本文關(guān)鍵詞：重組胸腺素β4對(duì)放射性間質(zhì)性肺炎的治療作用及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的意義：放射性肺損傷是胸部腫瘤的放療、骨髓移植的預(yù)處理等常見(jiàn)而難治的并發(fā)癥之一,也見(jiàn)于戰(zhàn)時(shí)核輻射和平時(shí)核事故。放射性肺損傷早期的病理變化主要表現(xiàn)為間質(zhì)性肺炎(RIP),后期則以肺纖維化形成為主,嚴(yán)重降低患者的生存質(zhì)量,限制了臨床胸部腫瘤的放療,也是核事故救治的瓶頸問(wèn)題之一。目前尚無(wú)有效的治療藥物,臨床常用的治療方法包括應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素、抗生素及吸氧祛痰等對(duì)癥處理,皮質(zhì)激素主要發(fā)揮的是抗炎效應(yīng),但其臨床有效率僅為治愈率僅5.88%,總有效率僅有64.71%,且有明顯的副作用,限制了其臨床應(yīng)用。重組胸腺素β4是重組蛋白類藥物,屬胸腺素β4的衍生物,該化合物具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)。既往研究表明重組胸腺素β4具有減輕炎癥反應(yīng)、抗細(xì)胞凋亡以及減少膠原合成等作用,尚未見(jiàn)其用于放射性間質(zhì)性肺炎或其它原因所致間質(zhì)性肺炎的研究報(bào)道。因此,研究重組胸腺素β4對(duì)于放射性間質(zhì)性肺炎的治療作用,對(duì)于改善放射性肺損傷患者的生存質(zhì)量,提高臨床胸部腫瘤的放療效果及核事故救治水平,具有重要的理論和實(shí)際意義。材料和方法：1.150只C57BL/6J小鼠隨機(jī)分成6組(對(duì)照組、模型組、重組胸腺素β4低、中、高劑量組和地塞米松組),每組25只。采用20Gy X射線全胸照射建立RIP模型,重組胸腺素β4低、中和高劑量組的給藥劑量分別為1、5、25μg/kg,地塞米松給藥劑量為4.5mg/kg/次,2w后減半,均為腹腔注射給藥,1次/日,連續(xù)給藥30 d。通過(guò)小鼠死亡率、呼吸功能檢測(cè)、肺組織病理觀察、肺泡腔面積定量分析、肺組織炎性因子免疫組化法檢測(cè)等方法,研究重組胸腺素β4對(duì)小鼠RIP的治療作用,并初步探討其機(jī)制。2.體外培養(yǎng)RAW264.7細(xì)胞,使用IFN-γ和LPS誘導(dǎo)分化為M1亞型,以IL-4誘導(dǎo)分化為M2亞型。誘導(dǎo)分化后加入不同濃度的重組胸腺素β4(1、10、100、1000μg/ml),于給藥后24h、48h及72h應(yīng)用MTT、ELISA等方法檢測(cè)細(xì)胞增殖活力、巨噬細(xì)胞分泌因子的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1.重組胸腺素β4對(duì)RIP小鼠死亡率的影響：RIP模型小鼠死亡率為12.0%,地塞米松組和高劑量組重組胸腺素β4組小鼠死亡率與模型組無(wú)顯著差異；低劑量重組胸腺素p4組(8.0%)和中劑量重組胸腺素p4組小鼠死亡率(4.0%)顯著低于模型組。2.重組胸腺素p4對(duì)RIP小鼠肺功能的影響：RIP小鼠肺功能多項(xiàng)指標(biāo)異常,包括潮氣量、每分鐘通氣量、吸氣峰值、50%呼氣流量、呼氣峰值均顯著降低；重組胸腺素p4的應(yīng)用可改善小鼠肺功能,顯著增加潮氣量、每分鐘通氣量、吸氣峰值、50%呼氣流量、吸氣峰值、呼氣峰值,且效果優(yōu)于地塞米松；三個(gè)劑量中以低和中劑量效果更佳。3.重組胸腺素p4對(duì)RIP小鼠肺組織病理變化的影響：重組胸腺素β4的應(yīng)用可顯著減少肺組織炎細(xì)胞浸潤(rùn),明顯減輕肺泡壁增厚,顯著增加肺泡腔面積。三個(gè)劑量均有效,且效果優(yōu)于地塞米松,三個(gè)劑量中以低和中劑量效果更佳。4.