本文關鍵詞：重組胸腺素β4對放射性間質(zhì)性肺炎的治療作用及其機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的意義：放射性肺損傷是胸部腫瘤的放療、骨髓移植的預處理等常見而難治的并發(fā)癥之一,也見于戰(zhàn)時核輻射和平時核事故。放射性肺損傷早期的病理變化主要表現(xiàn)為間質(zhì)性肺炎(RIP),后期則以肺纖維化形成為主,嚴重降低患者的生存質(zhì)量,限制了臨床胸部腫瘤的放療,也是核事故救治的瓶頸問題之一。目前尚無有效的治療藥物,臨床常用的治療方法包括應用腎上腺皮質(zhì)激素、抗生素及吸氧祛痰等對癥處理,皮質(zhì)激素主要發(fā)揮的是抗炎效應,但其臨床有效率僅為治愈率僅5.88%,總有效率僅有64.71%,且有明顯的副作用,限制了其臨床應用。重組胸腺素β4是重組蛋白類藥物,屬胸腺素β4的衍生物,該化合物具有自主知識產(chǎn)權。既往研究表明重組胸腺素β4具有減輕炎癥反應、抗細胞凋亡以及減少膠原合成等作用,尚未見其用于放射性間質(zhì)性肺炎或其它原因所致間質(zhì)性肺炎的研究報道。因此,研究重組胸腺素β4對于放射性間質(zhì)性肺炎的治療作用,對于改善放射性肺損傷患者的生存質(zhì)量,提高臨床胸部腫瘤的放療效果及核事故救治水平,具有重要的理論和實際意義。材料和方法：1.150只C57BL/6J小鼠隨機分成6組(對照組、模型組、重組胸腺素β4低、中、高劑量組和地塞米松組),每組25只。采用20Gy X射線全胸照射建立RIP模型,重組胸腺素β4低、中和高劑量組的給藥劑量分別為1、5、25μg/kg,地塞米松給藥劑量為4.5mg/kg/次,2w后減半,均為腹腔注射給藥,1次/日,連續(xù)給藥30 d。通過小鼠死亡率、呼吸功能檢測、肺組織病理觀察、肺泡腔面積定量分析、肺組織炎性因子免疫組化法檢測等方法,研究重組胸腺素β4對小鼠RIP的治療作用,并初步探討其機制。2.體外培養(yǎng)RAW264.7細胞,使用IFN-γ和LPS誘導分化為M1亞型,以IL-4誘導分化為M2亞型。誘導分化后加入不同濃度的重組胸腺素β4(1、10、100、1000μg/ml),于給藥后24h、48h及72h應用MTT、ELISA等方法檢測細胞增殖活力、巨噬細胞分泌因子的表達。實驗結(jié)果：1.重組胸腺素β4對RIP小鼠死亡率的影響：RIP模型小鼠死亡率為12.0%,地塞米松組和高劑量組重組胸腺素β4組小鼠死亡率與模型組無顯著差異；低劑量重組胸腺素p4組(8.0%)和中劑量重組胸腺素p4組小鼠死亡率(4.0%)顯著低于模型組。2.重組胸腺素p4對RIP小鼠肺功能的影響：RIP小鼠肺功能多項指標異常,包括潮氣量、每分鐘通氣量、吸氣峰值、50%呼氣流量、呼氣峰值均顯著降低；重組胸腺素p4的應用可改善小鼠肺功能,顯著增加潮氣量、每分鐘通氣量、吸氣峰值、50%呼氣流量、吸氣峰值、呼氣峰值,且效果優(yōu)于地塞米松；三個劑量中以低和中劑量效果更佳。3.重組胸腺素p4對RIP小鼠肺組織病理變化的影響：重組胸腺素β4的應用可顯著減少肺組織炎細胞浸潤,明顯減輕肺泡壁增厚,顯著增加肺泡腔面積。三個劑量均有效,且效果優(yōu)于地塞米松,三個劑量中以低和中劑量效果更佳。4.重組胸腺素β4對RIP小鼠肺組織中各炎性因子表達的影響：(1)IL-6：對照組小鼠肺組織可見少量IL-6陽性巨噬細胞,模型組陽性巨噬細胞明顯增多,地塞米松組、低劑量和高劑量組的IL-6陽性巨噬細胞均可少于模型組。(2)IL-13：對照組小鼠肺組織可見少量IL-13陽性巨噬細胞,模型組、各給藥組以及地塞米松組小鼠肺組織IL-13陽性巨噬細胞明顯增多,各組之間未見顯著差異。(3)TNF-α:對照組小鼠肺組織可見少量TNF-α陽性巨噬細胞,模型組、地塞米松組、高劑量組的TNF-α陽性巨噬細胞較對照組明顯增多,低和中劑量組的TNF-α陽性巨噬細胞均可見少于模型組。(4)TGFβ:對照組小鼠肺組織可見少量TGFβ陽性巨噬細胞,模型組的TGFβ陽性巨噬細胞較對照組明顯增多,低、中和高劑量組的TGFβ陽性巨噬細胞均可見少于模型組。5.重組胸腺素p4對M1和M2型巨噬細胞增殖活力的影響：重組胸腺素β4處理后24和72h,1、10和100μg/ml組M1型巨噬細胞增殖活力較對照組顯著增強。重組胸腺素β4處理24h、48h,各劑量的重組胸腺素β4均能夠促進M2型巨噬細胞的增殖。重組胸腺素β4處理后24h、48h,M2型巨噬細胞增殖活力均較M1型巨噬細胞為強。6.重組胸腺素β4對M1和M2型巨噬細胞細胞因子分泌的影響：(1)TNF-α:各劑量組巨噬細胞分泌的TNF-α含量較對照組有所增高,以10μg/ml組最為顯著。(2)IL-13：各劑量組巨噬細胞分泌的的IL-13濃度較對照組均有所增高,但無統(tǒng)計學差異。(3)CTGF:Ml型巨噬細胞10組較對照組巨噬細胞分泌的CTGF顯著降低,其余各組均與對照組無顯著差異。M2型巨噬細胞除1μg/ml組較對照組巨噬細胞分泌的CTGF有所降低外,100、100μg/ml組較對照組巨噬細胞分泌的CTGF顯著增高。(4)TGFβ:1μg/ml組M1型巨噬細胞較對照組巨噬細胞分泌的TGFP有所增高外,其余各組均有所降低。除10μg/ml組M2型巨噬細胞較對照組巨噬細胞分泌的TGFP降低外,其余各組組均增高。結(jié)論：1.重組胸腺素β4可減輕小鼠放射性間質(zhì)性肺炎,表現(xiàn)為降低死亡率,改善肺功能,減輕肺組織間質(zhì)性炎性病變,增加肺泡腔面積；且效果優(yōu)于地塞米松。綜合各項指標,以1和5μg/kg的應用劑量效果為佳。重組胸腺素β4減輕TH1和TH2型免疫反應是其有效治療放射性間質(zhì)性肺炎的機制之一。2.重組胸腺素β4促進M1、M2型巨噬細胞的增殖,調(diào)節(jié)M1、M2型巨噬細胞TNF-α、IL-13、TGFβ和CTGF等細胞因子的分泌,為其治療放射性間質(zhì)性肺炎機制之一,以低濃度作用效果更為理想。
【關鍵詞】：重組胸腺素β4 放射 間質(zhì)性肺炎 巨噬細胞
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R730.55
【目錄】：

