本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)免放射性肺損傷治療的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外分離培養(yǎng)和標(biāo)記方法，為進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究打下基礎(chǔ)。 方法：無菌條件下取下兔子雙側(cè)股骨，獲取骨髓后全骨髓貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，采用細(xì)胞計(jì)數(shù)方法繪制傳代培養(yǎng)的生長曲線；DAPI標(biāo)記干細(xì)胞，免疫熒光顯微鏡觀察熒光標(biāo)記率，比較干細(xì)胞標(biāo)記前后的生長情況。 結(jié)果：體外培養(yǎng)的兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為貼壁生長，長梭形，可形成漩渦樣結(jié)構(gòu)；DAPI標(biāo)記骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞后細(xì)胞核呈藍(lán)色熒光，標(biāo)記后干細(xì)胞生長狀態(tài)良好，其生長特性和狀態(tài)無明顯改變。 結(jié)論：全骨髓培養(yǎng)法可獲得純度較高的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞干細(xì)胞，原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的BMSCs具有較好的增值能力；DAPI可成功標(biāo)記兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，對(duì)干細(xì)胞生長無影響。 目的：探討建立與臨床時(shí)間情況相符的慢性肺損傷動(dòng)物模型的可行性，為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究奠定基礎(chǔ)。 方法：新西蘭白兔12只，分成右全肺照射組(n=8)和正常對(duì)照組(n=4)，按SAD定角等中心照射技術(shù)照射建立慢性放射右全肺損傷兔模型，并于照射后第2、4、8w行CT及病理學(xué)檢查。 結(jié)果：照射后4w內(nèi)，CT和病理學(xué)檢查呈急性肺炎表現(xiàn)；照射8w后，CT可見條索樣改變，而HE染色鏡下檢查則見肺泡壁增厚呈纖維化改變，Masson染色見肺間質(zhì)膠原纖維增多。 結(jié)論：按SAD定角等中心照射技術(shù)建立兔慢性放射肺損傷模型是可行的。 目的：探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)慢性放射肺損傷的治療作用及相關(guān)作用機(jī)制。 方法：全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞并用DAPI標(biāo)記；建立兔慢性放射右全肺損傷模型，分為治療組和對(duì)照組；將DAPI標(biāo)記好的BMSCs經(jīng)耳緣靜脈注射入治療組動(dòng)物體內(nèi)；在治療后第2d，2w，5w、10w四個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每組處死相同比例的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，取其肺臟，行冰凍切片、免疫組化等檢測(cè)研究干細(xì)胞對(duì)肺損傷的治療作用及機(jī)制。 結(jié)果：干細(xì)胞移植后第2d，治療組右肺組織冰凍切片可見明顯標(biāo)記干細(xì)胞，左肺見極少量標(biāo)記干細(xì)胞，而對(duì)照組未見標(biāo)記干細(xì)胞；2w時(shí)標(biāo)記干細(xì)胞數(shù)量減少； HE染色可見實(shí)驗(yàn)組的肺纖維化程度較對(duì)照組明顯減輕；免疫組化可見治療組肺泡上皮凋亡因子Bax較對(duì)照組表達(dá)明顯減弱，而凋亡抑制因子Bcl-2則較對(duì)照組表達(dá)增強(qiáng)。 結(jié)論：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可向放射損傷的肺組織聚集，并可減輕放射肺損傷肺組織的纖維化程度。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 DAPI 原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng) 放射性肺損傷 右全肺照射 SAD 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 放射性肺損傷 細(xì)胞凋亡 Bcl-2 Bax
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R818
【目錄】：

• 中文摘要15-6
• 中文摘要26-7
• 中文摘要37-8
• ABSTRACT18-9
• ABSTRACT29-10
• ABSTRACT310-11
• 英漢縮略詞對(duì)照表11-12
• 前言12-14
• 第一部分 兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及標(biāo)記14-22
• 一、 材料和方法14-17
• 1. 材料和實(shí)驗(yàn)設(shè)備14-15
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法15-17
• 二、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-20
• 1. 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)17
• 2. 傳代細(xì)胞的生長曲線17
• 3. DAPI 標(biāo)記干細(xì)胞情況分析17
• 4. DAPI 對(duì) BMSCs 生長情況的影響情況分析17-20
• 三、 討論20-21
• 四、 結(jié)論21-22
• 第二部分 兔慢性放射肺損傷模型的建立及鑒定22-30
• 一、 材料和方法22-24
• 1. 材料和實(shí)驗(yàn)設(shè)備22
• 2. 方法22-24
• 二、 結(jié)果24-28
• 1. 病理學(xué)觀察24
• 2. 影像學(xué)表現(xiàn) CT 圖像表現(xiàn)24-28
• 三、 討論28-29
• 四、 結(jié)論29-30
• 第三部分 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)兔放射肺損傷的治療研究30-41
• 一、 材料和方法30-33
• 1. 材料和實(shí)驗(yàn)設(shè)備30-31
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法31-33
• 二、 結(jié)果33-38
• 1. 冰凍切片結(jié)果33
• 2. 病理學(xué)觀察33
• 3. 肺組織羥脯氨酸測(cè)定 ..33
• 4. 肺組織內(nèi) Bcl-2/Bax 的表達(dá)情況33-34
• 5. 肺組織內(nèi) bFGF 的表達(dá)34-38
• 三、 討論38-40
• 四、 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 文獻(xiàn)綜述45-56
• 參考文獻(xiàn)52-56
• 攻讀研究生期間發(fā)表文章56-57
• 致謝57-58
• 桂林醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文答辯資格審查表58

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 刁瑞英;宋良文;王少霞;李明;徐新萍;;TGF-β1在照射后肺損傷早期重建中的作用研究[J];輻射研究與輻射工藝學(xué)報(bào);2007年03期

2 朱峰;郭光華;詹劍華;謝安;;兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外BrdU標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)研究[J];廣東醫(yī)學(xué);2010年15期

3 姜亦瑤;白雪;張璋;林靜;高國亮;劉美蓮;杜振宗;;慢性放射性肺損傷模型建立的初步研究[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2011年02期

4 張潔e

本文編號(hào)：252739