重組胸腺素β4對(duì)RIP小鼠肺組織中各炎性因子表達(dá)的影響：(1)IL-6：對(duì)照組小鼠肺組織可見(jiàn)少量IL-6陽(yáng)性巨噬細(xì)胞,模型組陽(yáng)性巨噬細(xì)胞明顯增多,地塞米松組、低劑量和高劑量組的IL-6陽(yáng)性巨噬細(xì)胞均可少于模型組。(2)IL-13：對(duì)照組小鼠肺組織可見(jiàn)少量IL-13陽(yáng)性巨噬細(xì)胞,模型組、各給藥組以及地塞米松組小鼠肺組織IL-13陽(yáng)性巨噬細(xì)胞明顯增多,各組之間未見(jiàn)顯著差異。(3)TNF-α:對(duì)照組小鼠肺組織可見(jiàn)少量TNF-α陽(yáng)性巨噬細(xì)胞,模型組、地塞米松組、高劑量組的TNF-α陽(yáng)性巨噬細(xì)胞較對(duì)照組明顯增多,低和中劑量組的TNF-α陽(yáng)性巨噬細(xì)胞均可見(jiàn)少于模型組。(4)TGFβ:對(duì)照組小鼠肺組織可見(jiàn)少量TGFβ陽(yáng)性巨噬細(xì)胞,模型組的TGFβ陽(yáng)性巨噬細(xì)胞較對(duì)照組明顯增多,低、中和高劑量組的TGFβ陽(yáng)性巨噬細(xì)胞均可見(jiàn)少于模型組。5.重組胸腺素p4對(duì)M1和M2型巨噬細(xì)胞增殖活力的影響：重組胸腺素β4處理后24和72h,1、10和100μg/ml組M1型巨噬細(xì)胞增殖活力較對(duì)照組顯著增強(qiáng)。重組胸腺素β4處理24h、48h,各劑量的重組胸腺素β4均能夠促進(jìn)M2型巨噬細(xì)胞的增殖。重組胸腺素β4處理后24h、48h,M2型巨噬細(xì)胞增殖活力均較M1型巨噬細(xì)胞為強(qiáng)。6.重組胸腺素β4對(duì)M1和M2型巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子分泌的影響：(1)TNF-α:各劑量組巨噬細(xì)胞分泌的TNF-α含量較對(duì)照組有所增高,以10μg/ml組最為顯著。(2)IL-13：各劑量組巨噬細(xì)胞分泌的的IL-13濃度較對(duì)照組均有所增高,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(3)CTGF:Ml型巨噬細(xì)胞10組較對(duì)照組巨噬細(xì)胞分泌的CTGF顯著降低,其余各組均與對(duì)照組無(wú)顯著差異。M2型巨噬細(xì)胞除1μg/ml組較對(duì)照組巨噬細(xì)胞分泌的CTGF有所降低外,100、100μg/ml組較對(duì)照組巨噬細(xì)胞分泌的CTGF顯著增高。(4)TGFβ:1μg/ml組M1型巨噬細(xì)胞較對(duì)照組巨噬細(xì)胞分泌的TGFP有所增高外,其余各組均有所降低。除10μg/ml組M2型巨噬細(xì)胞較對(duì)照組巨噬細(xì)胞分泌的TGFP降低外,其余各組組均增高。結(jié)論：1.重組胸腺素β4可減輕小鼠放射性間質(zhì)性肺炎,表現(xiàn)為降低死亡率,改善肺功能,減輕肺組織間質(zhì)性炎性病變,增加肺泡腔面積；且效果優(yōu)于地塞米松。綜合各項(xiàng)指標(biāo),以1和5μg/kg的應(yīng)用劑量效果為佳。重組胸腺素β4減輕TH1和TH2型免疫反應(yīng)是其有效治療放射性間質(zhì)性肺炎的機(jī)制之一。2.重組胸腺素β4促進(jìn)M1、M2型巨噬細(xì)胞的增殖,調(diào)節(jié)M1、M2型巨噬細(xì)胞TNF-α、IL-13、TGFβ和CTGF等細(xì)胞因子的分泌,為其治療放射性間質(zhì)性肺炎機(jī)制之一,以低濃度作用效果更為理想。
【關(guān)鍵詞】：重組胸腺素β4 放射 間質(zhì)性肺炎 巨噬細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R730.55
【目錄】：

• 縮略詞表5-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-13
