【摘要】：目的探討肝細胞癌超聲微泡諧波造影定量分析參數(shù)，及組織中MMP-9、Endothelin-1表達水平與微波/射頻消融后復發(fā)轉移的關系，并分析二者的相關性，，尋求可能早期、無創(chuàng)且有效預測肝細胞癌治療后復發(fā)轉移的超聲造影特征參數(shù)。 資料與方法 ⑴入組條件：經(jīng)穿刺活檢病理證實的肝細胞癌患者，病灶數(shù)目為單發(fā)，病灶最大直徑≤5cm，無血管侵犯及肝外轉移，肝功能Child-Pugh分級A-B級，無嚴重心、腦、腎、血管等疾病。所有患者在進行微波/射頻治療前均未接受其它治療。本研究中所有患者均遵循自愿入組原則，術前均簽署知情同意書。 ⑵超聲造影研究：2006年3月至2012年7月在我院進行微波/射頻消融的HCC患者共計40例，治療前均行超聲造影檢查，并使用Sonoliver軟件進行定量分析，對復發(fā)組與未復發(fā)組相應指標進行統(tǒng)計學分析，篩選出與肝細胞癌復發(fā)轉移有關的超聲造影特征參數(shù)。 ⑶免疫組化檢測：微波/射頻消融前超聲引導下穿刺活檢取得HCC組織，其中22例標本行MMP-9、Endothelin-1蛋白免疫組化檢測，使用Image Pro-plus5.1軟件測量累積光密度（IOD），并對復發(fā)組和未復發(fā)組的數(shù)值進行統(tǒng)計分析。 ⑷將上述兩部分數(shù)據(jù)進行相關性分析，將肝細胞癌微波/射頻消融后復發(fā)轉移相關的超聲造影特征參數(shù)與組織MMP-9、Endothelin-1表達水平結合，篩選預測復發(fā)的指標。 結果 ⑴本研究中復發(fā)組與未復發(fā)組的人口學資料（性別，年齡等）及病毒感染狀況，術前AFP水平及腫瘤分化程度均無統(tǒng)計學差異。 ⑵超聲造影研究顯示，復發(fā)組與未復發(fā)組相比，腫瘤最大強度（tIMAX），腫瘤最大強度與實質之比（IMAXR），腫瘤上升時間（tRT），腫瘤達峰時間（tTTP）及流出時間WT等參數(shù)有顯著性差異。Logistic多因素回歸分析表明IMAXR為復發(fā)的危險因素（OR=0.111；95%CI，0.0150.838；P=0.033），IMAXR越小，治療后復發(fā)的風險越高。 ⑶免疫組化的結果顯示，復發(fā)組與未復發(fā)組肝癌組織中的MMP-9表達有統(tǒng)計學差異，復發(fā)組的肝癌組織中MMP-9的表達水平較未復發(fā)組高，而Endothelin-1的表達水平無統(tǒng)計學差異。Logistic回歸分析得出MMP-9及Endothelin-1均不是復發(fā)的危險因素。 ⑷超聲造影特征參數(shù)與組織MMP-9、Endothelin-1表達水平的相關性分析顯示，tRT，tTTP兩個參數(shù)與Endothelin-1的表達水平中度相關（相關系數(shù)分別為0.438，0.448，p＜0.05），而tIMAX，IMAXR，WT與Endothelin-1的水平無相關性。MMP-9表達水平與tRT，tTTP，WT，tIMAX，IMAXR均無相關性。 結論 ⑴腫瘤的最大強度與實質強度的比值IMAXR是復發(fā)轉移的危險因素，IMAXR越小，治療后復發(fā)的風險越高。 ⑵HCC組織中MMP-9、Endothelin-1表達水平不足以成為微波/射頻消融后復發(fā)的危險因素。 ⑶腫瘤上升時間tRT，腫瘤達峰時間tTTP與癌組織中Endothelin-1表達水平中度相關，表明超聲造影特征參數(shù)能夠在一定程度上反映腫瘤組織中血管生成相關蛋白因子的表達水平。 ⑷超聲造影既能從宏觀上反映HCC血流動力學特征，也能夠反映HCC的蛋白分子層面上的改變，有望成為監(jiān)測及預測HCC生物學行為的有力手段，為個性化干預提供指導。
【圖文】：

