黃芪超濾物對(duì)H22腹水瘤小鼠重離子放療的增敏作用及機(jī)制探討
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【摘要】:目的:本實(shí)驗(yàn)旨在觀察黃芪超濾物(ultra-filtration extract mixture from Astragalus Mongholicus,UEMAM)對(duì)H22腹水瘤小鼠重離子放療的增敏作用及其相關(guān)的作用機(jī)制,為UEMAM聯(lián)合重離子放療治療惡性腹水提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法:1:制備惡性腹水瘤小鼠模型后隨機(jī)分為4組,分別按50、100、150mg/kg/d的UEMAM和等體積生理鹽水(NS)灌胃成模小鼠,觀察各組小鼠日常生活狀態(tài),統(tǒng)計(jì)各組小鼠腹圍、體重、腹水量及生存期,計(jì)算腹水抑制率及生命延長率,以確定最佳后續(xù)試驗(yàn)的UEMAM干預(yù)劑量。2:制備惡性腹水瘤小鼠模型后隨機(jī)分為4組,即對(duì)照組、UEMAM組、放療組及UEMAM加放療組,分別給予等體積生理鹽水灌胃、UEMAM灌胃、6Gy12C6+離子束外照射及UEMAM聯(lián)合6Gy12C6+離子束外照射處理。觀察各組小鼠日常生活狀態(tài),統(tǒng)計(jì)各組小鼠腹圍、體重、腹水量及生存期,計(jì)算腹水抑制率及生命延長率。并進(jìn)一步采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)各組H22腹水瘤細(xì)胞的凋亡率;單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)(SCGE)觀察各組腹水瘤細(xì)胞DNA損傷情況;聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(PCR)及免疫印跡法(WB)檢測(cè)P53、Bax、Bcl-2及Cleaved Caspase-3在基因及蛋白水平上的表達(dá)情況。結(jié)果:1:UEMAM低、中、高劑量組與對(duì)照組小鼠比較,中、高劑量組的UEMAM均可以有效抑制惡性腹水的生成,提高腹水瘤小鼠的生活質(zhì)量,延長腹水瘤小鼠的生存期,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而低劑量組與對(duì)照組小鼠比較,差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。此外,中、高劑量組比較,二者差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),故選則100mg·kg-1·d-1作為后續(xù)試驗(yàn)的最佳藥物劑量。2:后續(xù)實(shí)驗(yàn)中UEMAM加放療組小鼠體重、腹圍、腹水量均明顯低于其它各組(P0.05),且UEMAM加放療組小鼠生存時(shí)間最長,生命延長率最高,與其它各組比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3:FCM結(jié)果顯示各治療組小鼠腹水瘤細(xì)胞凋亡率均隨時(shí)間延長而增高,且在各時(shí)間點(diǎn)均以UEMAM加放療組凋亡率最高,與其它各組比較,差異均具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。4:SCGE結(jié)果顯示UEMAM加放療組腹水瘤細(xì)胞DNA損傷最嚴(yán)重,與其它各組比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5:PCR及WB技術(shù)檢測(cè)均顯示,與其它各組比較,UEMAM加放療組能明顯上調(diào)P53、Bax及Cleaved Caspase-3的基因及蛋白水平,下調(diào)Bcl-2的基因及蛋白水平,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:UEMAM對(duì)H22腹水瘤小鼠重離子放療具有輻射增敏作用,其增敏作用機(jī)制可能與激活P53介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡信號(hào)途徑有關(guān),通過抑制H22腹水瘤細(xì)胞損傷的DNA雙鏈修復(fù),上調(diào)P53、Bax基因及蛋白水平,下調(diào)Bcl-2基因及蛋白水平,并通過線粒體激活其下游的信號(hào)通路分子Cleaved Caspase-3的表達(dá),進(jìn)而誘導(dǎo)H22腹水瘤細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】:黃芪超濾物 12C6+離子束外照射 放射增敏
【學(xué)位授予單位】:甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R730.55
【目錄】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-8
- 縮略詞表8-9
- 前 言9-13
- 實(shí)驗(yàn)一 黃芪超濾物的制備及對(duì)H22腹水瘤小鼠作用劑量的篩選13-22
- 1.實(shí)驗(yàn)材料13-14
- 2.實(shí)驗(yàn)方法14-16
- 3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-20
- 4.討論20-21
- 5.結(jié)論21-22
- 實(shí)驗(yàn)二 黃芪超濾物對(duì)H22腹水瘤小鼠重離子放療敏感性的實(shí)驗(yàn)研究22-48
- 1.實(shí)驗(yàn)材料22-25
- 2.實(shí)驗(yàn)方法25-28
- 3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-38
- 4.討論38-46
- 5.結(jié)論46-48
- 參考文獻(xiàn)48-55
- 綜述55-63
- 1.基礎(chǔ)研究56-58
- 2.臨床研究58-59
- 3.小結(jié)59-60
- 參考文獻(xiàn)60-63
- 在校期間的研究成果63-64
- 致謝64
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:黃芪超濾物對(duì)H22腹水瘤小鼠重離子放療的增敏作用及機(jī)制探討,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
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