• 引言13-16
• 主要儀器設(shè)備16-17
• 第一部分 重組胸腺素β4對(duì)放射性間質(zhì)性肺炎的治療作用研究17-46
• 材料和方法17-22
• 一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組17
• 二、照射方法17-18
• 三、給藥方法18
• 四、小鼠死亡率統(tǒng)計(jì)及一般情況觀察18
• 五、肺功能分析18-19
• 六、動(dòng)物活殺取材與病理學(xué)檢查19-20
• 七、肺泡腔面積的測(cè)算20
• 八、免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)肺組織中IL-6、IL-13和TNFα、TGFβ的表達(dá)20-21
• 九、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理21-22
• 結(jié)果22-38
• 一、重組胸腺素β4對(duì)RIP小鼠死亡率及一般情況的影響22-23
• 二、重組胸腺素β4對(duì)RIP小鼠呼吸功能的影響23-28
• 三、重組胸腺素β4對(duì)RIP小鼠肺組織結(jié)構(gòu)的影響28-30
• 四、重組胸腺素β4對(duì)RIP小鼠肺泡腔面積的影響30-31
• 五、重組胸腺素β4對(duì)RIP小鼠肺組織中IL-6、IL-13和TNFα、TGFβ的表達(dá)影響31-38
• 討論38-45
• 一、放射性間質(zhì)性肺炎模型的建立38-39
• 二、放射性間質(zhì)性肺炎的治療研究現(xiàn)狀39-40
• 三、重組胸腺素β4的研究現(xiàn)狀40
• 四、重組胸腺素β4對(duì)放射性間質(zhì)性肺炎的治療作用研究40-42
• 五、重組胸腺素β4對(duì)TH1/TH2免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)在其治療RIP中的意義42-45
• 結(jié)論45-46
• 第二部分 重組胸腺素β4對(duì)小鼠RAW264.7生物學(xué)行為影響的研究46-58
• 材料和方法46-50
• 一、小鼠RAW264.7的傳代培養(yǎng)和誘導(dǎo)分型及給藥46-47
• 二、MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖活力47-48
• 三、ELISA試劑盒法檢測(cè)RAW264.7中細(xì)胞因子的表達(dá)48
• 四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理48-50
• 結(jié)果50-53
• 一、重組胸腺素β4對(duì)RAW264.7增殖活力的影響50-51
• 二、重組胸腺素β4對(duì)RAW264.7細(xì)胞因子分泌的影響51-53
• 討論53-57
• 一、重組胸腺素β4對(duì)RAW264.7增殖活力的影響及意義54-55
• 二、重組胸腺素β4對(duì)RAW264.7分泌細(xì)胞因子的影響及意義55-57
• 結(jié)論57-58
• 參考文獻(xiàn)58-64
• 附錄64-65
• 致謝65-66
• 綜述66-75
• 參考文獻(xiàn)72-75

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 曹珍山，葉常青，袁麗珍，，涂開(kāi)成，樊飛躍，馬柳芳，楊瑞彪，張仁元;大鼠胸部受到20Gyγ線照射后肺組織的形態(tài)計(jì)量學(xué)改變[J];中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志;1996年03期

  本文關(guān)鍵詞：重組胸腺素β4對(duì)放射性間質(zhì)性肺炎的治療作用及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：257185