• 縮略詞表5-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-13
• 引言13-16
• 主要儀器設備16-17
• 第一部分 重組胸腺素β4對放射性間質(zhì)性肺炎的治療作用研究17-46
• 材料和方法17-22
• 一、實驗動物與分組17
• 二、照射方法17-18
• 三、給藥方法18
• 四、小鼠死亡率統(tǒng)計及一般情況觀察18
• 五、肺功能分析18-19
• 六、動物活殺取材與病理學檢查19-20
• 七、肺泡腔面積的測算20
• 八、免疫組織化學染色法檢測肺組織中IL-6、IL-13和TNFα、TGFβ的表達20-21
• 九、統(tǒng)計學處理21-22
• 結(jié)果22-38
• 一、重組胸腺素β4對RIP小鼠死亡率及一般情況的影響22-23
• 二、重組胸腺素β4對RIP小鼠呼吸功能的影響23-28
• 三、重組胸腺素β4對RIP小鼠肺組織結(jié)構(gòu)的影響28-30
• 四、重組胸腺素β4對RIP小鼠肺泡腔面積的影響30-31
• 五、重組胸腺素β4對RIP小鼠肺組織中IL-6、IL-13和TNFα、TGFβ的表達影響31-38
• 討論38-45
• 一、放射性間質(zhì)性肺炎模型的建立38-39
• 二、放射性間質(zhì)性肺炎的治療研究現(xiàn)狀39-40
• 三、重組胸腺素β4的研究現(xiàn)狀40
• 四、重組胸腺素β4對放射性間質(zhì)性肺炎的治療作用研究40-42
• 五、重組胸腺素β4對TH1/TH2免疫反應的調(diào)節(jié)在其治療RIP中的意義42-45
• 結(jié)論45-46
• 第二部分 重組胸腺素β4對小鼠RAW264.7生物學行為影響的研究46-58
• 材料和方法46-50
• 一、小鼠RAW264.7的傳代培養(yǎng)和誘導分型及給藥46-47
• 二、MTT比色法檢測細胞增殖活力47-48
• 三、ELISA試劑盒法檢測RAW264.7中細胞因子的表達48
• 四、統(tǒng)計學處理48-50
• 結(jié)果50-53
• 一、重組胸腺素β4對RAW264.7增殖活力的影響50-51
• 二、重組胸腺素β4對RAW264.7細胞因子分泌的影響51-53
• 討論53-57
• 一、重組胸腺素β4對RAW264.7增殖活力的影響及意義54-55
• 二、重組胸腺素β4對RAW264.7分泌細胞因子的影響及意義55-57
• 結(jié)論57-58
• 參考文獻58-64
• 附錄64-65
• 致謝65-66
• 綜述66-75
• 參考文獻72-75

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 曹珍山，葉常青，袁麗珍，，涂開成，樊飛躍，馬柳芳，楊瑞彪，張仁元;大鼠胸部受到20Gyγ線照射后肺組織的形態(tài)計量學改變[J];中華放射醫(yī)學與防護雜志;1996年03期

  本文關鍵詞：重組胸腺素β4對放射性間質(zhì)性肺炎的治療作用及其機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：257185