 13~15 分鐘，放化純度≥90%。Mozley 等[12]對 99mTc-TRODAT-1 在人體內生物學分布及劑量測定研究后發(fā)現(xiàn)，靜脈注射（370±16）MBq[(10.0±0.42)mCi] 99mTc-TRODAT-1 對健康志愿者的作用是安全的。認為它可能是腦 DA 顯像的一個安全有效的示蹤劑。99mTc-TRODAT-M 是 99mTc-TRODAT-1 的 4-甲苯基衍生物，常和 99mTc-TRODAT-1 共存，傳統(tǒng)上是間接利用 X 線衍射分析，可以定量在克單位。Vanbilloen HP 等[32]發(fā)展一種方便實用的反義高效液相色譜法，做為分離和提純的有效方法。99mTc-TRODAT-1 有 2 種異構體（分子立體結構見圖 9），異構體 A 脂溶性好，首次入腦量高，但與 DAT 的親和力弱；異構體 B 脂溶性差，首次入腦量低，但與 DAT 的親和力高。狒狒腦 DAT 顯像表明，影像質量單純異構體 A 或異構體 B 都不如99mTc-TRODAT-1 混合物好[33~34]。

圖 1 PD 模型鼠的制作過程型的建立模型的制作續(xù)注入自體血栓術：10％戊巴比妥腹腔注射頸外動脈、右頸總動脈，分離右頸內動脈，模型的行為學觀察行動遲緩，呆滯，出現(xiàn)逆時針繞圈（追尾現(xiàn)D 動物模型的病理學實驗

【參考文獻】

相關期刊論文 前5條

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本文編號：2735158