隨訪至 2013 年 3 月，隨訪 8 64 個月，中位隨訪時間 24 個月，截止到隨訪終止點，共 19 例患者出現(xiàn)復發(fā)，21 例患者未出現(xiàn)復發(fā)。二、實驗儀器與實驗試劑1 實驗儀器⑴ 超聲診斷儀 采用西門子公司生產(chǎn)的 Sequia512, 2.0 4.5MHz 變頻相控陣探頭（4V1）。超聲造影采用對比脈沖序列（contrast pulse sequences, CPS）。造影定量分析軟件為脫機版的 Sonoliver (TomTec Imaging Systems, UnterschleissheimGermany)。⑵ 微波治療儀 采用南京康友微波能應用研究所生產(chǎn)的 KY-2000 水循環(huán)內冷卻微波消融治療儀，微波發(fā)射頻率為 2450MHz，功率范圍 0 100W。⑶ 射頻治療儀 采用水冷射頻治療儀（Celon，德國），頻率 470±10KHz，最大輸出能量為 250W。電極內含進水管和出水管各一根，治療過程中使用蠕動泵以室溫注射用水循環(huán)冷卻。

圖 1-3 時間-強度曲線各主要參數(shù)示意圖。綠色曲線代表腫瘤的灌注曲線，黃色曲線為肝實質的灌注曲線。四、統(tǒng)計學分析數(shù)據(jù)采用 SPSS17.0 軟件（SPSS Inc.,Chicago, USA）進行分析。正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（ X±SD）表示，非正態(tài)分布的計量資料采用四分位數(shù)及四分位間距表示。正態(tài)分布的計量資料比較采用 t 檢驗或方差分析，非正態(tài)分布的計量資料比較采用秩和檢驗。非參數(shù)資料比較采用卡方檢驗（Fisher 確切概率法）或秩和檢驗。篩選出與復發(fā)有關參數(shù)后，采用 Logistic 回歸分析。P<0.05 差異有統(tǒng)計學意義。結果
【學位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R445.1;R735.7

【共引文獻】

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1 謝長生;吳良村;;養(yǎng)陰清熱方對615小鼠HCa-F肝癌皮下移植瘤抑制作用的研究[A];浙江省中晚期腫瘤姑息治療研討會資料匯編[C];2007年

相關博士學位論文 前10條

1 于明安;微波消融聯(lián)合過繼免疫預防肝癌術后復發(fā)的實驗及臨床研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2011年

2 榮維淇;肝癌復發(fā)轉移相關標志蛋白的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2011年

3 高姍;上海市區(qū)原發(fā)性肝癌的流行病學研究[D];復旦大學;2011年

4 韓秀婕;超聲引導瘤區(qū)注射高聚生協(xié)同微波治療肝癌局部細胞免疫變化與臨床療效的研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2003年

5 張國安;生物質譜新技術及其在疾病蛋白質組研究中的應用[D];復旦大學;2003年

6 溫朝陽;微波凝固與手術切除治療原發(fā)性小肝癌對癌細胞播散入血的影響[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2004年

7 于曉玲;低機械指數(shù)實時灰階超聲造影評價治療后殘存肝癌及復發(fā)轉移的實驗及臨床研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2004年

8 羅速;肝腫瘤標志物與肝癌早期診斷的研究[D];吉林大學;2004年

9 毛煜;蛋白組高通量、高效、高靈敏分離分析新技術與新方法研究[D];復旦大學;2004年

10 彭艷;肝癌轉移相關蛋白及其兔單克隆抗體的篩選和鑒定[D];第二軍醫(yī)大學;2004年

本文編號：2670291