【摘要】：放射治療是腫瘤治療的重要的手段之一,但由于腫瘤臨近部位正常組織的放射損傷和某些腫瘤的輻射抗拒性等問題,嚴(yán)重地影響著放療的療效和應(yīng)用。腫瘤基因治療是近年來新興的一種腫瘤治療技術(shù),為腫瘤的徹底治愈帶來了可能,但由于基因轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的低靶向性和治療基因表達(dá)的不可控性,使基因治療這把雙刃劍尚不能替代傳統(tǒng)的腫瘤治療方法。腫瘤作為一種全身性疾病,其發(fā)生發(fā)展是一多因素、多步驟和多階段的復(fù)雜過程,單一療法往往難以取得滿意療效,腫瘤的綜合治療勢在必行。腫瘤基因-放射治療的提出為彌補(bǔ)放射治療與基因治療各自的弊端帶來了可能,通過將輻射誘導(dǎo)性基因的調(diào)控序列與腫瘤殺傷基因相偶聯(lián),轉(zhuǎn)染或感染腫瘤細(xì)胞后,在對腫瘤實施局部放療的同時誘導(dǎo)腫瘤殺傷基因表達(dá)的增強(qiáng),產(chǎn)生輻射和基因表達(dá)產(chǎn)物的協(xié)同抑瘤作用。該療法一方面將放療與基因治療有機(jī)地結(jié)合,發(fā)揮協(xié)同作用；另一方面,由于輻射具有靶向性和可控性,實現(xiàn)了對殺傷基因表達(dá)的時空調(diào)控。 利用具有腫瘤細(xì)胞靶向性的條件復(fù)制型腺病毒作為基因治療的載體,提高治療基因?qū)δ[瘤細(xì)胞的靶向性；利用Egr-1啟動子在電離輻射誘導(dǎo)下可啟動其下游基因表達(dá)的特性,提高治療基因表達(dá)的可控性。本實驗構(gòu)建了對腫瘤細(xì)胞具有雙重靶向的重組腺病毒質(zhì)粒pAd.Egr1-Smac-hTert-E1A(CR2)-E1Bp-E1B55K,并在HEK293細(xì)胞內(nèi)包裝成攜帶Egr-1啟動子和Smac基因的條件復(fù)制型腺病毒CRAd.pEgr1-Smac,研究其在x射線誘導(dǎo)下對MDA-MB-231細(xì)胞增殖和凋亡的影響,以及CRAd.pEgr1-Smac聯(lián)合照射對MDA-MB-231細(xì)胞中凋亡相關(guān)基因mRNA及蛋白水平表達(dá)的影響,探討其抗腫瘤作用機(jī)制。實驗結(jié)果表明,CRAd.pEgrl-Smac聯(lián)合照射對MDA-MB-231細(xì)胞具有明顯的增殖抑制和促凋亡作用,同時伴有細(xì)胞中Smac、Cyt c、caspase-9和-3 mRNA及其蛋白表達(dá)增高。這些結(jié)果提示,CRAd.pEgr1-Smac聯(lián)合照射抑制MDA-MB-231腫瘤細(xì)胞增殖的促凋亡機(jī)制,涉及線粒體途徑的Smac、Cyt c、caspase-9和-3的相互作用。本研究為提高腫瘤基因治療靶向性、可控性及放射治療的有效性,將基因-放射治療有機(jī)地聯(lián)合應(yīng)用,為腫瘤基因-放射治療的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù),為腫瘤綜合治療提供了新的思路。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R730.55

【參考文獻(xiàn)】

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1 潘志忠;林俊忠;萬德森;方m錁，

本文編號：2691522